الفهرس 
Introduction and Aim of the WorkOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 180 |  |  |
| | | from | 180 | | |
Abstract
يعد سرطان القولون والمستقيم أحد أكثر الأورام الخبيثة شيوعًا في جميع أنحاء العالم في السنوات الأخيرة ، حيث احتل المرتبة الثالثة بين أكثر أنواع السرطان تشخيصًا وثاني سبب رئيسي للوفاة المرتبطة بالسرطان في جميع أنحاء العالم. احتل أيضا المرتبة السابعة بين أكثر الأورام الخبيثة انتشارًا في مصر ، مع ما يقرب من 53٪ من اجمالى حالات سرطانات الجهاز الهضمي. من مشاكل سرطان القولون والمستقيم أنه لا يمكن اكتشاف العلامات والأعراض بسهولة ، ويتم التعرف على العلامات والأعراض المقلقة في الغالب في المراحل المتأخرة عندما يبدأ الانتشار الخبيث للورم ، ويصبح معدل البقاء على قيد الحياة 10-15٪. تم تحديد عوامل وراثية متعددة على أنها لها دور في حدوث سرطان القولون والمستقيم ، وقد يساعد تحديدها في تعزيز الوقاية من سرطان القولون والمستقيم وتقليل نسبة الوفيات.
في السنوات الأخيرة ، أصبحت الخزعة السائلة استراتيجية مهمة لمعالجة ومراقبة المشهد الجزيئي لدلالات الورم المنتشرة في سوائل الجسم. الاكسوزومات هى أحد المكونات الرئيسية الموجودة في الخزعات السائلة. و هى حويصلات خارج الخلية ذات بنية نانوية تفرزها جميع أنواع الخلايا تقريبًا و يحمي الغشاء ثنائي الطبقة الدهنية المحيط بها العديد من المكونات الداخلية مثل الحمض النووي (DNA) ، و الحمض النووى الريبوزى الرسول (mRNAs) ، و الحمض النووى الريبوزى الطويل غير المشفر (lncRNAs) ، و الحمض النووى الريبوزى الدقيق (miRNAs) ، والبروتينات من التحلل ، ويمكن استخدامها بحرية في العديد من سوائل الجسم الخارجية كمؤشرات حيوية سريرية في الخزعات السائلة. تلعب الاكسوزومات دورًا مهمًا في التواصل بين الخلايا وتطور الأورام الخبيثة. لذلك ، فهي أهداف مثيرة للاهتمام لتطوير أدوات جديدة للكشف عن السرطان.
إنزيم النيكوتيناميد الناقل لجزئ الريبوز المُتَفسفت (NAMPT) هو الإنزيم الأيضي الذي يحد من المعدل المسؤول عن المسار الرئيسي لإعادة تدوير نيكوتيناميد أدينين ثنائي النوكليوتيد من نيكوتيناميد. يتم التعبير عن NAMPT بشكل كبير في مجموعة متنوعة من الخلايا السرطانية ، مما يشير إلى زيادة الاعتماد المحتمل على هذا الطريق بسبب الاستخدام العالي للنيكوتيناميد (NAD). فى دراسة سابقة للانزيم NAMPT تم التعبير عنه بشكل كبير في أنسجة سرطان القولون والمستقيم وكان مرتبطًا بالانتشار فى الأوعية الدموية والاستجابة الضعيفة لعلاج سرطان القولون والمستقيم.
تم اكتشاف NAMPT-AS lncRNA لأول مرة من خلال دراسة أجريت على مرضى سرطان الثدى الثلاثى السلبى (TNBC) ، وأظهرت أن NAMPT-AS ارتبط تعبيره العالي بالبقاء على قيد الحياة لفترة أقصر بشكل عام والبقاء على قيد الحياة مع وجود انتكاس في مرضى سرطان الثدي ، و لذلك تم تحديده كعلامة بيولوجية تنبؤية لسرطان الثدى. كما وجدوا أيضًا أن NAMPT-AS يمكن أن يتحكم في تعبير بروتين NAMPT قبل وبعد النسخ.
لذلك ، هدفت الدراسة الى:
1. استكشاف نمط التعبير عن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى وتحديد دوره كمؤشر بيولوجي جزيئي ووسيط جديد يمكن أن يشارك في تطور و خطورة سرطان القولون والمستقيم. تم تحقيق ذلك من خلال دراسة العلاقة بين lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى مع بروتين NAMPT فى مصل الدم ومع أنسجة سرطان القولون والمستقيم.
2. مقارنة مستوى انتاج lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى ، و mRNA NAMPT الاكسوزومى ، وبروتين مصل الدم NAMPT في كل من مجموعة الأصحاء ومجموعات سرطان القولون والمستقيم ، ومقارنة مستوى التعبير عن lncRNA NAMPT-AS و mRNA NAMPT في كل من عينات أنسجة ورم سرطان القولون والمستقيم و أنسجة جوانب الأمان الخاصة بهم كمجموعة التحكم الصحى الضابطة.
3. دراسة إمكانية استخدامهم كمؤشرات بيولوجية تشخيصية و / أو تنبؤية لـ سرطان القولون والمستقيم.
تم اجراء الدراسة على 58 شخص من مرضى سرطان القولون والمستقيم (24 من الذكور و 34 من الإناث) ، بمتوسط عمر 59.62 ± 1.48 ، تم قبولهم في قسم جراحة القولون والمستقيم ، كلية الطب ، جامعة عين شمس ، مصر.
بالإضافة إلى 28 شخص من المتطوعين الأصحاء (13 من الذكور و 15 من الاناث) ، بمتوسط عمر 55.18 ± 1.49 تم تضمينهم كمجموعة ضابطة. تم اختيارهم لكونهم متطوعين أصحاء ، ولم يتناولوا أي دواء أو يعانون من أي مرض. تم سحب عينات مصل الدم لقياس مستويات تعبير الأحماض النووية (lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى ، و mRNA NAMPT الاكسوزومى) باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، وكذلك بروتين NAMPT باستخدام الإليزا (ELISA)، جنبًا إلى جنب مع بيانات التشخيص السريري. كما تم أخذ 13 زوجًا من عينات أنسجة الورم مع جوانب الأمان المجاورة لها بعد جراحة استئصال الورم لقياس تعبير الأحماض النووية (lncRNA NAMPT-AS و mRNA NAMPT) باستخدام ال PCR، بالإضافة إلى بروتينات NAMPT و Ki67 باستخدام التحاليل المناعية (IHC).
وجدنا زيادة كبيرة في التعبير عن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى (p=0.025)، mRNA NAMPT الاكسوزومى (p=0.029)، وبروتين مصل الدم NAMPT (p=0.049) في مصل دم مرضى سرطان القولون والمستقيم مقارنة بالمتطوعين الأصحاء ، وجدنا أيضًا زيادة في التعبير عن lncRNA NAMPT-AS و mRNA NAMPT في أنسجة ورم سرطان القولون والمستقيم مقارنة بجوانب الأمان المجاورة لها. بالإضافة إلى ذلك ، وجدنا علاقة إيجابية مهمة بين lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى و mRNA NAMPT الاكسوزومى ، بين lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى وبروتين مصل الدم NAMPT، بين lncRNA NAMPT-AS النسيجى و mRNA NAMPT النسيجى، بين lncRNA NAMPT-AS النسيجى و mRNA NAMPT الاكسوزومى وبين mRNA NAMPT النسيجى وmRNA NAMPT الاكسوزومى. يمكننا أن نستنتج أن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى يمكن أن يكون له تأثير على mRNA NAMPT الاكسوزومى وتعبيرات بروتين مصل الدم NAMPT، كما يمكن أن يؤثر lncRNA NAMPT-AS النسيجى على التعبير عن mRNA NAMPT النسيجى، بروتين NAMPT النسيجى ، lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى، mRNA NAMPT الاكسوزومى ، وبروتين مصل الدم NAMPT.
بناءً على الخصوصية و الحساسية و القيمة التنبؤية الإيجابية (PPV) و القيمة التنبؤية السلبية (NPV) التي تم الحصول عليها من منحنى خاصية تشغيل المستقبل ROC)) ، لاحظنا أن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى ، و mRNA NAMPT الاكسوزومى ، وبروتين مصل الدم NAMPT كانت مؤشرات جيدة لتشخيص سرطان القولون والمستقيم ، وعلاوة على ذلك ، فإن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى و mRNA NAMPT الاكسوزومى أظهرا قدرة تشخيصية أكبر للكشف عن المرحلة المبكرة من سرطان القولون والمستقيم. بالإضافة إلى ذلك ، تم الكشف عن زيادة كبيرة في الخصائص التشخيصية والحساسيات و المنطقة الواقعة تحت المنحنى (AUC)عندما قمنا بدمج المؤشرات الحيوية التي تم فحصها ( lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى مع mRNA NAMPT الاكسوزومى وبروتين مصل الدمNAMPT) معًا في التمييز بين المجموعة السليمة الضابطة مع مجموعة سرطان القولون والمستقيم من المرحلة 2 التي تظهر خصوصية 71.4٪ وحساسية 100٪ مع AUC 0.883 و PPV 46.7٪ و NPV 100٪.
من هذه الدراسة يمكن استخلاص أن lncRNA NAMPT-AS الاكسوزومى يمكن أن يؤثر على تقدم سرطان القولون والمستقيم ويمكن استخدامه كمؤشر حيوي جديد لتشخيص و / أو متابعة سرطان القولون والمستقيم بالإضافة إلى استهدافه كهدف علاجي جديد لعلاج سرطان القولون والمستقيم.