Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
INTERDISCIPLINARY LABORATORY TRIALS FOR ISOLATION AND charACTERIZATION OF PATHOGENIC FREE-LIVING AMOEBAE from THE EGYPTIAN ENVIRONMENT \
المؤلف
Marouf, Mohamed Ali Ibrahim Osman.
هيئة الاعداد
باحث / محمد على إبراهيم عثمان معروف
مشرف / أمين عبد الباقي عاشور
مشرف / محمد إبراهيم سليمان
مشرف / أحمد زكريا سالم الهراوي
تاريخ النشر
2022.
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
علم الحيوان والطب البيطري
تاريخ الإجازة
1/1/2022
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية العلوم - علم الحيوان
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 222

from 222

Abstract

تتواجد الأميبات حرة المعيشة فى جميع انحاء العالم وقد وجد أنها تستطيع أن تسبب عدوى شديدة للإنسان والحيوان والطير. وبسبب انتشار وضراوة هذه العدوى كان لزاما علينا استخدام أنواع مختلفة من البيئات حتى نستطيع عزل الأميبا حرة المعيشة الممرضة من البيئة.
في هذه الدراسة، تم جمع عدد 96 عينة مياه من مداخل ومخارج محطات معالجة مياه الشرب التقليدية والمدمجة، وتم ترشيح هذه العينات على أغشية النيتروسليلوز (بحجم مسام 0.45 ميكروميتر) وتم زرعها على بيئة مغطاة ببكتيريا إيشرشيا كولاى (E. coli)كما تم فحص العينات الإيجابية للتعريف المورفولوجيللأجناس مثل Acanthamoeba و Vermamoeba و Naegleria. .تم التاكيد على النتائج المرفولوجية باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR). و تم عمل تحاليل التسلسل الجينى (sequence analysis)على عدد تسعة عشر عينة من جنس Acanthamoeba وكذلك اثنان من جنس Vermamoebaوواحدة فقط من جنس Naegleria.
أوضحت النتائج أن أنواع الأميبات حرة المعيشة الموجودة المهيمنة في عينات المياه السطحية بمحافظة الجيزة كانت تنتمي إلى Acanthamoeba بنسبة 68.8 %. وتم تأكيد ذلك باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل للعينات الإيجابية مورفولوجيا لل Acanthamoeba. وقد أظهرت محطة المعالجة التقليدية نتائج أفضل فى إزالة Acanthamoeba و Vermamoeba vermiformisبنسبة تصل الى 66.7% , بينما أظهرت محطة المعالجة المدمجة نسبة إزالة لنفس الأنواع تصل الى 50%.تم الحصول على ثلاثة أنماط جينية مختلفة من Acanthamoeba هم T3و T4 و T15ونوع واحد من جنسVermamoebaهوVermamoebavermiformis، و نوع واحد من جنس Naegleriaهو Naegleriaclarki. للمرة الاولي في مصر يتم عزل وتعريف كلا من Vermamoeba vermiformis و Naegleria clarkiعلى مستوي الجينوم.
تم استخدام هذه السلالات Vermamoebavermiformis و Naegleriaclarkiو Acanthamoeba genotype T4في تجارب معملية متعددة باستخدام بيئات مختلفة (PYG و RPMI و RPMI-FBS و BHI و 993TSY وDMEM+FBSوTSA مزودة بدم الأغنام) وبيئات أحادية مختلفة فيه نوع واحد من غذاء الأميبات }مثل البكتيريا (Staphylococcus epidermis، Bacillus subtilis ، E. coli,Pseudomonas aeruginosa) والطحالب (Scenedesmus obliquus و Microcystis flosaquae و Chlamydomonas reinhardtii){ للتحقق من نمو الأميبات علي هذه السلالات.
كان نمو سلالة Acanthamoeba T4 على أجار غير مغذي مضاف اليه Scenedesmus obliquusأو Chlamydomonas reinhardti أفضل من نمو Naegleriaclarki و Vermamoebavermiformis. أظهر نمو سلالة Acanthamoeba T4 و Vermamoebavermiformis و Naegleriaclarki نمو جيد باستخدام Staphylococcusepidermis ، تليها Bacillussubtilis و E. coli و Pseudomonas aeruginosa على التوالي. كان نمو النمط الجيني Acanthamoeba T4 باستخدام وسائط PYG أفضل من الأنواع الأخرى المسببة للأمراض من الاميبات حرة المعيشة. علاوة على ذلك، أظهرت السلالة Acanthamoebagenotype T4 و Vermamoebavermiformis و Naegleriaclarki نتائج على البيئة الصلبة لل PYG أفضل من البيئة السائلة لل PYG. كان نمو سلالة Acanthamoeba T4أفضل من نمو أنواع الاميبات حرة المعيشة الأخرى ، عند الزراعة على RPMI و RPMI-FBS كان نمو Acanthamoeba T4 و Vermamoebavermiformis و Naegleriaclarki على RPMI-FBS أفضل من نمو RPMI.
في الختام، أ ظهرت أمحطة المعالجة التقليدية لمياه الشرب فعالية أكثر من محطة المعالجة المدمجة فى إزالة الاميبات حرة المعيشة.كما أن وجود سلالات Acanthamoeba التى يصعب القضاء عليها وخاصة الأنواع المسببة للأمراض مثل Acanthamoeba T4 في المياه المعالجة قد يسبب مخاطر صحية كبيرة للمستهلكين. أظهر التحليل الإحصائي أن سلالات البكتيريا خاصة الأنواع الموجبة للجرام والطحالب تعد اختيارًا جيدًا لزراعة الاميبات حرة المعيشة في المختبر. كان نمو أنواع الاميبات حرة المعيشة باستخدام RPMI و PYGيتزايد بالترتيب التالي؛ النمط الجيني Acanthamoeba T4 افضل من Naegleriaclarki والتي بدورها افضل نموا من Vermamoeba vermiformis.