Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
UTILIZATION OF MYCORRHIZAE AND Pseudomonas fluorescens IN CONTROLLING ROOT KNOT NEMATODE ON SOME PLANTS OF FAMILY SOLANACEAE \
المؤلف
SALEH, NORA RAMADAN ABD EL-AATY.
هيئة الاعداد
باحث / نورا رمضان عبد العاطى صالح
مشرف / أحمد عيدعبد المجيد محجوب
مشرف / وفاء محمد عبد الحميد النجدي
مشرف / مني محمد سعيد زايد
تاريخ النشر
2021.
عدد الصفحات
122 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علم الحيوان والطب البيطري
تاريخ الإجازة
1/1/2021
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية الزراعة - وقاية النبات
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 120

from 120

Abstract

تعتبر نيماتودا تعقد الجذور جنس Meloidogyne من أهم اجناس النيماتودا المتطفلة على النبات ويرجع ذلك الى عدة عوامل من أهمها الانتشار السريع فى جميع انحاء العالم على مدى عوائلى واسع ومنها بعض محاصيل الخضر مما يؤدى إلى خسائر اقتصادية كبيرة تصل الى 80% وكذلك تداخلها مع الأحياء الأخرى مثل الفطر والبكتيريا فى إحداث الكثير من الأمراض النباتيه المركبة التى يصعب مكافحتها بالإضافة ان هذه النيماتودا تستطيع كسر مقاومة بعض النباتات ضد بعض الممرضات المرضية الأخرى مما دفع كثير من المزارعين إلى مكافحة هذه الآفة بإستخدام المبيدات النيماتودية الكيميائية والتى كان لها الأثر الضار على البيئة وصحة الانسان والحيوان ولجأ العلماء الى إستخدام وسائل بديلة آمنة للبيئة ومنها إستخدام بعض الكائنات الدقيقة النافعة المضادة لفعل النيماتودا. وقد وجد ان بكتيريا سيدوموناس فلوريسنس لها قدرة على تيسير العناصر الغذائية للنبات وتحث النبات على المقاومة عن طريق تحفيز الجهاز الدفاعى للنبات على إنتاج انزيمات المقاومة ضد النيماتودا كما انها تفرزمركبات ذات سمية خارجية تؤثر على الجدار الخارجى لليرقات والبيض للنيماتودا. كما ان الميكوريزا هى فطريات نافعة للنبات حيث تعمل على زيادة مسطح الجذر وبالتالى تساعد النبات على زيادة امتصاص الماء والغذاء والاملاح المعدنية خاصة الفوسفور وتستمد تلك الفطريات الاحماض الامينية والفيتامينات من النبات العائل، كما ان هذه الفطريات تكثر فى الاراضى الفقيرة فى الفوسفور والنتروجين وكذلك حول النباتات الغنية بالكربوايدرات الميسرة.وهى فطريات اجبارية التطفل ومنها الداخلية والخارجية التطفل على جذر العائل و تنتج جراثيم اسكية.
ثبتت من الأبحاث العلمية السابقة وجود علاقة فريدة بين فطر الميكوريزا وبكتيريا سيدوموناس فلوريسنس وخفض الإصابة بنيماتودا تعقد الجذور التي تصيب بعض محاصيل الخضر ومنها الطماطم والباذنجان وتسبب تدهور ونقص في نمو هذه النباتات. وتكون المكافحة ضد النيماتودا في مثل تلك الحالة عن طريق زيادة تحمل النبات للإصابة النيماتودية من خلال المعاملة بفطر الميكوريزا والبكتيريا سيدوموناس فلوريسنس خاصة قبل حدوث الاصابة بالنيماتودا حيث يحدث إستعمار فطر الميكوريزا للجذور ومنافسة النيماتودا علي مكان التغذية في النبات وكذلك استحثاث المقاومة فى النبات ضد النيماتودا بواسطة البكتيريا او الميكوريزا المستخدمة مما ينعكس ايجابيا علي تحسين نمو النبات كما ونوعا.

تم تصميم هذا العمل لدراسة:
1- التقيييم الحيوى ودراسة كفاءة عزلات مختلفة من بكتريا سيدوموناس فلوريسنس على معدل فقس بيض نيماتودا تعقد الجذور وعلى النسبة المئوية لموت اليرقات .
وقد اسفرت النتائج عن زيادة النسبة المئوية لتثبيط البيض وإنخفاض اعداد الطور اليرقى الثانى لنيماتودا تعقد الجذورممثلة بالنسبة المئوية لموت اليرقات بدرجات مختلفة لكل العزلات مقارنة بالكنترول (النيماتودا غير المعاملة بعزلات البكتيريا) متأثرة بتركيز البكتيريا المستخدم (25،50%) وطول فترة التعريض(24،48،72،96 ساعة).
بالنسبة للبيض وجد ان النسبة المئوية لتثبيط البيض زادت بزيادة تركيز البكتيريا وطول فترة التعرض للبكتيريا، فعند تركيز البكتيريا 25% وجد أن اعلى نسبة مئوية لتثبيط البيض (55.6%) قد تم تحقيقها بواسطة عزلة البكتيريا Pf9 ويليها النسبة (44.1%) بواسطة العزلة Pf5 بعد 72 ساعة ثم زادت النسبة المئوية لتثبيط البيض الى 61.7% و70.0% بواسطة نفس العزلتين على التوالى بعد 96 ساعة. وعند تركيز 50% بعد 24 ساعة وجد أن اعلى نسبة مئوية لتثبيط البيض (83.3%) قد تحققت بواسطة العزلة 9Pf يليها العزلة 7Pf (72.2%) ولكن انخفضت النسبة المئوية بعد 96 ساعة.
وبالنسبة لليرقات وجد أن اعلى نسبة مئوية لموت اليرقات (95.9 ) قد تحققت بواسطة عزلة البكتيريا Pf7 بعد 24 ساعة عند التركيز 25% وزادت الى 100% بعد 48 ساعة ويلها العزلة Pf5. وعند التركيز 50% بعد 24 ساعة وجد ان اعلى نسبة مئوية (98.2%) قد تحققت بواسطة العزلة Pf5 يليها العزلة (95.9)Pf7 ثم (94.1) Pf1 ثم 9(%90.0) Pf، وبعد ذلك وصلت النسبة المئوية للموت الى 100% بعد ذلك.
2- اختبار تأثير عزلات مختلفة من بكتريا سيدوموناس فلورسينيس على الكثافة العددية لنيماتودا تعقد الجذور ميلويدوجين انكوجنيتا علي بعض نباتات الخضر مثل الطماطم والباذنجان وكذلك على النمو الخضرى لكلا النباتين.
وقد اسفرت النتائج علي أن جميع العزلات المستخدمة أدت الى خفض أعداد نيماتودا تعقد الجذور على الطماطم متمثلة فى أعداد الطور اليرقى الثانى فى التربة والجذور وعدد الإناث وكتل البيض والبيض لكل مجموع جذري وكذلك أعداد العقد النيماتودية مقارنة بالكنترول.
واتضح من النتائج ان العزلة 2Pf قد سجلت أعلى نسبة مئوية لموت اعداد النيماتودا (66.1%) على الطماطم صنف كاسل روك على اساس متوسط مجموع النسب المئوية الكلية لنقص النيماتودا لكل عزلة على حده يليها العزلة Pf3 حيث سجلت 59.7% يليه المركب التجارى ميكرونيما (58.6%).
كذلك بالنسبة للنمو الخضرى لنبات الطماطم فقد تفاوتت الزيادة فى النمو الخضرى بين عزلات البكتيريا المختلفة وكانت اقوى العزلات Pf9 حيث سببت اعلى نسبة مئوية للزيادة قدرها 49.0% يليها العزلة Pf4 (34.0%) على اساس متوسط النسب المئوية للزيادة فى الصفات الخضرية لكل عزلة. وبالنسبة لوزن الثمار(بالجرام) سببت العزلة Pf4 اعلى نسبة مئوية للزيادة (83.5%) يليها العزلة Pf5(54.9%).
وعلى الباذنجان صنف آيس سجلت العزلة Pf10 أعلى نسبة مئوية لموت اعداد النيماتودا (75.6%) على اساس متوسط النسب المئوية لنقص النيماتودا يليها العزلة Pf2(65.6 %) ثم العزلة Pf9( 62.2%).
3- تأثير اضافة اربعة عزلات من بكتريا سيدوموناس فلوريسنس Pf10,Pf9,Pf2,Pf1)) قبل وأثناء وبعد وقت العدوى بنيماتودا تعقد الجذور ميلويدوجين انكوجنيتا على نبات الباذنجان صنف آيس ودراسة التغيرات البيوكيميائية بعد شهر من العدوى بنيماتودا تعقد الجذور أثناء نمو النباتات.
وأتضح من نتائج التجربة أنه عندما أضيفت البكتيريا للتربة المنزرع بها نباتات الباذنجان سواء قبل وبعد إضافة نيماتودا تعقد الجذور بثلاث أيام أدى ذلك الى تخفيض أعداد النيماتودا بنسبة أعلى (69.8%) على اساس متوسط النسب المئوية للصفات النيماتودية لكل العزلات تحت الدراسة ، بينما عن العدوى بالنيماتودا واضافة البكتيريا فى نفس الوقت كانت نسبة الخفض (54.4).كذلك سلكت اعداد العقد النيماتودية نفس الاتجاه حيث سجلت أعلى نسبة نقص قدرها 60.3 %بعد إضافة البكتيريا قبل النيماتودا يليها النسبة 48.5% عند وضع البكتيريا بعد النيماتودا بينما عند اضافة البكتيريا والنيماتودا معا فى نقس الوقت انخفضت نسبة النقص للنيماتودا الى 13.2% فقط .بالمقارنة بالمعاملة المعدية بالنيماتودا فقط (الكنترول).
وعند دراسة النشاط الإنزيمى وجد زيادة فى نشاط انزيم البيروكسيداز فى معاملة اضافة البكتيريا عزلة 2Pf بعد النيماتودا (4.344%) يليه المعاملة عند اضافة االبكتيريا عزلة Pf1 مع النيماتودا فى نفس الوقت (3.662%) . وبالنسبة لإنزيم بولى فينول اوكسيداز وجد أن المعاملة عندما اضيفت البكتيريا عزلة2Pf مع النيماتودا فى نفس الوقت سجلت أعلى نسبة مئوية للزيادة (6.135%) يليها المعاملة عندما اضيفت العزلة Pf1 من البكتيريا قبل النيماتودا بثلاث أيام (5.321%).
كذلك أدت المعاملات الى زيادة الصقات الخضرية تحت الدراسة وسجلت اعلى متوسط لنسب الزيادة الكلية لكل العزلات وقدرها 55.5%عندما اضيفت البكتيريا قبل النيماتودا بثلات أيام يليها النسب 29.9% و 28.4% بعد اضافة النياتودا قبل البكتيريا بثلاث أيام ثم اضافة البكتيريا والنيماتودا فى نفس الوقت هلى التوالى بالمقارنة بالمعاملة المعدية بالنيماتودا فقط. وبالمقارنة بالنياتات السليمة المضاف إليها البكتيريا فقط وجدت زيادة كبيرة فى الصفات الخضرية وهى 237.5%بواسطة العزلة Pf9 تلاها النسب 145.5، 106.5 و 100.1% بواسطة العزلات Pf1 ،10Pf،Pf2 على التوالي مع متوسط كلى قدره 147.4 لكل العزلات.
4- تأثيرإضافة اربعة عزلات من بكتيريا سيدوموناس فلورسينيس Pf1، 2Pf،9Pf، 10 Pfمع لقاح فطر الميكوريزا منفردة أو مجتمعة قبل واثناء ويعد وضع العدوى بنيماتودا تعقد الجذور ميلويدوجين انكوجنيتا على الكثافة العددية لنيماتودا تعقد الجذور على نبات الباذنجان صنف آيس متمثلة فى عدد كتل البيض وعدد البيض وعدد الإناث وكذلك العقد النيماتودية ومعدل استعمار فطر الميكورهيزا لجذور نبات الباذنجان.
وقد اسفرت النتائج عن أن المعاملات المركبة او المشتركة من فطر الميكوريزا وبكتيريا سيدوموناس فلوريسنس حققت نتائج افضل فى خفض اعداد نيماتودا تعقد الجذور فى جذر نبات البازنجان صنف آيس وكلك زيادة صفات النمو الخضرى تحت الدراسة. فبالنسبة للمعاملات المركبة من البكتيريا المضافة الى الميكوريزا قبل العدوى بنيماتودا تعقد الجذور سجلت اعلى متوسط للنسب المئوية لنقص النيماتودا وهى% 94.1،91.3،88.9،81.8 بواسطة العزلات Pf1،Pf9, Pf2،Pf10 على الترتيب + الميكوريزا مع متوسط كلى لجميع العزلات قدره %89.0 لكل العزلات اكثر من نفس العزلات عندما اضيفت مع الميكوريزا فى نفس الوقت مع النيماتودا حيث حدث خفض فى اعداد النيماتودا قدره %86.8 على اساس المتوسط الكلى للنقص فى النيماتودا لجميع العزلات. من ناحية اخرى عند المعاملة الفردية بالبكتيريا + النيماتودا سجلت انخفاضا اقل للنيماتودا فدره% 81 . فقط متوسطا لكل العزلات.
كذلك كان تأثير المعاملات المركبة من البكتيريا والميكوريزا كان له أتره الأكبر على الصفات الخضرية لنبات البازنجان حيث حققت كل من عزلات البكتيريا Pf1 ، Pf2،9Pf، Pf10المضافة الى الميكوريزا قبل العدوى بالنيماتودا القيم الاعلى لمتوسطات النسب المئوية للزيادة فى النمو الخصرى لكل عزلة (%171.0،169.2،166.7،146) على التوالى بمتوسط كلى لكل العزلات قدرة% 163.3 بالمقارنة بنفس العزلات عندما اضيفت بمفردها الى النيماتودا حيث كانت نسبة الزيادة فى النمو الخضرى %144.3 لكل العزلات. وبعد حساب معامل السمية المشترك لعزلا ت البكتيريا والميكوريزا سواء أضيفت التربة فى نفس الوقت مع نيماتودا تعقد الجذور أو قبل النيماتودا بأسبوع سجلت تلك العزلات مع الميكوريزا تأثيرا وكفاءة مشتركة على متوسط النسب المئوية الكلية لنقص النيماتودا. .وبالنسبة لمعدل استعمار الميكوريزا للجذر وجد ان اعلى نسبة مئوية لإستعمار الفطر قدرها% 37 فى حالة اضافة عزلات البكتيريا بدون نيماتودا بينما المعاملة بنفس العزلات فى حالة العدوى بالنيماتودا سببت تسبة اقل 35%. بينما عند اضافة عزلات البكتيريا 7 ايام قبل العدوى بالنيماتودا كان معدل استعمار الميكوريزا %40. وعند اضافة الميكوريزا فقط 7 ايام قبل العدوى بالنيماتودا كان معدل استعمار الفطر قدره% 60.
5- تأثير اضافة لقاح الميكورهيزا وبكتيريا سيدوموناس فلورسينيس فى صوانى الشتل لنبات الباذنجان غير مصابة نيماتودا تعقد الجذور ميلويدوجين انكوجنيتا قبل وبعد نقلها الى الأصص المستديمة المصابة بالنيماتودا فى الصوبة السلكية ودراسة التغيرات الأنزيمية أثناء نمو النباتات (بعد 15 يوم من العدوى بالنيماتودا).
بالنسبة للمشتل:
اتضح ان المعاملة المشتركة من الميكوريزا والبكتيريا كان اكثر تفوقا من الميكوريزا او البكتيريا منفردين حيث أن المعاملة المشتركة أدت الى زيادة % 68.3 فى متوسط النسب المئوية للزيادات فكل من طول المجموع الخضرى والوزن الخضرى والجاف للمجموع الخضرى والجذور بالمقارنة بالنسبتين %64.3 و% 33.7 للمعاملة بواسطة الميكوريزا أو البكتيريا على الترتيب.
يالنسبة للأصص المستديمة:
أثبتت المعاملات المختلفة من بكتيريا سيدوموناس فلوريسنس والميكوريزا سواء المنفردة أو المشتركة فعاليتها فى تخفيض الكثافة العددية لنيماتودا تعقد الجذور ميلويدوجين انكوجنيتا على الباذنجان. عند اضافة البكتيريا فقط فى المشتل مع التيماتودا فى الاصص المستديمة ادى ذلك الى أعلى خفض معنوى لصفات التكاثر النيماتودية (86.3 %) بالمقارنة بالمعاملة عند اضافة البكتيريا مرتان فى المشتل والاصص المستديمة مع النيماتودا (62.93%) والاصص المعاملة بالنيماتودا فقط (الكنترول) كذلك المعاملة بالميكوريزا فقط فى المشتل واضافة النيماتودا فى المكان المستديم ادى ذلك الى تخفيض الكثافة العددية لنيماتودا تعقد الجذور بنسبة 74. 75% بالمقارنة بالمعاملة عند اضافة الميكوريزا مرتان فى المشتل والاصص المستديمة (60.45%). بينما المعاملا ت الاخرى المضاف اليها النيماتودا أظهرت تأثيرا مستقلا.
ادت المعاملات المختلفة من بكتيريا سيدوموناس فلوريسنس والميكوريزا سواء المنفردة أو المشتركة الى تحسين صفات النمو الخضرية ووزن الثمار بالمفارنة بالكنترول.وكانت المعاملة عند اضافة البكتيريا منفردة قى المشتل واضافة التيماتودا قى المكان المستديم من افضل المغاملات حيث أدت الى زيادة النمو الخصرى ووزن الثمار بنسبة 49.8% يليها النسبة 45.6% عند اضافة البكتيريا والميكوريزا فى المشتل معا واضافة النيماتودا فى المكان المستديم. بينما كانت أقل نسبة للزيادة 23.8% عند اضافة البكتيريا والميكوريزا معا فى المشتل والمكان المستديم والعدوى بالنيماتودا.وفى حالة المعاملات الخالية من النيماتودا وجد ان المعاملة عند اضافة البكتيريا والميكوريزا مرتين معا فى المشتل والمكان المستديم حيث حققت نسبة زبادة فى الصفات الخضرية والثمار قدرها 64.3% يليها النسبة 47.3% عند اضافة البكتيريا منفردة فى المشتل والميكوريزا فى المكان المستديم , وبالنسبة لمعدل استعمار قطر الميكوريزا لجذر البازنجان تم تسجيل أعلى نسبة مئوية (50%) فى جالة اللقاح بالميكوريزا بدون نيماتودا يلها النسبة 40% فى حالة العدوى بالنيماتودا فى المكان المستديم.
وعند دراسة النشاط الانزيمى وجدت زيادة متناسبة طرديا مع نسبة النقص فى النيماتودا، فعند اضافة البكتيريا فقط فى المشتل مع التيماتودا فى الاصص المستديمة ادى ذلك الى زيادة معنوية لانزيم البيروكسيداز (202.9%) ولم يحدث زيادة فى المعاملة عند اضافة البكتيريا مرتان فى المشتل والاصص المستديمة مع النيماتودا (39.7%-) عند المقارنة بالاصص المعاملة بالنيماتودا فقط (الكنترول). بينما المعاملا ت الاخرى المضاف أوالتي لم يضاف اليها النيماتودا أظهرت تأثيرا مستقلا ولم يحدث زيادة فى معظم الحالات. وبالنسبة لانزيم البولى فينول اوكسيداز إزداد نشاطه عندما اضيفت المعاملات مرة واحدة فى المشتل مع النيماتودا فى الاصص المستديمة فى معظم الحالات بينما لم يحدث زيادة فى النشاط الانزيمى خاصة فى المعاملات التى لم يضاف اليها النيماتودا ما عدا المعاملة التى اضيفت اليها. االميكوريزا مرتان فى المشتل والمكان المستديم.