Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Treatment of cryptosporidiosis using Nigella sativa (El Baraka seed oil) conjugated with Chitosan nanoparticles \
المؤلف
Hassan, Walaa Ahmed Hussein Mohamed.
هيئة الاعداد
باحث / ولاء أحمد حسين محمد حسن
مشرف / إجلال أبو السعود قورة
مشرف / إبراهيم ربيع بيومي شلش
مشرف / الفت علي إبراهيم همام
تاريخ النشر
2019.
عدد الصفحات
236 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
علم الحيوان والطب البيطري
تاريخ الإجازة
1/1/2019
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية البنات - علم الحيوان
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 236

from 236

Abstract

الكريبتوسبوريديم بارفم منالاولياتالمسببةلمرض الكريبتوسبوريديوسيس، وهو مرض معوي يصيب العديد من الثدييات بما في ذلك الانسان.وعادة مرض الكريبتوسبوريديوسيس تكون ٲعراضه محدودةفي الافراد الاصحاء بينما في الافرادالذين يعانون من نقص المناعة مثل مرضى الإيدزيسببعدوى حادة ومستمرة يمكن أن تهدد حياتهم.
التقنيات التقليدية للكشف عن بويضات الكريبتوسبوريديم (مثل الفحص المجهري لعينات البراز بالصبغات السريعة الحمضية) ليست فعالة في تحديد الأجناس ولذلك تم تطوير التقنيات الجزيئية للكشف عن الكريبتوسبوريديم وتمييزه على مستوى النمط الجينيللأجناس والنوع الفرعي.
تمت الموافقة علىnitazoxanideفقط من قبل الإدارة الفيدرالية للأدوية(FDA)لعلاج العدويبالكريبتوسبوريديمفي الأفراد ذوي الكفاءة المناعية، لكن هذا غير معتمد للمرضى الذين يعانون من نقص المناعة.وبالتالي لا يزال توافر الأدوية المضادة لعلاج المرضى المصابين محدودًا للغاية.تم استخدام بذور حبة البركة كعلاج طبي للعديد من الأمراض واثبتت نشاطهاالجيد ضد مضادات الكوكسيديا بدون أي آثار جانبية ضارة على الأرانب.في السنوات الأخيرة استخدم الشيتوزان (CS) كعامل مضادللميكروبات ولقد اظهرنشاط جسيمات النانو الشيتوزان ان لديه إمكانيات قوية مضادة للميكروبات.
اجريت هذه الدراسة لقياس فعالية جسيمات النانو الشيتوزان وحدها او المحملةبنيجيلا ساتيفا (زيت بذور حبة البركة) المستخدمة في علاج داء الكريبتوسبوريديوسيس في الفئرانذات الكفاءة المناعية والتي تعانيمن نقص المناعة.
أجريت الدراسة على ١۲۰من ذكور الفئران البيضاءCD1٬ التي تتراوح أعمارهم بين ٦ - ٨ أسابيع وتزن ۲۰-۲٥جرام والتي تم الحصول عليها من معهد تيودوربيلهارس للابحاث (TBRI) وتم تقسيمها إلى ثلاث مجموعات رئيسية.
تتكون المجموعة الضابطة (A) من ۲۰ فار (غير معديةغير ذات كفاءة مناعية وتعاني من نقصالمناعة). ٲما المجموعة (B) فهي المجموعة المصابة من ذوي الكفاءة المناعية التي تضم ٥۰ فارتم اصابتهمبانبوب فممعوي. تم تلقيح كل فأر ب ۲۰۰ ميكرولبتر من PBS المحتوي على ٣١۰منالاكباس البيضية الناضجةللكربتوسبوريديم بارفم. المجموعة(C)هي المجموعة المصابة وتعاني من نقص المناعةتشتمل على ٥۰فار تم حقنهمبالديكساميثازونعن طريق الفم بجرعةتبلغ ۲٥,۰ ملجم / كجملمدة ١٤ يومًا ثلاث مرات في الأسبوع، ثم تم تلقيح كل فأر ب۲۰۰ ميكروليتر من PBS المحتوي على ٣١۰ من الاكياس البيضية الناضحةللكربتوسبوريديم بارفم.تم تقسيم كلا المجموعتينB وC إلى خمس مجموعات فرعية مصابة. المجموعة الفرعية (B1) المصابة وذات كفاءة مناعية بينما المجموعة الفرعية (B2) المصابة والمعالجة بالنتازوكسانيد(NTZ) ،والمجموعة الفرعية (B3) المصابة والمعالجة بـزيت حبة البركة Nigella sativa (Baraka) ، (B4) المصابة والمعالجة بالجسيمات النانو الشيتوزان و(B5) المصابة والمعالجة بزيت حيةالبركة المحملة علي الشيتوزان. بينما المجموعة الفرعية (C1) المصابة وتعاني من نقص المناعة بينما المجموعة الفرعية (C2)المصابة وتعاني من نقص المناعةوالمعالجة بـ NTZ ،(C3)المصابة وتعاني من نقص المناعةومُعالجة بحبة البركة، (C4) المصابة وتعاني من نفص المناعةومعالجة بالشيتوزان والمجموعة الفرعية (C5) المصابة وتعاني من نفص المناعةومعالجة بزيت حيةالبركة المحملة عليالشيتوزان.
تم إجراء تحليل البراز وتم حساب عدد الاكياس البيضبةللكريبتوسبوريديم / جمللدراسة الطفيلية. وتم تشريح أربعة فئران من كل مجموعة في اليوم١٨ بعد الإصابة لفحص الاكياس البيضية المتواجدة في الاثني عشر، وتم جمع محتويات الاثني عشر من الفئران المتبقية في اليوم٣۰ بعد الإصابة لحسابالاكياس البيضية / مل.
كانت النسبة المئوية للانخفاض في عدد الاكياس البيضيةللكريبتوسبوريديم بارفم بعد سبعة عشر يومًا من العلاج (٣۰ يوم من الاصابة)في المجموعة المعالجة بزيت حبة البركة المحملة علي الشيتوزان (٣,٩۰٪)بمجموعة (B5) ، والتي كانت ذات دلالة إحصائية عالية (p <0.001) ، ولكن في حالة المجموعة المصابة وتعاني من نقص المناعةوالمعالجة بحبة البركة والشيتوزان(C5) ، كانت النسبة المئوية لنقص الاكياس البيضية (٦,٧٨٪) والتي تعطي أيضًا دلالة إحصائية عالية جدًا(P<0.001) وكانت النسبة المئوية للانخفاض في عدد الاكياس البيضبةللكربتوسبوريديم بارفم في محتوي الاثني عشر بعد أربعة أيام من العلاج (١٨يومًامن الاصابة) في المجموعة B5 (٩,۲٧٪(، ولكن في المجموعةالمصابة وتعاني من نقص المناعةC5 (٨,۲٦٪ (، ولكن بعد سبعة عشر يومًا من العلاج (٣۰يومًامن الاصابة)كانت النسبة المئوية للانخفاض فيB5 (٦٤٪)و (٥۲٪) فيC5.
كثير من التغيرات النسيجيةلوحظت في الأمعاء من المجموعة المصابة وتعاني من نقص المناعةانها اظهرت وجود استسقاء(الوذمة المعوية) بسبب مرض الكربتوسبوريديمالمزمن كما لوحظ وجود طفيل الكربتوسبوريديم بارفم في مراحل مختلفة بالخلايا الطلائية.المجموعة المصابة وتعاني من نقص المناعةوالمعالجةﺑ(C2)NTZظهر بها ضمور شديد بالخملات وايضاحصل تغير في التركيب الطلائي مع غيابخلايا الافراز المخاطي نتيجة تراجع في نشاط الخلايا الكأسية وانتشار الخلايا الالتهابية خاصة في الصفيحة الاصلية. أيضا لم يظهراينقص في عدد الكربتوسبوريديم.بعد العلاج بحبة البركةالمحملة علي الشيتوزانتم شفاء الغشاءالمخاطيفيالأمعاء.
يرتبط الكبد مباشرة هستولوجيابالأمعاء بالوريد البابي. أظهرتالقطاعات النسيجية في مجموعة(C1) تحلل نسيجي فجوي مائي في بعض الاماكن بينما بعض الاشرطة الكبدية تبدو طبيعية بعد ٣۰ يوما من الاصابة .بينما أظهرت المجموعتان B5 و C5 المصابتان و المعالجتان بحبة البركة والشيتوزان تحسنا ملحوظا في البناء النسيجي الكبدي بالاضافة الي تجمعات خلايا التهابية (ليمفاوية) بين الفصوص الكبدية في المجموعة.C5
الاعراض المرضية لنسيجالكلي اوضحت تحلل خلوي في نسيج القشرة والكبيبات الكلوية مع ضيق في الفراغ حول الكبيبة (Bowman space) في مجموعات B1 و C1كما ظهر تهتك وتاكل في بطانة كل من الانابيب الملتفة القريبة والبعيدة. في هذه الدراسة، أظهرت هذه المجموعات B3 و B4 و B5 و C3 و C4 و C5 تحسن ملحوظ في القشرة ومكوناتها من الكبيباتالكلوية وكذلك الانيبات الكلوية.
كما تم تقييم الاستجابة المناعية لمجموعات نقص المناعة المعالجة والمصابة. ولقد لوحط ازديادIgMالمضادة لـCryptosporidiumبشكل ملحوظ في مجموعة الفئران غير المعالجةC1، ولكن في الفئران التي تم معالجتهابحبة البركة المحملة علي الشيتوزانمجموعةC5، انخفض معدلIgMبشكل ملحوظ عند مقارنته بالمجموعات المصابة الأخرى (المجموعات C2 و C3 و.(C4 كما أظهرت مضادات الكريبتوسبوريديومIgGللمجموعات التي تعاني من نفصالمناعة زيادة كبيرة في الفئران المصابة غير المعالجةC1، بينما في الفئران التي تلقتحبة البركة المحملة علي الشيتوزان مجموعةC5، انخفضIgGبشكل ملحوظ عند مقارنتها بالمجموعات المصابة الأخرى (المجموعاتC2 و C3و.(C4
يمكن اعتبار الكبد والكلى من الاعضاء التي يتمتراكم جزيئات النانو بها، ولذلكتم قياس التاثيرات السامة على هذه الأعضاء مثل الجلوتاثيون (GSH) وMalondialdehyde (MDA) في الفئران التي تعاني من نقص المناعة، أظهر مستوى هذه القياسات في المجموعات المصابة انخفاضًا في القيمة مقارنة بالمجموعات العادية غير المصابة. بينما في الفئران التي عولجت بحبة البركة المحملة علي الشيتوزان، انخفضت كلالقياسات السامة للوصول تقريبا لمستويات الفئران العادية.