الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 167 |  |  |
| | | from | 167 | | |
Abstract
أجريت هذه الدراسة في منطقة الخطاطبة (محافظة المنوفية)، بينما التجربة المعملية نفذت في معمل بحوث زراعة الأنسجة و حفظ الاصول الوراثية وايضا مختبر التكنولوجيا الحيوية معهد بحوث البساتين، مركز البحوث الزراعية. اختيرت اشجار لاربعة اصول قوية وهي أم الفحم، ام دالت (اصول لوز) واوكيناوا و هانسن(اصول خوخ)
أجريت الدراسة من خلال ثلاثة تجارب:
1-تمت التجربة الحقلية بتلقيح اصول ام الفحم و ام دالت كاشجار الأم بينما استخدمت اشجار أوكيناوا وهانسن كملقحات.
2-الاكثار المعملى للهجن الناتجة.
3-الكشف عن ثبات وجود صفة مقاومة النيماتودا في الهجن الجديدة.
1 -الـتـجـربـة الـحـقــلـــيـة:
تهدف هذه التجربة إلى تلقيح أشجار الأمهات (أم الفحم و ام دالت) بلقاح أشجار الملقحات (أوكيناوا وهانسن). جمعت زهور الملقحات قبل التفتح وبعد يوم واحد جمعت حبوب اللقاح و حفظت لحين استخدامها.
تم خصى أزهار الأمهات ثم لقحت بحبوب لقاح الاباء وتم تكييسها بحقائب بيرجامين حتى تم عقد الثمار. ثم تم جمع بذور الهجن الجديدة في مرحلة الحصاد. تم تنضيد البذور حتى يناير، ثم زرعت في الصوبة لمدة ستة أشهر.
بلغت نسبة عقد الثمارفى تهجين أم الفحم X أوكيناوا أعلى قيمة (56.67) والعكس الصحيح مع نسبة التساقط. سجلت أعلى قيمة معنوية للانبات (100) للبذور الناتجة من التهجين بين ”أم الفحمX هانسن”. الهجن الناتجة من”أم الفحم X هانسن” سجل الهجين رقم15 أعلى قيمة معنوية لطول الشتلات (64.4)، الهجين رقم 16 اعطى أعلى سمك للجذع (0.4) بينما سجل الهجين رقم 1 أعلى قيمة معنوية لعدد الأوراق (61).وكانت أعلى قيمة معنوية لطول الشتلات(70.1) للهجن الناتجة من ”أم الفحم X هانسن” (الهجين رقم 2). تم الحصول على أعلى قيمة من سمك الجذع للشتلات مع الهجين رقم 1 (0.42)، سجل الهجين رقم 3 أعلى قيمة معنوية لعدد الاوراق (63) .اما الهجن الناتجة من ” ام دالت X أوكيناوا” سجل الهجين رقم 13 أعلى قيمة معنوية لطول الشتلات (67.5). وسجل الهجين رقم3 &4 أعلى قيمة سمك جذع الشتلات (0.43)، فى حين سجل الهجين رقم 3 أعلى قيمة لعدد الأوراق (57). الهجن الناتجة من ”ام دالت X هانسن” سجل الهجين رقم2 أعلى قيمة لطول شتلات (53.7)، واعطى الهجين رقم 2 اعلى سمك جذع الشتلات (0.44) وعدد الاوراق (48).
2-التجربة المعملية:
2-1-تجربة زراعة الانسجة:
تهدف هذه التجربة إلى الحصول على اعداد كافية للأنماط الوراثية الجديدة الناتجة من التهجينات المختلفة سابقة الذكر.
أ-مرحلة التاسيس:
استخدمت كلا من القمة النامية و العقدة الساقية من الهجن المختلفة كمنفصلات للزراعة. تم تعقيمها باستخدام محلول الكلوركس التجاري بتركيز10% لمدة 10 دقائق. ثم زرعت على بيئة موراشيج و سكوج مع اضافة 7جم أجار و 30جم سكر لكل لتر.
الهجن الناتجة من ”أم الفحم x أوكيناوا” سجل الهجين رقم 11 و13 مع العقدة الساقية اعلى نسبة لتطور البراعم (100%). بينما أظهر الهجين رقم 8مع القمة النامية أطول افرخ (2.36). الهجن الناتجة من ”أم الفحم x هانسن” اعطى الهجين رقم3 مع العقدة الساقية أعلى قيمة لتطور البراعم (100%) بينما الهجين رقم 2 مع كلا المنفصلات سجل اطول الافرخ (2.05 و2.19 سم). الهجن الناتجة من ”أوكيناوا X ام دالت” تم الحصول على اعلى قيمة لنسبة تطور البراعم من الهجين رقم1 مع العقدة الساقية (88.9%) وسجل الهجين رقم 4 مع العقدة الساقية اطول الافرخ 2.2 سم. الهجن الناتجة من ”هانسن X ام دالت” سجلت أعلى قيمة معنوية لتطور البراعم مع الهجينان1 ،2 مع العقدة الساقية (66.7%) وبالمثل كان الهجين 2 مع القمة النامية (55.6). بينما لم تظهر اختلافات معنوية بالنسبة لطول الفرخ.
ب-مرحلة التضاعف:
استخدمت الافرخ الناتجة من مرحلة التاسيس فى مرحلة التضاعف. حيث فصلت الافرخ بطول 1.5-2 سم وزرعت على بيئة موراشيج وسكوج الكاملة القوة مع اضافة 0.5 ملجم بنزيل ادينين و0.1 ملجم اندول حمض البيوتريك.
الهجن الناتجة من ”ام الفحم X أوكيناوا” تفوقت الهجن 8 و10 و13 بالنقلة الثالثة فى عدد الافرخ الناتجة (6.80 و 6.92 7.33 على التوالي) وكذلك الهجين رقم 13 بالنقلة الثانية (6.08).بينما اعطت النقلة الثالثة اطول الافرخ مع الهجين رقم 6 و12 و15(4.84 ،4.84 ، 5.07 على التوالى).
الهجن الناتجة من ”أم الفحم xهانسن” حقق الهجين رقم 1 مع النقلة الثالثة اعلى قيمة لعدد الافرخ الناتجة (5.73). بينما اعطى الهجين رقم 4 مع النقلة الثالثة اطول الافرخ (4.92). الهجن الناتجة من ”ام دالت X اوكيناوا” حقق كل من الهجين2، 5 فى النقلة الثالثة اعلى معدل تضاعف للافرخ (4.66 و 4.77 على التوالي). بينما النقلة الثالثة مع الهجين 3،5 كانت اطول الافرخ (4.75 و 4.81).
الهجن الناتجة من ”ام دالتX الهانسن” حصل الهجين رقم2 مع النقلة الثالثة على اعلى عدد من الافرخ المتتضاعفة (4.33). بينما سجل الهجين رقم1 مع النقلة الثالثة اطول افرخ (4.85).
ج-مرحلة التجذير:
نقلت الافرخ الناتجة من مرحلة التضاعف الى برطمانات بها 40 مل من بيئة موراشيج و سكوج نصف قوة مضاف اليها 0.4ملجم/لتر اندول حمض البيوتيريك و0.8ملجم/لتر نفثالين وبعد اربع اسابيع على بيئة التجذير سجلت كل من النسبة المئوية للتجذير وعدد الجذور لكل نبيتة ومتوسط طول الجذور بالسم.
الهجن الناتجة من ”أم الفحم x أوكيناوا” تم الحصول على أعلى قيمة معنوية لنسبة التجذير ومتوسط عدد الجذور للهجين 9 (53.3،5.13 ) وبالنسبة لطول الجذور اعلى قيمة معنوية سجلت مع الهجين رقم7 (4.57).
الهجن الناتجة من ”أم الفحم x هانسن” أعلى نسبة تجذير حققها الهجين رقم1(73.33) و الهجين رقم4 (66.67).واعطى الهجين رقم 4 أعلى قيمة معنوية لعدد الجذور ومتوسط طول الجذور (5.33 ،5.11).
الهجن الناتجة من ”ام دالت X اوكيناوا” سجل الهجين 2 و7 اعلى نسبة تجذير (53.3) واعطى الهجين رقم 1و2 أعلى قيمة معنوية لعدد الجذر (5.36 و 5.00 على التوالي). الهجن الناتجة من ”هانسن X ام دالت” لا يوجد بينها اختلافات معنوية فى كل القياسات ( نسبة التجذير وعدد الجذور ومتوسط طول الجذر).
2-2-الكشف بالبادئات الجزيئية التى يرجع لها مقاومة نيماتودا تعقد الجذور:
استخدمت نوعين من الواسمات الجزيئية لتعريف المعلمات المرتبطة بصفة مقاومة النيماتودا .
البادئ Pchgms1 اعطى حزمة ترجع الى مقاومة نيماتودا تعقد الجذور ظهرت فى جميع الهجن ما عدا الهجين رقم6 للهجن الناتجة من (أم الفحم x أوكيناوا) والهجين1 للهجن الناتجة من (ام دالت x أوكيناوا).
بينما البادئ OPA11 اظهر الحزمة الدالة علي مقاومة النيماتودا فى كل الهجن ما عدا الهجين رقم 7،8،15 للهجن الناتجة من (ام الفحم x اوكيناوا) .والهجين رقم 8 للهجن الناتجة من ( ام دالت x اوكيناوا) الحزمة الدالة على مقاومة نيماتودا تعقد الجذور لم تظهر كل الهجن الناتجة من الهانسن X ام دالت وفي الهجين رقم 1 من أم الفحم x هانسن.
البادئ OP834B اعطى حزمة عند وزن جزيئي 136 زوج من القواعد في كل الهجن ما عدا الهجن رقم 7،8،9،10،11 للهجن الناتجة من (أم الفحم x أوكيناوا) و الهجين رقم 8 للهجن الناتجة من (ام دالت x اوكيناوا).ايضا لم يظهر البادئ فى الهجين رقم 1،2 للهجن الناتجة من (ام دالت x هانسن) و الهجين رقم 3،4 للهجن الناتجة من (أم الفحم x هانسن).
اعطى البادئ OPAP4 حزمة عند الوزن 420 زوج من القواعد فقط فى الهجين 5 من الهجن الناتجة من (أم الفحم x أوكيناوا).بينما الحزمة الاخرى من البادئ OPAP4 ظهرت فى كل الهجن ما عدا الهجين رقم 10،12 ،13 من الهجن الناتجة من (أم الفحم x أوكيناوا) و الهجين رقم 7،8 للهجن الناتجة من(ام دالت x اوكيناوا) و ظهرت فى كل هجن الهانسن.
3-تقييم بعض هجن اللوز والخوخ لمقاومتها لنيماتودا تعقد الجذور
تم تقييم عشرة من هجن الخوخ مع اللوز و الاصل الجذوري الهانسن لمقاومتها لنيماتودا تعقد الجذور كان الاختلاف بينها طفيف.حيث اظهر الهجين 6(الناتج من تهجين الاوكيناوا مع ام الفحم) وك\لك الهجين 2 الناتج من (الهانسن مع ام الفحم) مناعة للاصابة بالنيماتودا حيث لم يعطى اى منهما تدرنات سواء ف التربة او نسيج الجذور في نهاية التجربة. علي الوجه الاخر باقي الهجن المستخدمة اظهرت مقاومة عالية حيث كان عدد تدرنات الجذور قليله في الهجين 4،5 (الناتج من الاوكيناوا مع ام الفحم. او الهجين 3 (الناتج من الهانسن مع ام الفحم) والهجين 2 الناتج من الهانسن مع ام دالت