الفهرس 
Introduction & Aim of the workOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 225 |  |  |
| | | from | 225 | | |
Abstract
يوجد عدد كبير من النباتات التى تفرز العصير اللبنى، ويعرف بإسم اللثى الذى يعتبر من المكونات السيتوبلازمية للخلايا التى تكونه وهو يحتوى على القلويات والمركبات التربينية والراتينجات والصمغيات والنشا والزيوت وعدد كبيرمن البروتينات والأنشطة الإنزيمية. وقد تم إجراء العديد من البحوث لتنمية العمليات المعتمدة على إستخدام البيروكسيديز المستخلص من النباتات لمعالجة مياة الصرف المحتوية على الصبغات المخلقة التى تستخدم بشكل كبير في مجال المنسوجات و صناعة الورق و الصناعات الصيدلية و مستحضرات التجميل و الصناعات الغذائية.
وقد وجد أن أكثرمن 8 × 10 5 طن من أنوع مختلفة من الصبغات تنتج سنوياً في العالم، منها 50000 طن يتم التخلص منها بطريقة غير آمنة في الطبيعة حيث أن لها أثار سمية أومسرطنة على الكائنات الحية. وتهدف دراستنا الحالية التى تعتبر الأولى فى فصل وتنقية متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية (اللثى) لشجر التين البرشومى (الفيكس كاريكا) ودراسة قدرتها على إزالة لون بعض الصبغات المخلقة
وتتلخص النتائج التى تم الحصول عليها فى هذه الدراسة على مايلى:
1- تم تنقية ثلاثة أنواع من متشابهات إنزيم البيروكسيديز(FP1 و FP2و FP3) من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا بواسطة الفصل الكروماتوجرافى بالتبادل الأيونى على أعمدة الكربوكسى ميثيل سيفاروز و ثنائى إيثيل أمينو إيثيل سيفاروزو ثم الترشيح على عمود جل السيفاكريل إس- 200
2- كما تم تنقية متشابة إنزيم البيروكسيديز FP1 (البيروكسيديزالكاتيونى) إلى درجة التجانس باستخدام الفصل الكروماتوجرافى بالتبادل الكاتيونى على عمود الكربوكسى ميثيل سيفاروزو بدرجة نقاوة 0,79 والنسبة المئوية للإسترجاع كانت 11,32%. يلية الفصل بالترشيح على عمود جل السيفاكريل إس- 200 بدرجة نقاوة إرتفعت إلى 1,70 بنسبة إسترجاع مئوية 10,65%. وكما تم فصل متشابهين إنزيمين أخرين FP2 و FP3 جزئيا بواسطة التبادل الأنيونى على عمود ثنائى إيثيل أمينو إيثيل سيفاروزو بدرجة نقاوة2,20 و4,76 والنسبة المئوية للفصل كانت1,98 % و2,58% ،على التوالى .
3- وقد تم تقدير الوزن الجزيئى لمتشابه إنزيم الببروكسيديز FP1 من المنحنى القياسى لعمود جل السيفاكريل إس-200 حيث بلغت قيمة الوزن الجزيئى 30 كيلو دالتون وقد تأكدت هذه القيمة بإستخدام طريقة الفصل الكهربى على جل كبريتات دودسيل الصوديوم بولى أكريلميد حيث هاجر بروتين FP1 كحزمة واحدة مما يدل على أنFP1 يتكون من وحدة واحدة.
4- وقد وجدت درجة الحرارة المثلى لمتشابهات إنزيم البيروكسيديز المفصولة من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا وهم FP1 و FP2 وFP3 40و30 و40 درجة مئوية .و قد تم دراسة ثباتية درجة الحرارة لمتشابهات إنزيم البيروكسيديز FP1 و FP2و FP3فى درجات حرارة مختلفة تتراوح من 10 إلى 80 درجة مئوية ووجد أن لها ثباتية حرارة عند 50 و40 و30 درجة مئوية، على التوالى.
5- وجد أن متشابهى إنزيم البيروكسيديزFP1 و FP3لديهما أس هيدروجينى أمثل عند.5,5، بينما وجد أن قيمة الأس الهيدروجينى الأمثل لمتشابه إنزيم FP2 عند 7. وبالنسبة إلى ثبات النشاط الإنزيمى فى تركيزات أيون الهيدروجين المختلفة، قد فقد الثلاثة متشابهات لإنزيم البيروكسيديز المفصولة من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا FP1) وFP2 وFP3) معظم نشاطهم عند الأس الهيدروجينى الأقل من 4,5 والأعلى من 8. وأوضحت النتائج أن ثبات النشاط الإنزيمى لمتشابه الإنزيمFP1 عند الأس الهيدروجينى المترواح ما بين 5 و 7,5 و لمتشابه الإنزيم FP2 عند الأس الهيدروجينى المترواح من 4,5إلى 7,5. بينما قدر ثبات نشاط لمتشابه الإنزيم FP3 فقد كانت لديه ثباتية عند الأس الهيدروجينى المترواح ما بين 4,5 و 5,5.
6- و تم دراسة تأثير المذيبات العضوية المختلفة على متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا FP1) وFP2 وFP3). وقد وجد أن نشاط FP1 و FP2و FP3يقل تدريجيا بزيادة تركيز المذيبات العضوية التى كانت محل الدراسة ( إيثانول وأسيتون وميثانول وداى ميثيل سالفوأوكسيد ).
7- تم دراسة تأثير الكاتيونات الفلزية المختلفة وبعض المركبات على نشاط متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا) FP1 وFP2 وFP3). وقد أوضحت النتائج أن فلزالكالسيوم يزود نشاط متشابهى إنزيم البيروكسيديز FP1 وFP2 بينما يقلل نشاط .FP3 بالإضافة إلى ذلك، وجد أن نشاط متشابه إنزيم FP1 يثبط كليا بالتركيز العالى من فلز النحاس الثنائى (10مل مولار). وعلى النقيض وجد أن نشاط متشابهات إنزيمى البيروكسيديز FP2و FP3 يزداد بالتركيز العالى من فلز النحاس الثنائى. وعلى الجانب الأخر، وجد أن نشاط متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا يقل بزيادة تركيزات فلزات النيكل والمنجنيز والزئبق والكوبلت. كما أظهرت النتائج عدم وجود تأثير على نشاط متشابهى إنزيم البيروكسيديز FP1 وFP2 بينما يقل نشاط FP3 بنسبة 75% فى وجود EDTA بتركيز1مل مولار. ويقل نشاط متشابهات إنزيم البيروكسيديز FP1 وFP2 و FP3 مع زيادة تركيز EDTA. وأيضا وجد أن نشاطFP1 وFP2 وFP3 كان يثبط بزيادة تركيزNaN3 عند كل التركيزات التى كانت محل الدراسة 1و5و10 مل مولار.
8- وتم دراسة نشاط الثلاثة متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا تجاه المواد الوسيطة المختلفة. وقد وجد أن نشاطها تجاه مادة o-phenylenediamine كان أعلى من المواد الأخرى وكان ترتيبها كالأتى: o-dianisidine ˂ o-phenylenediamine pyrogallol ˂ aminoantipyrine˂ guaiacol˂.، على التوالى. وتم دراسة تـأثير التركيزات المختلفة لمواد o-phenylenediamine و guaiacol و فوق أوكسيد الهيدروجين (H2O2) على نشاط متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا عن طريق منحنيات ((Lineweaver-Burk plots. ومن المنحنيات تم تحديد قيم ثابت ميكائيل لكل من FP1 وFP2 و FP3 تجاهo-phenylenediamine وكانت كالتالى 3,87 و 3,64 و 3,33 مل مولار، على التوالى. وتم تحديد قيم ثابت ميكائيل لكل من FP1 وFP2 و FP3 تجاه guaiacol وكانت كالتالى 5,68 و6,89و15,94 مل مولار ، على التوالى. وتم تحديد قيم ثابت ميكائيل لكل من FP1 وFP2 و FP3 تجاه فوق أوكسيد الهيدروجين ((H2O2 وكانت كالتالى 34, 0و 25, 0و21, 0 مل مولار، على التوالى.
9- وفى دراستنا الحالية قد أوضحت النتائج أنه تم تحديد قدرة الثلاثة متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا FP1 وFP2 و FP3 على إزالة لون أنواع مختلفة من الصبغات الضارة التى لها تأثير سلبى على البيئة. وهذه الصبغات هى: الميثيل الأخَضر والميثيل الأزرق وانديجو كارمن والفيوشين والميثيل البنفسجى و الكلوروفينول الأحمروالكنغو الأحمروالميثيلين الأزرق والبروموفينول الأزرق والميوريكسيد وأخضر سريع والكرسيل البنفسجى ب والأريثروثين والفينول الأحمر والأسترا الأزرق والنافثول الأزرق والتيتان الأصفر والأليزاران الأصفر والأورامين والنفثالين الأسود 12 ب.
10- و قد أوضحت النتائج أن متشابهات إنزيم البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا وإنزيم البيروكسيديز التجارى من الفجل اليابانى لهم القدرة على إزالة لون بعض الصبغات التى كانت محل الدراسة وقد وجد أن الثلاثة متشابهات لها القدرة على إزالة ألوان بعض الصبغات أفضل من إنزيم البيروكسيديز التجارى من الفجل اليابانى ومن هذة الصبغات ) الكنغو الأحمروالميثيلين الأزرق وأخضر سريع والأريثروثين والفينول الأحمر( وقد وجد أن مدى إزالة اللون مع الصبغات المختلفة كان متنوعا كنتيجة لإختلاف التركيب الكيميائى لكل صبغة.
11- و تم دراسة تأثير متشابهات إنزيمى البيروكسيديز من العصارة اللبنية لنبات الفيكس كاريكا FP1و FP3على معدل إزالة لون صبغات الميثيل الأزرق و الكلوروفينول الأحمر والنافثول الأزرق. وقد وجد أن معدل إزالة اللون كانت تزداد بزيادة تركيز هذه الصبغات حتى تركيزات 5 ميكرو مول، 40 ميكرو مول، ˂300 ميكرو مول، على التوالى.