الفهرس يوجد فقط 14 صفحة متاحة للعرض العام
 |  | from | 150 |  |  |
| | | from | 150 | | |
المستخلص
تتميز تقنية طرق المناعة الإشعاعيه بحساسيتها واختصاصاتها العالية لتقدير مجموعة كبيرة من المواد ذات الأهمية الحيوية و الطبية بسوائل الجسم المختلفة التي لا يمكن أن تضاهيها طرق تحاليل أخرى لتقدير التركيزات متناهية الصغر لتلك المواد. و قد انتشرت تلك التطبيقات لسهولة إجراء التحاليل و تميزها بسعرها الأقل تكلفة بالنسبة للطرق الأخرى. ترجع أهمية تحضير المكونات الأساسية للعبوات التشخيصية لهرمون البروجيستيرون(P4) إلى العديد من الأسباب منها عدم افصاح المراكز المتخصصة لتحضير تلك العبوات عن أى تفاصيل كاملة واعتبارها كأسرار اختراع ووجود اكثر من تقنية لتحضير تلك العبوات و أيضا لكثرة استخدام هذه العبوات فى مصر فى تشخيص اضطرابات المبيض مما يمكن من الوصول إلى العلاج الصحيح و المتابعة كما تمكننا أيضا من التحديد الدقيق لفترة التبويض لذا كان من الضرورى محاولة تحضير و إنتاج مكونات تلك العبوات التشخيصية لتقدير تلك الهرمونات محليا” لسد احتياج مصر كدولة نامية من هذه العبوات و لتقليل تكاليف إنتاجها. و قد استهدفت هذه الدراسة: تحضير الممنع للبروجيستيرون المرتبط بمصل البروتين البقرى (P4:BSA) وذلك لاستخدامه فى إنتاج الأجسام المضادة لهرمون البروجيستيرون. تحضير المكونات الأساسية اللازمة لتقنية التحليل المناعى الاشعاعى لهرمون البروجيستيرون و التى تتكون من الأجسام المضادة عديدة النسلية و القافى المشع لهرمون البروجيستيرون و كذلك تحضير المحاليل القياسية او العيارية للهرمون. و قد تم الوصول إلى تخضير نظام التحليل المناعى الإشعاعى فى الطور السائل. دراسة صلاحية تلك التقنيات باستخدام الوسائل المتعارف عليها دوليا” و عمليا”لإثبات مدى صلاحيتها. تم إنتاج الأجسام المضادة عديدة النسلية لهرمون البروجيستيرون (P4) بتطعيم مجموعه من ثلاثة أرانب نيوزيلندية بيضاء و تم الحقن بالممنع بروجيستيرون هيميسكسينات المرتبط بمصل البروتين البقرى (P4: BSA) و قد تم الحقن الأولى باستخدام محفز فروندز الكامل متبوعا” بأربع حقنات تنشيطية متتالية باستخدام محفز فروندز غير الكامل بفاصل شهر عن كل حقن, و قد استخدمت سرنجات هاملتون الثنائية ، وللحصول على معلق ثابت من الماء فى الزيت بنسبة 1 : 2 و تم حقن كل أرنب بجرعة مقدارها 1.8 ملى من المعلق تحتوى على تركيز قدره 2 مليجرام من مولد الجسم المضاد بروجيستيرون هيميسكسينات (P4-antigen) و تم الحقن عن طريق العضلات و تحت الجلد. و قد تم اخذ عينات من دم الأرانب المطعم بعد أسبوعان من الجرعة الأولية و استمرت هذه العملية خلال فترة التطعيم. و فى نهاية فترة التطعيم تم تعيين تركيز و قابلية و اختصاصية الاستجابة المناعية لكل أرنب على حدة. و قد دلت نتائج التطعيم على ظهور استجابة مناعية عالية عند الأرنب رقم (1) عند تخفيف مبدئى 1 : 1.000 بعد أسبوعين من التطعيم الثالث و كذلك ظهور استجابة مناعية عالية عند الارنب رقم (2) بعد أسبوعين من التطعيم الثالث أيضا ولكن عند تخفيف مبدئى 1 2.000. كذلك تم تحضير القافى المشع لهرمون البروجيستيرون (125I-P4) بطريقة الكلورامين تى كعامل مؤكسد و تمت تنقيته باستخدام طرق الفصل الكروماتوجرافى و تم دراسة خواص المادة المشعة الناتجة وذلك من ناحية العائد الكيميائى والإشعاعي والنقاء الكيميائى الإشعاعي والنشاط النوعى والتفاعل المناعى، وكان العائد الإشعاعي 40%. وكذلك تم تحضير المحاليل القياسية أو العيارية بإذابة هرمون البروجيستيرون ذو اعلى درجات النقاء فى محلول الفوسفات المعالج للأس الهيدروجيني. و قد تم تحضير التركيزات العيارية للهرمون فى ذلك المحلول لاستخدامها فى عمل منحنيات قياس هذا الهرمون. و قد تمت دراسة تحديد الطريقة المثلى لتقنية الطور السائل للتحليل المناعى الاشعاعى باستخدام المواد التى تم تحضيرها و ذلك بتعين كمية الأجسام المضادة و النشاط الاشعاعى الكافى و حجم المحاليل القياسية و عينات المرضى وأيضا المواد المستخدمة لفصل الجزء المتحد من القافى المشع مع الأجسام المضادة من الأجزاء الحرة. وأيضا تمت دراسة صلاحية هذا النظام من حيث الحساسية و الدقة و الكفاءة و زيادة فى تحديد صلاحية هذه المواد المحضرة. و تم مقارنة النتائج التى تم الحصول عليها مع مثيلاتها المستوردة بالسوق المحلى. وقد وجد ان الطريقة المثلى لتقدير هرمون البروجيستيرون هى باضافة 100 ميكروليتر(التركيزات المعلومة او التركيزات غير المعلومة او العينات الضابطة) يتبعها اضافة 100 ميكروليتر من الاجسام المضادة بتخفيف اولى 1 : 2.000 ويتبعها اضافة 100 ميكروليتر من القافى المشع للهرمون وبعد حضانة لمدة ثلاث ساعات فى درجة حرارة 37 درجة مئوية يضاف 0.5 مللى من سائل الفصل الى كل انابيب التحليل ثم تترك الانابيب لمدة 30 دقيقة فى درجة حرارة الغرفه, ثم اخضاعها للطرد المركزى عند درجة حرارة 4 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة عند معدل لف 4000 لفة فى الدقيقة , ثم التخلص من المحلول العلوى و عد الراسب على جهاز العد الاشعاعى الجامى. و قد بينت الدراسة ان التحليل بنظام الطور السائل يتميز بالحساسية العالية حيث ان اقل كمية يمكن تعينها كانت 0.14 نانوجرام / مللى وقد قدرت معولية (Precision) هذه الطريقة من خلال اختبار ثابتية تكرارها على عينات دم مجمعه من المصل البشرى تمثل المستويات المختلفة من البروجيستيرون و قد اظهرت نتائج التباين داخل التحليل الواحد والتباين بين التحاليل المختلفة ثابتية كبيرة. كما اظهرت الدراسة ان هذه التقنية لتقدير البروجيستيرون تتفق مع النظم الدولية و ذات السمعة الدولية. و نظرا لبساطة هذه التقنية و خصوصيتها و صحتها و دقتها و سعرها الاقل تكلفة فان ذلك يرشحها لتكون مناسبة تماما للعمل الروتينى المعملى. و قد نجحت هذه الدراسة فى انتاج نظام من التحليل المناعى الاشعاعى فى الطور السائل و نتيجة لما يتمتع به من بساطة و سهولة فى الاداء و قلة التكاليف و الحساسية و الدقة و الخصوصية فان ذلك يرشحه للتشخيص الروتينى المعملى.