الفهرس 
List of contentsOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 134 |  |  |
| | | from | 134 | | |
Abstract
ركزت الدراسة على التحقيق في مرض الجلد العقدي، وهو مرض جلدي شديد العدوى في الماشية الناجمة عن فيروس مرض الجلد العقدي. يحتوي الفيروس على جينوم الحمض النووي من 150000 زوج من القواعد النيتروجينية تكون 156 جين من الجينات المفترضة. يصنف على أنه مرض يجب الإبلاغ عنه من قبل المنظمة العالمية لصحة الحيوان نظرا لتأثيره الكبير على صحة الحيوان والتجارة. ونظرا لانتشار التشخيص الخاطئ للعدوى والأمراض الأخرى، فقد أكد على الحاجة الملحة للكشف السريع والدقيق عن فيروس مرض الجلد العقدي وتوصيفه. بالإضافة إلى ذلك، سلطت العديد من الأبحاث الضوء على الطبيعة المستوطنة الناشئة لفيروس مرض الجلد العقدي في إفريقيا، مما أدى إلى خسائر اقتصادية كبيرة في المنطقة.
جمعت الدراسة ما مجموعه خمسة وعشرين عينة من العقيدات الجلدية، وعينة دم واحدة، وعينة مسحة أنف واحدة من الماشية تظهر عليها علامات سريرية لمرض الجلد العقدي، مثل الحمى ووجود العقيدات والوذمة. تم جمع العينات من ثماني محافظات في مصر، بما في ذلك البحيرة والمنوفية وكفر الشيخ والغربية والوادي الجديد والدقهلية والشرقية والقليوبية والإسماعيلية وقنا والمنية والفيوم. بالإضافة إلى ذلك، تم الحصول على عينة واحدة من كشط الجلد من حالة يشتبه في إصابتها بفيروس جدري الأغنام في محافظة المنيا. غطت فترة أخذ العينات الحالات المبلغ عنها بين يوليو 2019 وسبتمبر 2020 للأوراق المنشورة الأولى والثانية وأوائل عام 2023 للورقة الثالثة المنشورة.
لتأكيد وجود فيروس مرض الجلد العقدي، تم إجراء تحليل تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل ذو الوقت الحقيقي على جميع العينات التي تم جمعها. أشارت النتائج إلى أن جميع عينات الماشية كانت إيجابية لفيروس مرض الجلد العقدي، باستثناء العينة التي تم جمعها من الأغنام، والتي كانت إيجابية لفيروس جدري الأغنام. وقد تم اختيار إنزيم البلمرة المتسلسل ذو الوقت الحقيقي لكونه سريع وسهل التطبيق، وذو طبيعة كمية، وحساسيته في الكشف عن فيروس مرض الجلد العقدي. كانت عينات العقيدات الجلدية أقل القيم المحوسبة للدورات، مما يجعلها العينات المفضلة لتفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل ذو الوقت الحقيقي. يشير وجود فيروس مرض الجلد العقدي في عينات مسحة الأنف إلى قدرة الفيروس على التأثير على الأعضاء الداخلية والجهاز التنفسي. قد تكون القيمة المحوسبة للدورات هي الأعلى لعينة الدم بسبب جمعها بعد المرحلة الفيروسية من المرض في الدم.
بعد ذلك، تم عزل خمس عينات من العقيدات الجلدية من الورقتين الأولى والثانية المنشورة عن طريق ثلاثة تمريرات متصلة على الغشاء المشيمي لأجنة البيض المخصب الخالي من مسببات الأمراض. وقد ذلك إلى ظهور الأثر الباثولوجي المميز لفيروس مرض الجلد العقدي الذي يتميز بظهور العديد من البؤر البيضاء التنكرزية الصغيرة المتناثرة، جنبا إلى جنب مع الاحتقان والتعكر في الغشاء. تم عزل عينة واحدة من العقيدات الجلدية من الورقة الثالثة المنشورة وتم تمريرها ثلاث مرات على خلايا المادين ديربى المزروعة من كلى البقر، مما يؤكد وجود تأثيرات اعتلال خلوي محددة مرتبطة بفيروس مرض الجلد العقدي. تم تأكيد تواجد الفيروس في المعزولات عن طريق استخدام تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل التقليدي.
شملت الدراسة أيضا التسلسل الجيني وتحليل النشوء والتطور من معزولات فيروس مرض الجلد العقدي لمقارنتها مع سلالات أخرى من لفيروس مرض الجلد العقدي، بما في ذلك سلالات الحقل واللقاح، فضلا عن غيرها من فيروسات جدري الأغنام والماعز من قاعدة بيانات بنك الجينات. تم عمل تسلسل جيني جزئي لأربع عينات معزولة اعتمادا على جين GPCR، وتم عمل تسلسل جيني جزئي لمعزولة واحدة اعتمادا على جين P32 وORF103، عمل تسلسل جيني جزئي لمعزولتين اعتمادا على جين ORF 103جنبا إلى جنب مع عينة فيروس جدري الأغنام.
وقد نجح التحليل القائم على التسلسل الجيني لجين ال GPCRفي تمييز فيروس مرض الجلد العقدي في عن فيروسات جدري الأغنام والماعز ودعم استخدامه كعلامة مناسبة لتحديد الأصل الحيواني للفيروس. وقد يعزى هذا التشابه بين تسلسل التتابع الجيني لجين ال GPCR من السلالات في هذه الدراسة وغيرها من سلالات فيروس مرض الجلد العقدي إلى درجة الحفظ العالي التي يتمتع بها الجينوم الخاص بالفيروس مرض الجلد العقدي. كما كشفت المقارنة مع السلالة الهندية الخاصة بعام 2019 عن تواجد حذف لعدد 12 من النيكلوتيدات.
أظهر التسلسل الجيني الجزئي لـ P32 وORF 95 تشابها كبيرا مع سلالات فيروس مرض الجلد العقدي الأخرى في قاعدة بيانات بنك الجينات. بالنسبة إلى ORF 103، كشفت المقارنة بين سلالة فيروس مرض الجلد العقدي وفيروس جدري الأغنام عن تماثل في هوية وراثية بنسبة 97.17 ٪ مع وجود اختلاف في 13 من النيكلوتيدات.
وقد أتاح استخدام التسلسل الجيني المتعدد الجينات القائم على جينات P32، وORF 95، وORF 103، توصيفا شاملا للسلالة الميدانية وساعد في التفريق بين السلالات الميدانية لفيروس مرض الجلد العقدي والسلالات المستخدمة في التلقيح وغيرها من فيروسات جدري الأغنام والماعز. أكدت نتائج الدراسة انتماء السلالات إلى مجموعة فيروس مرض الجلد العقدي واقترحت وجود سلف مشترك بين جميع الأنواع الثلاثة من الفيروسات.
بالإضافة إلى ذلك، حققت الدراسة في فعالية الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك للسيطرة على وتثبيط فيروس مرض الجلد العقدي في خلايا المادين ديربى المزروعة من كلى البقر. تم تصنيع الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك باستخدام الصمغ العربي كعامل استقرار وتغطية وهيدروكسيد الصوديوم كعامل ترسيب. يوفر نهج التوليف الأخضر مزايا من حيث الحد من المخاطر البيئية وتجنب المكونات الخطرة. أظهرت الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك أحجام مختلفة وكانت تحمل شحنة سلبية، مما يجعلها مناسبة للتطبيقات المضادة للفيروسات. كشفت فحوصات السمية الخلوية على الخلايا المزروعة من النسيج الفموي البشري وكذلك خلايا المادين ديربى المزروعة من كلى البقر الطبيعة الآمنة للجسيمات النانوية لأكسيد الزنك الأخضر. انخفض معدل البقاء على قيد الحياة للخلايا المزروعة من النسيج الفموي البشري مع زيادة تركيزات الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك، مما يدل على طبيعتها غير سامة. ومع ذلك، أظهرت الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك السمية الخلوية في خلايا المادين ديربى المزروعة من كلى البقر في تركيز معين بعد 72 ساعة من الحضانة.
تم تقييم الإمكانات المضادة للفيروسات من الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك ضد فيروس مرض الجلد العقدي، وأظهرت الجسيمات النانوية تأثير مثبط على الفيروس. وقد أظهر الفحص بواسطة المجهر الإلكتروني رؤى قيمة في فعالية الجسيمات النانوية لأكسيد الزنك ضد فيروس مرض الجلد العقدي، وكشف عن قدرتها على الارتباط بالغلاف الخارجي للفيروس وتسبب الضرر الهيكلي.