الفهرس 
List of ContentsOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 140 |  |  |
| | | from | 140 | | |
Abstract
يعد سرطان الكبد أحد أكثر المشاكل الصحية تحديًا في مصر، ووفقًا لمنظمة الصحة العالمية، فإن سرطان الكبد (HCC) هو سابع أكثر أنواع السرطان شيوعًا في جميع أنحاء العالم من حيث معدلات الإصابة والوفيات لكلا الجنسين وجميع الأعمار. تحتل مصر المرتبة الثانية في معدل الإصابة بسرطان الكبد (32.5 حالة لكل 100 ألف من السكان) ومعدل الوفيات (31.1 لكل 100 ألف) لكل من الرجال والنساء.
سرطان الخلايا الكبدية مقاوم للعلاج الكيميائي النظامي القياسي، ولهذا السبب لا ينصح بالعلاج الكيميائي القياسي. قد يرجع ذلك جزئيًا إلى الامتصاص العالي للدواء في الجهاز الوريدي البابي، والذي لا يستهدف الورم وقد يسبب أضرارًا جهازية. ويستخدم مصطلح ”الطب الطبيعي” أيضًا للإشارة إلى الاستخدامات الطبية والعلاجية لأجزاء النبات، مثل البذور والتوت، والجذور والأوراق، واللحاء أو الزهور. يشار إلى الطب الطبيعي أيضًا باسم الطب النباتي حيث تنتج معظم النباتات مركبات أساسية من خلال عملية التمثيل الغذائي الأولي، وهي عملية صنع الأحماض الأمينية والسكر والأحماض الدهنية والبوليمرات.وقد ثبت أن البروانثوسيانيدين له تأثيرات مضادة للأورام على عدد من أنواع السرطان البشرية، بما في ذلك سرطان القولون والمستقيم، وسرطان الرأس والرقبة الحرشفية، وسرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة، وسرطان الكبد، وسرطان البنكرياس.
يتم تقديم العلاج المساعد كنوع من انواع العلاج المضاف إلى العلاج الأولي أو الرئيسي أو الأولي من أجل زيادة فعالية هذا العلاج.
تم اكتشاف ارتباط أتورفاستاتين مؤخرًا بانخفاض خطر الوفاة بالسرطان وتكرار حدوثه. يعمل أتورفاستاتين بكفاءة على إبطاء نمو الورم في سرطان الثدي والبروستاتا والبنكرياس والكبد، وفقًا لأبحاث سابقة على الحيوانات.
العلاج الكيميائي المركب هو الإدارة المتزامنة لعدد من الأدوية لعلاج السرطان. يؤدي الجمع بين العلاجات إلى تحسين فرصة القضاء على الخلايا السرطانية تمامًا نظرًا لأن أدوية العلاج الكيميائي لها تأثير على الخلايا السرطانية في مراحل مختلفة من دورة الخلية.
اهداف الدراسة:
تهدف الدراسه الي معرفة التأثي العلاجي المحتمل للبروانثوسيانيدين على خلايا سرطان الكبد (HepG2) بالمقارنة مع التأثير العلاجي الكيميائي للدواء التقليدي، تاكسول والدواء المساعد أتورفاستاتين. كما تهدف أيضًا دراسة الآليات الخلوية والجزيئية الأساسية للتأثيرات المتوقعة لعلاج الخلايا السرطانية الكبدية بواسطة البروانثوسيانيدين منفصلا أو بالاشتراك مع التاكسول و الاتورفاستاتين.
ولتحقيق هدفنا، أجريت الدراسة على خلايا HepG2 في المختبر على النحو التالي:
- تحديد IC50 لخلايا HepG2 بواسطة اختبار MTT:
تمت معالجة أربع مجموعات من خلايا الكبد السرطانية في المختبر لمدة 24 أو 48 ساعة على النحو التالي:
G1: خلايا HepG2 غير المعالج .
G2: علاج خلايا HepG2 بالتاكسول بتركيزات مختلفة (0، 0.006، 0.06، 0.6، 6، 60 ميكروجرام/مل).
G3: علاج خلايا HepG2 بالأتورفاستاتين بتركيزات مختلفة (0، 5، 10، 20، 40، 60 ميكروغرام / مل).
G4: علاج خلايا HepG2 بالبروانثوسينادين بتركيزات مختلفة (0، 20، 40، 60، 80، 100 ميكروجرام/مل).
ومن ثم تم حساب النسب المئوية للخلايا الباقية على النحو التالي:
% البقاء على قيد الحياة = (الخلايا المعالجة/خلايا التحكم) × 100
تم اختيار نظام العلاج لمدة 48 ساعة بسبب مدة العلاج الأكثر فعالية بعد المقارنة بين بيانات فترات العلاج 24 و 48 ساعة، وكانت مجموعات العلاج على النحو التالي:
G1: خلايا HepG2 غير المعالج
G2: تم تطبيق علاج التاكسول لخلايا HepG2 منفردًا بجرعة IC50.
G3: تم تطبيق علاج أتورفاستاتين لخلايا HepG2 منفردًا بجرعة IC50.
G4: تم تطبيق علاج البروانثوسيانيدين لخلايا HepG2 منفردًا بجرعة IC50.
G5: تم تطبيق علاج تاكسول (جرعة IC50) + علاج بروانثوسينادين (جرعة IC50) بنسبة 1:1.
G6: تم تطبيق علاج تاكسول (جرعة IC50) + علاج أتورفاستاتين (جرعة IC50) بنسبة 1:1.
G7: تم تطبيق علاج أتورفاستاتين (جرعة IC50) + علاج بروانثوسينادين (جرعة IC50) بنسبة 1:1.
G8: تم تطبيق علاج تاكسول (جرعة IC50) + أتورفاستاتين (جرعة IC50) + علاج بروانثوسينادين (جرعة IC50) بنسبة 1:1:1.
النتائج:
لدراسة التآزر بين البروانثوسيانيدين والتاكسول والاتورفاستاتين على تثبيط نمو خلايا سرطان الكبد.
- تحديد علامات الإجهاد التأكسدي ونشاط الإنزيمات المضادة للأكسدة:
عند علاج خلايا الكبد السرطانية باستخدام التاكسول والأتورفاستاتين والبروانثوسيانيدين ومزيجها، بجرعات تتوافق مع تركيزات IC50 الخاصة بها. أظهرت يركيزات المالينوالدهيد في جميع المجموعات المعالجة زيادة معنوية في تركيزاته مقارنة بالمجموعه غير المعالجة. انخفض نشاط SOD في جميع المجموعات المعالجة باستثناء المجموعه الخامسه (المعاملة بتركيبة البروانثوسيانيدين و التاكسول) بشكل ملحوظ مقارنة بالخلايا غير المعالجة. وبنفس الطريقة انخفض نشاط الكاتلاز في جميع المجموعات المعالجة بشكل ملحوظ مقارنة بالخلايا غير المعالجة. بينما زاد نشاط GR بشكل ملحوظ في جميع المجموعات المعالجة باستثناء المجموعه الرابعه (المعاملة بالبروانثوسيانيدين) مقارنة بالخلايا غير المعالجة.
- نسبة تجزئة الحمض النووي:
أظهرت البيانات التي تم الحصول عليها أن هناك DNA مجزأ قليلاً في كل من المجموعتين المعالجتين بـ التاكسول أو البروانثوسيانيدين بينما تسبب العلاج بـ الاتورفاستاتين في زيادة كبيرة في تجزئة الحمض النووي.
- التعبير عن جينات BCl2 وBAX وP53 وIFG1 وEGFR
أظهرت نتائج PCR الكمية لخلايا HepG2 عن انخفاض كبير في التنظيم (P ≥ 0.05) في التعبير عن جينات BCL2، بينما كان هناك زيادة كبيره في التعبير عن جينات BAX وP53 وIGF1 وEGFR في المجموعات المعالجة مقارنةً بالمجموعة الضابطة. مرة أخرى، كما انه أظهرت مجموعة العلاج المشترك تأثيرات ذات حجم أعلى مقارنة بمجموعات العلاج الأخرى.
- تحليل دورة الخلية عن طريق قياس التدفق الخلوي
ومن ناحية اخري وجد توقف كبير في مرحلة G0/G1 لخلايا HepG2، والذي زاد بشكل أكبر في جميع المجموعات المعالجة مقارنة بالمجموعة الضابطة. شوهدت أعلى نسبة من الخلايا التي تم القبض عليها في G0/G1 في المجموعة المعالجة بالمركب. بالتزامن مع ذلك، انخفضت نسبة الخلايا في المرحلة S بشكل ملحوظ في المجموعة الضابطة مقارنة بالمجموعات المعالجة بالمركب. أيضًا، كان هناك عدد أقل بكثير من الخلايا في مرحلة G2/M في المجموعة المعالجة بالتركيبة مقارنة بالمجموعات المعالجة الأخرى. كان متوسط عدد خلايا HepG2 المبرمجة، ممثلة بالمرحلة الفرعية G0/G1، أعلى بكثير في المجموعات المعالجة مقارنة بالمجموعة الضابطة. كان لدى المجموعة التي تمت معالجتها بالتركيبة أعلى الخلايا المبرمج. كانت النسبة المئوية للخلايا في جميع المراحل، باستثناء G2/M، أعلى في خلايا HepG2 المعالجة مقارنة بالخلايا غير المعالجة.
الاستنتاج والخلاصة:
تم في هذه الدراسة تحليل فاعلية التاكسول والأتورفاستاتين والبروانثسيانيديون ومركباتهم لتثبيط خلايا HepG2 في المختبر والتي ترتبط بموت الخلايا المبرمج، والذي يشار إليه عن طريق زيادة التعبير عن P53 وجينات BAX وIGF1 وEGFR وتقليل جين BCl-2 (الجين المضاد لموت الخلايا المبرمج). كما أثبتت أن العلاج باستخدام أتورفاستاتين أو باكليتاكسيل أو بروانثوسينادين يمكن أن يحافظ بشكل فعال على التعبير عن مضادات الأكسدة المهمة في خلايا HepG2. عززت دراستنا أيضًا الفائدة المحتملة من الجمع بين هذه الأدوية في علاج السرطان وتوفر رؤية آلية جديدة لدورها المضاد لزيادة نمو الخلايا عن طريق تجزئة الحمض النووي وقياس التدفق الخلوي.
التوصيات:
نوصي بإجراء المزيد من الدراسات لتأكيد العلاج المركب للأدوية معًا على جانب واحد مع أدوية العلاج الكيميائي التقليدية على الجانب الآخر على خلايا سرطانية مختلفة. كماينبغي تطبيق هذا العلاج الكيميائي الجديد باستخدام العديد من الاختبارات الحيوية داخل جسم الكائن الحي. بالاضافة الي دراسة آلية التأثير المثبط للادوية المستخدمة على مستويات البروتين والآليات الخلوية الأخرى.