الفهرس 
Motor and Non-motor symptoms of Parkinson’s DiseaseOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 201 |  |  |
| | | from | 201 | | |
Abstract
ملخص الدراسة
يُعد مرض الشلل الرعاش أو مرض الباركنسون ، الذي سمي على اسم الدكتور جيمس باركنسون ، أحد
أمراض الضمور العصبي الرئيسية التي تؤثر بشكل أساسي على الأنظمة الحركية ولكن يمكن أن تكون
مصحوبة أيضًا بمشاكل ادراكية وسلوكية. هناك ضمو ر عصبي واسع الانتشار في أدمغة مرضى الشلل
الرعاش ، يؤثر على ما يصل إلى 70 ٪ من الخلايا العصبية الدوبامينية في المادة السوداء بحلول وقت
الوفاة. تشمل السمات المميزة للمرض أجسام ليوي في المادة السوداء وجذع الدماغ والضمور الانتقائي
للخلايا العصبية الدوبامينية في المادة السوداء. على الرغم من أن أسباب هذا الضمورغير واضحة بشكل
عام ، إلا أن الآليات المقترحة ، وفقًا للأبحاث الحديثة ، يمكن أن تكون التهابًا عصبيًا ، وتنشيط الخلايا
الدبقية الصغيرة ، وربما الإجهاد التأكسدي الذي يعمل على القضاء على الخلايا العصبية الدوبامينية. لاحظ
الباحثون أيضًا إثراء بروتين tau و α-synuclein في اجسام ليوي العصبية .
بروتين تاو - عضو في عائلة البروتين المرتبط بالأنابيب الدقيقة - هو بروتين رئيسي يشارك في العديد من
أمراض الضمور العصبي. تتميزأمراض تاو بتجمع تاو المرضي في التشابك الليفي العصبي . لم يتم اعتبار
الشلل الرعاش في البداية على أنه من الامراض المتوقع تكوين و تجمع بروتين تاو بها بشكل مرضي.
ومع ذلك ، فقد أظهرت الدراسات الحديثة أدلة متزايدة على وجود خلال في تجمع بروتي ن تاو في الشلل
الرعاش. تعتمد قدرة تاو على الحفاظ على وظيفتها البيولوجية الطبيعية على حالة الفسفرة. في الشلل
الرعاش ، هناك حالة من الفسفرة المفرطة للتاو تؤدي إلى تراكمها داخل الخلايا. آليات هذا الفسفرة
المفرطة لم يتم التحقيق فيها ودراستها بدقة حتى الآن.
لا يزال تطوير نماذج حيوانية ذات صلة إكلينيكيًا بمرض الشلل الرعاش يمثل تحديًا ، طالما أن العلاجات
الفعالة لتعديل المرض ليست في متناول اليد بعد. الروتينون ، مبيد آفات مشتق من جذور نباتات فصيلة
البقولية ، تم استخدامه في العديد من التجارب العلمية لمحاكاة مرض الشلل الرعاش . ثبت أن إعطاء
جامعة عين شمس
كلية الصيدلة
قسم الادوية و السموم
الروتينون المزمن ينتج ضمورا عصبيًا انتقائيًا للدوبامين ، بالإضافة إلى السمات السلوكية والكيميا ئية
العصبية والمرضية العصبية للشلل الرعاش في القوارض بما في ذلك تكوين بروتين تاو وشوائب نيجيرية
موجبة وعجز حركي. ومن ثم ، فإن الشلل الرعاش الناجم عن الروتينون ، ربما يكون نموذجًا يلبي العديد
من توقعات الدراسات البحثية حول الشلل الرعاش .
كارفيديلول هو مانع غير انتقائي لمستقبلات بيتا الأدرينالية مع العديد من المفعولا ت المتعددة مثل مضاد
الأكسدة ، وتأثير منع مستقبلات α1- الأدرينالية ، وتوسع الأوعية ، وتثبيط موت الخلايا المبرمج ، ومضاد
للالتهابات ، ومثبط غير تنافسي لمستقبلات NMDA وحاصر قنوات الكالسيوم. لقد ثبت أن كارفيديلول
يمارس تأثيرًا وقائيًا في العديد من نماذج السكتة البؤرية العابرة وخلل الحركة المتأخر ، وتأثير وقائي
للقلب في العديد من نماذج نقص تروية القلب والأوعية الدموية وضخه والتأثير الكلوي .
لذلك ، هدفت هذه الدراسة إلى تقييم كارفيديلول كمانع فسفرة بروتين تاو و مضاد لمرض الشلل الرعاش.
تهدف هذه الدراسة أيضًا إلى التحقيق في المسارات الميكانيكية المحتملة للكارفيديلول كعامل وقائي
للأعصاب.
تم تقييم المؤشرات التالية:
في دراسة ال In silico :
• أعطى الكارفيديلول نتائج واعدة في دراسة PASS مما شجعنا على الانتقال إلى خطوة Invivo.
جامعة عين شمس
كلية الصيدلة
قسم الادوية و السموم
التصميم التجريبي:
دراسة in vivo على الجرذان
دراسة أولية:
تم تقسيم الحيوانات إلى 6 مجموعات ) 8 حيوانات لكل مجموعة (
المجموعة 1 : ]التحكم السلبي[ لم تتلقى الجرذان أي علاج ولم يتم احداث الشلل الرعاش.
المجموعة 2: ]روتينون فقط[ تم احداث الشلل الرعاش عن طريق الحقن تحت الجلد بالروتينون ) 2 مجم /
كجم( لمدة 28 يومًا .
المجموعة 3: ]كارفيديلول فقط[ تلقت الفئران كارفيديلول فقط ) 10 مجم / كجم( عن طريق الفم .
المجموعة 4 [ : 2.5 مجم / كجم كارفيديلول عن طريق الفم لمدة 32 يومًا + روتينون 2 مجم / كجم تحت
الجلد لمدة 28 يومًا[ .
المجموعة 5 .[ : 5 مجم / كجم كارفيديلول عن طريق الفم لمدة 32 يوماً + روتينون 2 مجم / كجم تحت
الجلد لمدة 28 يوماً[ .
المجموعة 6 [ : 10 مجم / كجم كارفيديلو ل عن طريق الفم لمدة 32 يوماً + روتينون 2 مجم / كجم تحت
الجلد لمدة 28 يوماً[ .
تم إجراء الاختبارات وتقييم المؤشرات التالية:
• العجز الحركي والسلوك الاستكشافي في اختبار المجال المفتوح )تردد التمشي ، وقت عدم الحركة ،
وتيرة السلوك والاستمالة( .
• اختبار Catalepsy في اختبا ر Bar and Grid .
• الذاكرة المكانية وقصيرة المدى في اختبار Y-maze .
جامعة عين شمس
كلية الصيدلة
قسم الادوية و السموم
• هستوباثولوجي لمناطق المخ المختلفة .
•تحلي ل الضمور العصبي عن طريق تلطيخ التولويدين الأزرق للخلايا العصبية السليمة.
• التحليل الكيميائي الهيستولوجي المناعي لمركب التيروزين هيدروكسيلاز .
الدراسة الآلية:
تم تقسيم الحيوانات إلى 5 مجموعات ) 8 حيوانات لكل مجموعة (
المجموعة 1 : ]التحكم السلبي[ لم تتلقى الجرذان أي علاج ولن يتم احداث الشلل الرعاش.
المجموعة 2: ]روتينون فقط[ تم تحفيز PD عن طريق الحقن تحت الجلد بالروتينون ) 2 مجم / كجم( لمدة
28 يومًا .
المجموعة 3: ]كارفيديلول فقط[ تلقت الفئران كارفيديلول فقط ) 10 مجم / كجم( عن طريق الفم .
المجموعة 4 [ : 5 مجم / كجم كارفيديلول عن طريق الفم لمدة 32 يوماً + روتينون 2 مجم / كجم تحت الجلد
لمدة 28 يوماً[ .
المجموعة 5 [ : 10 مجم / كجم كارفيديلو ل عن طريق الفم لمدة 32 يوماً + روتينون 2 مجم / كجم تحت
الجلد لمدة 28 يوماً[ .
الاختبارات البيوكيميائية:
• تحليل (P-Tau) ، Glycogen synthase Kinase 3 β (GSK 3β) و Phosphoinositide 3 kinase (PI3K) ، عن طريق western blot ، في النسيج المخطط.
• التعبير عن مستقبلات N-methyl-D-aspartate (NMDAR) بواسطة q-PCR .
• تحليل ELISA لعلامة تنشيط الخلايا الدبقية ، البروتين الحمضي الليفي الدبقي GFAP ، عامل نخر
الورم (TNF α) و α synuclein .
جامعة عين شمس
كلية الصيدلة
قسم الادوية و السموم
النتائج:
قلل الكارفيديلول ) 5 و 10 مجم / كجم( من زمن انتقال النسب وتحسَّن النبض الحافز عند مقارنته
بمجموعة الروتينون فقط. على الرغم من أن كارفيديلول 2.5 مجم / كجم لم يظهر فرقًا كبيرًا عن مجموعة
الروتينون فقط .
• روتينون ضعف الإدراك والذاكرة المكانية كما تم تقييمه بواسطة التغيير التلقائي ٪ في اختبار Y-maze
، بالمقارنة مع مجموعة control . تمكن الكارفيديلول 5 و 10 مجم / كجم من تعزيز الذاكرة المكانية عند
مقارنته بمجموعة الروتينون فقط. على الرغم من أن كارفيديلول 2.5 مجم / كجم لم يظهر فرقًا كبيرًا عن
مجموعة الروتينون فقط .
( • 5 و 10 ملغم / كغم( حافظ كارفيديلول على الهتوباثولوجي الطبيعي للأنسجة السوداء والخطي والداخلي
وحمايته من الضمور العصبي الناجم عن الروتينون حيث تم تقليل أجسام ليوي في المجموعات المعالجة
بالكارفيديلول .
• تم تقييم مدى الضمور العصبي في المستقيم و المنطقة السوداء في تلطيخ التولويدين الأزرق. أظهرت
الفئران المعالجة بالروتينون فقدًا في البنية النسيجية الطبيعية كما يتضح من وجود الخلايا العصبية مفرطة
اللون مع السيتوبلازم المظلم والنواة المتضخمة تمامًا مع فقدان الإطار الدائري للخلايا العصبية الطبيعية.
ومع ذلك ، فإن الكارفيديلول ) 5 و 10 مجم / كجم( أعاد البناء النسيجي الطبيعي كما يتضح من السيتوبلازم
الدائري للبناء العصبي ونواة محددة جيدًا ، على الرغم من أن كارفيديلول 2.5 مجم / كجم لم يظهر فرقًا
كبيرًا عن مجموعة الروتينون فقط .
• قلل الروتينون من تفاعل TH المناعي. التأثير الذي انعكس تدريجيًا عن طريق زيادة جرعات
الكارفيديلول .
جامعة عين شمس
كلية الصيدلة
قسم الادوية و السموم
بناءً على النتائج المذكورة أعلاه ، تم استبعاد 2.5 مجم / كجم من الكارفيديلول من الدراسة الآلية وتم تقييم
5 و 10 مجم / كجم .
• أوقف الكارفيديلول زيادة P-tau و GSK 3β المستحثة بالروتينون. خفف كارفيديلول الانخفاض في
PI3K الناجم عن الروتينون .
• خفف كارفيديلول تنشيط NMDARs الناجم عن الروتينون .
• قلل كارفيديلول GFAP و TNF α في الفئران المعالجة بالروتينون ، لما له من تأثيرات مضادة
للالتهابات .
• خفض كارفيديلول α-synuclein الذي يحفزه الروتينون ، بالمقارنة مع مجموعة الروتينون فقط .
في الختام ، تقدم الدراسة الحالية دليلًا على أن حقن الروتينون تحت الجلد لمدة 28 يومًا ) 2 ملجم / كجم(
يحاكي أعراض مرض الشلل الرعاش ويطور الضمور العصبي مع تكوين أجسام ليوي ، α-synuclein ،
وزيادة بروتين تاو مفرط الفسفرة. يمكن أن يكون كارفيديلول عاملًا واعدًا للوقاية العصبية في الشلل
الرعاش كما هو موضح في هذه الدراسة ، حيث يمكن للجرعات ) 5 و 10 مجم / كجم( عكس العجز
الحركي الناجم عن الروتينون ، وضعف الذاكرة المكانية ، والضمور العصبي ، والاتهاب الأعصاب ،
وتفعيل الدبقية الدبقية. مع الأخذ في الاعتبار إجراءاته المضادة للأكسدة والمضادة للالتهابات ، يعتبر
الكارفيديلول مرشحًا ممتازًا لمزيد من الاختبارات في الدراسات السريرية في الشلل الرعاش