الفهرس 
AbstractOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 110 |  |  |
| | | from | 110 | | |
Abstract
كان الهدف من الدراسة الحالية هو تقييم آثار مكملات البروبيوتيك على التشريح المرضي، والتعبير الجيني الدهني ، واختبارات وظائف الكبد ومضادات الأكسدة في الأرانب التي تتغذى على أنظمة غذائية عالية الكوليسترول تحفز الكبد الدهني ، وكذلك تأثير البروبيوتيك على أداء النمو وصفات الذبيحة. أجريت الدراسة في قسم تنمية الثروة الحيوانية بكلية الطب البيطري جامعة بنها.
تم استخدام ما مجموعه 60 من ذكور الأرانب البيضاء النيوزيلندية في التجربة. تم تقسيمهم إلى أربع مجموعات بشكل عشوائي. كانت كل مجموعة مكونة من خمسة عشر (15) أرنبًا، تم تقسيمهم بعد ذلك إلى ثلاث مكررات ، كل منها يحتوي على خمسة أرانب. كانت المجموعات التجريبية على النحو التالي:
1) المجموعة Ⅰ: تم إطعامها حمية أساسية.
2) المجموعة Ⅱ: أعطي نظام غذائي عالي الكوليسترول (كولسترول 2٪).
3) المجموعة Ⅲ: أعطيت حمية معيارية مع بروبيوتيك لاكتوباسيلوس أسيدوفيلوس (Lacto Biotech) في الماء (1 جم / لتر).
4) المجموعة Ⅳ: أعطيت غذاء عالي الكوليسترول (نسبة الكوليسترول: 2٪) وكذلك بروبيوتيك لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس (Lacto Biotech) داخل الماء (1 جم / لتر).
في نهاية 8 أسابيع، تم ذبح 9 أرانب تم اختيارها عشوائيًا من كل مجموعة (3 من كل مكرر) ، وتم الحصول على عينات من أكبادهم ومصلهم ، وتم تحديد نسيج الكبد ، والتعبير الجيني المحلل للدهون ، والمعايير الكيميائية الحيوية في الدم ومستويات مضادات الأكسدة.
تم استخدام التغيرات في وزن الجسم الحي كمؤشر على النمو بعد أن تم وزن الأرانب بشكل فردي في بداية التجربة ثم كل أسبوع حتى الأسبوع الثامن. تم حسابه على أنه الفرق بين وزنين متتاليين، تم تحديد زيادة وزن الجسم للأرانب (مقاسة بالجرام) ، وتم تحديد سمات الذبيحة.
بعد الصيام طوال الليل وقبل ذبح الارانب، تم جمع عينات الدم من الحزام الإنسي للضفيرة الوريدية المدارية الخلفية للعين من الأرانب باستخدام أنبوب جمع الدم الذي يفصل المصل وأنبوب الهلام المفرغ ومنشط الجلطة. لفصل المصل، تم سحب العينات في أنابيب اختبار جافة ونظيفة وتركت تتخثر لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. فصل الأمصال الصافية بالطرد المركزي عند 3500 دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة، ثم تم جمعها في أنابيب إيبندورف باستخدام الماصات الدقيقة الآلية. للفحص البيوكيميائي للدم، تم حفظ المصل في ثلاجة عميقة عند -20 درجة مئوية للتحليل الكيميائي الحيوي للدم.
تم وضع عينات الكبد في الفورمالين المحايد المخزن بنسبة 10٪ قبل تقديمها للفحص المجهري للفحص التشريحي المرضي.
لتحديد تعبير الجينات الدهنية، تم جمع عينات الكبد وتخزينها عند -80 درجة مئوية. لاستخراج إجمالي الحمض النووي الريبوزى، تم تجانس 50 مجم من الأنسجة في 750 ميكرولتر من محلول Trizol في أنبوب تجميع معقم وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة (Qiagen ، GmbH ، ألمانيا). باستخدام مقياس الطيف الضوئي Nanodrop، تم قياس الامتصاصية لتحديد تركيز ونقاء الحمض النووي الريبوزى. باستخدام 2X Reverse Transcriptase master Mix، تم نسخ 2 ميكروغرام من إجمالي RNA إلى cDNA. تم استخدام Applied Biosystems 7500 Fast-time PCR، المصنع في الولايات المتحدة، لتقدير كمية الرنا المرسال. في خليط تفاعل 20 ميكرولتر، تم استخدام SYBER Green master Mix لتنفيذ PCR الكمي.
مضادات أكسدة الكبد تحددت في أنسجة الكبد، تم تجميع عينات الكبد وحفظها عند درجة حرارة -20 درجة مئوية.
يمكن تلخيص نتائج هذه الدراسة على النحو التالي:
1- تأثير مكملات البروبيوتيك على أداء النمو وصفات الذبيحة:
تعمل إضافة البروبيوتيك على تحسين أداء النمو دون أن يكون لها تأثير كبير على خصائص الذبيحة.
2- تأثير العليقة عالية الكوليسترول والبروبيوتيك على أمراض أنسجة الكبد:
العليقة عالية الكوليسترول ينتج عنها فجوات حشوية للدهون الكبدية، كما يظهر في شرائح الكبد. يتم تقليل التغيرات الدهنية في الخلايا الكبدية عن طريق مكملات البروبيوتيك مع العليقة عالية الكوليسترول.
3- تأثير العليقة عالية الكوليسترول والبروبيوتيك على بعض التعبير الجيني الدهني:
النظام الغذائي عالي الكوليسترول الذي ينتج عنه الكبد الدهني يزيد بشكل كبير من التعبير الجيني ليباز البروتين الدهني، والليباز الكبدي ، وبروتين نقل إستر الكوليسترول مع تقليل التعبير الجيني لمستقبل البروتين الدهني منخفض الكثافة بشكل كبير. تعمل مكملات البروبيوتيك مع العليقة عالية الكوليسترول على تعديل التعبير الجيني للجينات المختلفة واستعادة قيمها تقريبًا إلى المجموعة الضابطة. لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعة الضابطة والمجموعة تلقت عليقة عالية الكوليسترول مكمل مع بروبيوتيك لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس، فإن مكملات البروبيوتيك مع العليقة عالية الكوليسترول تقلل من ليباز البروتين الدهني والليباز الكبدي وبروتين نقل إستر الكوليسترول وتزيد من التعبير الجيني لمستقبل البروتين الدهني منخفض الكثافة.
4- تأثير العليقة عالية الكوليسترول والبروبيوتيك على اختبارات وظائف الكبد:
تزداد مستويات إنزيمات الكبد في مصل الدم [Alanine transaminase (ALT ، Aspartate Transaminase (AST) ، Alkaline phosphatase (ALP) ، Lactate dehydrogenase (LDH)] ، الكوليسترول ، Triglycerides (TG) ، Lipoprotein Lipase (LDL) ، الجلوكوز ، يتم زيادة نسبة البيليروبين الكلي بشكل كبير عن طريق الكبد الدهني الذي يسببه ارتفاع الكوليسترول في الدم ، بينما ينخفض البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) والبروتين الكلي والألبومين بشكل ملحوظ في المجموعة المتغذية على عليقة عالية الكوليسترول. تنخفض جميع مستويات مصل إنزيمات الكبد (ALT و AST و ALP و LDH) والكوليسترول و TG و LDL والجلوكوز والبيليروبين الكلي عن طريق مكملات البروبيوتيك مع العليقة عالية الكوليسترول، بينما يتم زيادة HDL والبروتين الكلي والألبومين عند مقارنتها بالمجموعة الحاصلة على عليقة عالية الكوليسترول.
5- تأثير العليقة عالية الكوليسترول والبروبيوتيك على مضادات الأكسدة في الكبد:
تكميل النظام الغذائي الذي يحتوي على نسبة عالية من الكوليسترول يقلل بشكل كبير من مضادات الأكسدة في الكبد [الجلوتاثيون بيروكسيديز، كاتالاز، الجلوتاثيون هيدروكسيلاز وديسموتاز الفائق]. مكملات البروبيوتيك مع العليقة عالية الكوليسترول تعزز مضادات الأكسدة للكبد (GPx ، CAT ، GSH ، SOD).
التوصيات:
من الأفضل أن تشارك البروبيوتيك في حصص الإعاشة أو المكملات المائية للحيوان، كما يمكن أن تكون مفيدة إذا تم توفيرها في النظام الغذائي للأشخاص المعرضين لخطر الإصابة بالكبد الدهني غير الكحولي لإبطاء تقدم المرض.