Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
phytochemical and biological study on certain plants belonging to family rosaceae/
الناشر
esraa ashraf ahmed elhawary
المؤلف
Eihawary,Esraa ashraf ahmed
هيئة الاعداد
باحث / إسراء أشرف أحمد الهوارى
مشرف / عبد الناصر بدوى سنجاب
مشرف / رولا ميلاد لبيب
مشرف / / ندى محمد مصطفى
تاريخ النشر
2022
عدد الصفحات
266P;:
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
العلوم الصيدلية
تاريخ الإجازة
20/2/2022
مكان الإجازة
جامعة عين شمس - كلية الصيدلة - عقاقير
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 338

from 338

Abstract

الملخص العربى
دراسه فيتوكيميائية و بيولوجية على بعض النباتات المنتمية للعائله الوردية
تعتبر العائلة الوردية واحدة من أكبر العائلات التى تتضمنها المملكة النباتية إذ تحتوى على تسعون جنسا و ألف و خمسمائة نوعا تنتشر حول أنحاء العالم فيما عدا القارة القطبية الجنوبية و تشتهر العائلة الوردية بالعديد من الفواكه مثل: التفاح˓ المشمش˓ الخوخ˓ البرقوق و التوت بالإضافة إلى الأجناس الخاصة بالزينة و من ضمنها جنس روزا.
يمثل جنس روزا ثالث أشهر الأجناس المنتميه للعائلة الوردية و يتميز بشكل رئيسى بوجود ورود الزينة التى تمثل العمود الأساسى للعديد من الحدائق حول العالم و على الرغم من أنه تمت دراسة العديد من الأنواع المنتمية لجنس روزا فيتوكيميائيا و بيولوجيا إلا ان نوع البانكزيا و البولينتا لم يتم دراستهم بشكل وافى و لذلك تم اختيار ثلاث أنواع كالتالى: روزا بانكزيا نوع بانكزيا˓ روزا بولينتا ’ برتقالى نارى’ و روزا بولينتا ’أبيض نارى’ لدراستهم بصوره أعمق من الناحية الفيتوكيميائية و البيولوجية.
تنقسم هذه الدراسة إلى ثلاثة أجزاء رئيسية:
الجزء الأول : زراعة و تصنيف الخصائص الجينية لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
الفصل الأول : زراعة لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
تمت زراعة ثلاث انواع مختارة من روزا فى محطة أبحاث النباتات الطبية التابعة لكلية الصيدلة جامعة عين شمس و ذلك للمرة الأولى فى تاريخ المزرعة فى فترة الربيع من عام 2016 و تهدف هذة الزراعة لتوفير مصدر متجدد من تلك النباتات كما تساعد فى مقارنة المحتوى الكيميائى بينهم و بين نفس الأنواع التى تم تجميعها عند بدأ الدراسة و خلال ربيع 2021 تم عمل مقارنة للمحتوى الكيميائى بين أنواع روزا الثلاث المجمعة فى بداية الدراسة مع المزروعة فى محطة أبحاث النباتات الطبية و ذلك من خلال GC/MS و LC/MS (سيتم مناقشة ذلك فى الجزء الثانى˓ الفصل الثالث و الفصل الرابع)
الفصل الثانى : دراسة جينية لفصائل مختارة من روزا المنتمية للعائلة الوردية
يتضمن إجراء دراسة وراثية مقارنة بتحليل الحامض النووى(DNA) المستخلص من أوراق و سيقان هذه النباتات و مقارنته بثلاث عشر primer باستخدام تحليل RAPD-PCR حيث أظهرت نتيجة تنميط ال DNA أن الثلاثة عشر برايمر نجحوا فى تضخيم جزء مميز من المادة الوراثية لأجزاء ال DNA الخاصة بالنباتات و قد حملت primes المستخدمة فى تقنية ال RAPD-PCR الأكواد (OP-P-01, OP-P-02, OP-P-03, OP-P-04, OP-P-06, OP-P-07, OP-P-08, OP-P-09, OP-P-10, OP-P-11, OP-P-12, OP-P-13, OP-P-14)
كما أظهرت النتائج أن برايمرOP-P-8, OP-P-10, OP-P-11, OP-P-12, OP-P-14 تملك اكبر قيمة من معامل التشابة بين كل من RPO وRPW و تفرقهم عن RBW.
الجزء الثانى : دراسة فيتوكيميائية لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
الفصل الأول : الفرز الفيتوكيميائى للأجزاء الهوائية و الورود لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية و قياس محتواهم الكلى من الفينولات و الفلافونيدات
1. الفرز الفيتوكيميائى للأجزاء الهوائية لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
يشتمل على التحليل المبدئى لمستخلص 70 % ميثانول للأجزاء الهوائيه و الورود للثلاث أنواع من روزا. أوضحت النتائج الأولية وجود كربوهيرات˓ جليكوسيدات˓ فلافونيدات˓ زيوت طيارة˓ عفصيات˓ صابونين و غياب كل من الانثراكينون˓ القلوانيات و الجليكوسيدات القلبية.
2. قياس المحتوى الكلى من الفينولات و الفلافونيدات لمستخلص 70 % الميثانول لللأجزاء الهوائية و الورود لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
تم قياس المحتوى الكلى للفينولات عن طريق منحنى المعايرة (R=0.999) ووجد أن الأجزاء الهوائية لRPW تحتوى على أعلى محتوى من الفينولات (484.29 ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة) يليها الأجزاء الهوائية لRBW ( 328.48 ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة) ثم الأجزاء الهوائية لRPO ( 228.51 ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة) أما عن الورود فإنRPW كانت الأعلى فى محتوى الفينولات (174.36 ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة) و تسبق بذلك كل منRPO (172.71 ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة) وRBW (160.17ميكروجرام حمض الجاليك/جرام من العينة).
فيما يخص الأجزاء الهوائية فإن الأجزاء الهوائية لRPW أحتوت على أعلى نسبة من الفلافونيدات (60.32 ميكروجرام كيرسيتين/جرام من العينة) تليها الأجزاء الهوائية لRBW (51.24 ميكروجرام كيرسيتين/جرام من العينة) ثم الأجزاء الهوائية لRPO (29.17 ميكروجرام كيرسيتين/جرام من العينة) أما عن الورود فإنRBW كانت الأعلى فى محتوى الفلافونيدات (27.62 ميكروجرام كيرسيتن/جرام من العينة) و تسبق بذلك كل منRPW (26.25 ميكروجرام كيرستين/جرام من العينة) و RPO (22.26 ميكروجرام كيرستين/جرام من العينة).
الفصل الثانى : الإستخلاص والفصل للعناصر الفيتوكيميائية من مستخلص 70% الميثانول لروزا بانكزيا RBW
دراسة فيتوكيميائية عميقة لمستخلص 70% الميثانول لأجزاء الهوائيه من روزا بانكزيا نوع بانكزيا بالإضافة إلى تنقية المستخلص و مشتقاتة كروماتوجرافيا للحصول على مركبات نقية حيث تم تحضير مستخلص 70% الميثانول للأجزاء الهوائية ل RBW و تمت تجزئتة بواسطة ثنائى كلور الميثان˓ خلات الإيثيل و البيوتانول العادى على التوالى بينما تعرضت كل من هذة الأجزاء لمزيج من الفصل الكروماتوجرافى و اتبع ذلك تجزئة كل جزء على حدة باستخدام كروماتوجرافيا العمود و ال TLC و نتج عن ذلك فصل المركبات منهم.
و قد أسفر الإستخلاص الفيتوكيميائى عن فصل ثلاث مركبات من ثلاثى التربينات و فلافونويد واحد و تم تحديد صفة كل مركب عن طريق 1H-NMR, APT, 2D-NMR بالإضافة إلى كروماتوجرافيا السائل المتصلة بمطياف الكتلة عالى الكفاءة.UPLC/MS
مركب 1: 28-O-(E)-فيرولويل-حمض البيتيولينك.
مركب 2: حمض اليورسولك.
مركب 3: حمض التورمينتك.
مركب 4: كيرستين-3-O-β-D-جلوكويورونيد.
الفصل الثالث : تعريف محتوى مركبات الايض الثانوية باستخدام كروماتوجرافيا السائل المتصلة بمطياف الكتلة عالى الكفاءة ((UPLC/MSn لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
دراسة مقارنة لمستخلص 70% الميثانول للأجزاء الهوائيه و الورود لكل من الثلاث أنواع من روزا باستخدام تقنيه UPLC/MS و ذلك للنباتات المجمعه عند بدأ الدراسة و كذلك لمستخلص 70% الميثانول للأجزاء الهوائيه و الورود لأنواع روزا نفسها بعد زراعتها بمحطة أبحاث النباتات الطبية بكلية الصيدلة جامعة عين شمس و ذلك ساعد على تفسير تأثير تغيير مكان الزراعة على نوع و تركيز كل مركب من المستخلصات المذكورة أعلاة بالإضافة إلى مقارنة كل مجموعة مركبات بعد تعريفها بواسطه تحليل البيانات المتعدد المتغيرات باستخدام تحليل المكون الرئيسى , (PCA)تحليل المجموعات الهرمية (HCA) و خريطة الحرارة العنقودية clustered heat map.
1. تحليل كروماتوجرافيا السائل المتصلة بمطياف الكتلة عالى الكفاءة لكل من RBW, RPO , RPW لمستخلص 70 % ميثانول للورود و الأجزاء الهوائية (العينات المجمعة CS)
و فى هذا الصدد فقد تم التعرف على العديد من فئات مركبات الأيض بصورة كيفية و كمية و بلغ عدد المركبات المتعرف عليها 65 مركب و مثلت الفلافونويدات و مشتقاتها أغلب فئات المركبات المتعرف عليها فى كل المستخلصات.
بالنسبة للأجزاء الهوائية فإن RBW-A كانت غنية بحمض الكلوروجينك (20.96%)˓ أبيجنين-6-C-بينتوسيد (15.75%)˓ كيرستين-7-O-هيكسوسيد-3-O-(مالونيل)-هيكسوسيد (10.97%). أما بالنسبة ل RPO-Aفإن المركبات الرئيسية تمثلت فى حمض الكوينك (70.11%)˓ حمض الكلوروجينك (18.24%) و بيبتوكارفين B (10.95%) بينما كانت RPW-A غنية بحمض الكلوروجينك (16.89%)˓ حمض الكوينك (15.28%)˓ كيرستين-3-O-جلوكويرونيد (13.85%) و كيرستين (13.55%).
أما أبرز المركبات فى ورود RBW فقد تمثلت فى حمض الكوينك (17.13%)˓ حمض الكلوروجينك (13.80%)˓ كامفيرول-3-O-جلوكويرونيد (11.95%) و كيرستين-7-O-هيكسوسيد-3-O-(مالونيل)-هيكسوسيد (11.79%). أما ورود RPO فأحتوت على حمض الكوينك (26.03%)˓ كامفيرول-3-O-رامنوسيد (24.69%)˓ حمض الجاليك (15.02%) و كيرستين-3-O-رامنوسيد (13.44%) و بالنسبة لورود RPW فقد كانت غنية بكامفيرول-3-O-رامنوسيد (25.29%)˓ حمض الكوينك (17.88%) و كيرستين-3-O-رامنوسيد (13.31%).
2. تحليل كروماتوجرافيا السائل المتصلة بمطياف الكتلة عالى الكفاءة للورود و الأجزاء الهوائية لمستخلص 70 % ميثانول لكل من RBW, RPO, RPW (العينات المزروعة PS)
تم التعرف على عدد 91 مركب تنتمى لفئات مختلفة و ذلك بصورة كيفية و كمية من الثلاث عينات من روزا المزروعين بمحطة أبحاث النباتات الطبية بكلية الصيدلة جامعة عين شمس و من ضمن هذة المركبات فإن 43 مركب قد تم التعرف عليهم أيضا فى العينات المجمعة (CS) بينما ظهرت ال 42 مركب الباقية فقط فى العينات المزروعة بمحطة أبحاث النباتات الطبية.
و تمثلت أهم المركبات المتعارف عليها من RBW-A فى كيرستين-3-O-هيكسويرونيد (5.58 %)˓ دلفنيدين-هيكسوسيل-بينتوسيل-مالونات (4.46) و كافويل هيكسوز دى أوكسى هيكسوسيد (3.69 %) أما عن RPO-A فإن HHDP هيكسوسيد (18.11 %)˓ تريسين (E) (5.51%) و كيرستين-3-O-رامنوسيد (5.51%) كانوا الأبرز بينما ظهرت مركبات كامفيرول-3-O-مالونيل-هيكسوسيد (14.56 %)˓ كيرستين-3-O-رامنوسيد (10.37 %) و أرجوكرستين (6.92 %) بصورة كبيرة فى عينة RPW-A. أما عن الورود فإن RBW-F كانت غنية بسكاريد (23.99 %)˓ كومارويل-فيروليل-سبيرمدين (17.50 %)˓ مشتق من كافويل كوينات شكيمات (10.94 %) و كيرستين-3-O-رامنوسيد (9.08 %) أما بالنسبة ل RPO-F فإن كومارويل-فيروليل-سبيرمدين (29.43 %)˓ HHDPهيكسوسيد (18.14 %)˓ مشتق من كافويل كوينات شكيمات (17.06 %) و كيرستين-3-O-رامنوسيد (12.15 %) كانت النسبة الأغلب بالإنتقال إلى RPW-F فإن أبرز المركبات تمثلت فى HHDP هيكسوسيد (14.47 %)˓ كورمارويل-فيروليل-سبيرمدين (14.01 %)˓ كامفيرول-3-O-رامنوسيد (10.06 %)˓ ثلاثى جالويل الهيكسوز (7.29 %) و ثنائى جالويل الهيكسوز (7.00 %).
3. تحليل كروماتوجرافيا السائل المتصلة بمطياف الكتلة عالى الكفاءة للعينات القطبية من RBW
تم التعرف على 54 مركب تنتمى لعدبد من الفئات الكيميائية بصورة كيفية و كمية و ذلك من العينات القطبية (مستخلص خلات الإيثيل و مستخلص البيوتانول العادى) الناتجين عن التحليل الكروماتوجرافى لمستخلص 70 % الميثانول لروزا بانكزيا نوع بانكزيا باستخدام الدايا أيون. كما وجد ان 27 مركب من ال 54 مركب توجد بشكل مشترك مع مستخلص الأجزاء الهوائية ل RBW و باقى ال 27 مركب مميزة فقط لهذة العينات القطبية.
بينما أمتاز مستخلص خلات الإيثيل بوجود كاتيشين (16.94 %)˓ كيرستين-7-O-هيكسوسيد-3-O-(مالونيل)-هيكسوسيد (8.23 %)˓ كيرستين (7.69 %)˓ حمض الجاليك (5.67 %)˓ 5-P-كومرويل-4-O-كافويل-4-ميثيل-حمض البنتانويك -5-هيدروكسى-3-كوينات (5.25 %)˓ مشتق ثنائى جالويل هيكسوز (3.98 %) و جالويل HHDP هيكسوز (3.37 %).
تمثلت المركبات الرئيسية فى مستخلص البيوتانول فى جالويل HHDP هيكسيد (21.81 %)˓ مشتق كيرستين-7-O-هيكسوسيد-3-O-(مالونيل)-هيكسوسيد (16.26 %)˓ HHDP هيكسوسيد (13.42 %)˓ كيرسيتين (8.33 %)˓ كيرستين-7-O-هيكسوسيد-3-O-(مالونيل)-هيكسوسيد (7.58 %)˓ كيرستين-3-O-هيكسويرونيد (5.22 %)˓ كيرسيتين-O-بنتوسيد-O-بنتوسيد (4.27 %)˓ مشتق أيزورامنتين (3.64 %)˓ 7-O-ميثيل-أيزورامنتين-3-O-هيكسوسيد (3.40 %)˓ كامفيرول-3-O-بنتوسيد (3.22 %) و ألويسين (3.03 %).
الفصل الرابع : دراسه الزيوت الطيارة و مستخلصات الهيكسان العادى لفصائل مختارة من روزا المنتمية للعائلة الوردية
1. تحليل المحتوى الكيميائى و تحليل البيانات المتعدد المتغيرات للزيوت الطيارة الخاصة لفصائل مختارة من روزا (الأجزاء الهوائية و الورود) العينات المجمعة (CS)
دراسة مجمعة عميقة لتعريف محتوى مركبات الايض الثانوية للزيوت الطيارة لللأجزاء الهوائية و الورود للثلاث أنواع من روزا حيث أظهرت عينات الزيوت الطيارة المجمعة بواسطة التقطير المائى لكل من RBW, RPO, RPW أن محتوى الزيت كان بانتاجية ( 0.020˓ 0.040˓ 0.031 % v/w) للأجزاء الهوائية تباعا و(0.022˓ 0.025 و 0.021 % v/w) للورود تباعا و مال لون الزيوت الطيارة لثلاثتهم إلى اللون الأصفر الباهت و من حيث الكثافة فإنهم أخف من الماء و قد تم التعرف على 253 مركب ووصلت نسبة التعريف لما يناهز 94-85% بينما مثلت هيدروكربونات التربينويد أغلبية المركبات و أبرزهم و تتبعها أكسيدات التربينويد.
و قد مثلت مركبات الهيدروكاربون أحادى التربينويد نسبة قليلة فى جميع العينات فيماعدا RPW-F بينما كانت نسبة السيسكوتربينويدات متوسطة ووصلت إلى 12% فيما عدا RBW-A كما ان الفينيل بروبانويد و المركبات الأروماتية بالإضافة إلى الكاروتينويدات ظهروا بنسبة ضئيلة بين كل العينات و تمثلت المواد المشتقة من الأحماض الدهنية بنسبة كبيرة فى الدوديكان˓ الأنديكان و اللورينانون و ذلك للأجزاء الهوائية أما عينات الورود فقد تمثلت فى هيبتينيل أسيتيت˓ هيبتاديكان˓ هيكساديكانول˓ نوناديكان˓ هينيكوزان˓ ترايكوزان بالإضافة إلى دوديكان و أنديكان.
كما تمثلت مركبات الهيدروكاربون أحادى التربينويد فى البيتافيلاندرين (22.78%)˓ الألفا فيلاندرين (6.61%) و ثلاثى الأرتميزيا (6.21%) و ذلك فى RPW-F و قد ظهر كحول اليوموجى فى كل العينات بنسبة كبيرة فيما عدا RPW-F بينما ظهر الايزو بيسابولول فقط فى عينة RBW-F أما المركبات الأساسية فى الزيت الطيار الخاص ب RBW-A فكانت دوديكان (14.54 %)˓ أنديكان (14.40 %) و كحول اليوموجى (8.41 %) بينما تمثلت أغلب المركبات ل RBW-F فى هيبتاديكان (16.70 %)˓ هيكساديكانول (12.06 %)˓ نوناديكان (11.55 %) و هينيكوزين (8.00 %) كما أن المركبات الرئيسية المتعارف عليها للزيت الطيار الخاص ب RPO-A كانت دوديكان (22.13 %)˓ أنديكان (19.36 %) و كحول اليوموجى (10.53 %) بينما ل RPO-F فإن أهم المركبات كانت أنديكان (7.98 %)˓ دودبكان (7.96 %)˓ نوناديكان (5.78 %)˓ هيكساديكانول (5.44 %) و هينيكوزين (5.18 %) و قد أظهرت عينة RPW-A تركيب كيميائى منفرد حيث كان الزيت الطيار الخاص بالأجزاء الهوائية غنى بأنديكان (9.21 %)˓ دوديكان (8.39 %) و كحول اليوموجى (6.28 %) بينما الزيت الطيار للورود كان غنيا ببيتا فيلاندرين (22.78 %)˓ الفا فيلاندرين (6.61 %) و ثلاثى الأرتميزيا (6.21 %).
كما نتج عن تحليل الPCA خمس مجموعات بمعامل تغير 52 % ل PC1 و 39 % ل PC2 و قد تواجدت كل من عينة RBW-A و RPW-A فى مجموعة واحدة فى الربع الأعلى لليسار بينما تواجدت عينة الأجزاء الهوائية لRPO بشكل منفرد فى نفس الربع كما أن عينات الورود ظهرت بشكل منفصل عن بعضها مكونة ثلاث مجموعات مختلفة حيث أن عينتا RBW-F و RPO-F ظهرتا فى الربع السفلى لليمين بينما عينة RPW-F فى الربع العلوى لليمين مع الوضع فى الاعتبار ان مجموعة RPO-F تواجدت بشكل او اخر بالقرب من مجموعتا RBW-A و RPW-A و يعزى ذلك إلى وجود نسبة عالية من انديكان كمكون مشترك بين RPO-F و العينتان الاخرتان مما ادى الى وضعها فى مجموعة منفردة و لكن بالقرب من هاتان العينتان و يمكن شرح شكل هذة المجموعات السابق ذكرها لاختلاف التركيب الكيمائى فيما بينها حيث أن تواجد كل من دوديكان و انديكان بوفرة كان له تأثير على وجود كل من RBW-A و RPW-A فى مجموعة واحدة بالإضافة لذلك فإن وجود هيبتاديكان فى RBW-F و بيتا فيلاندرين فى RPW-F بشكل متفرد أدى إلى تموضعهم بشكل منفرد فى مجموعات منفصلة بعيدة عن باقى عينات الزيوت المتطايرة.
2. تحليل المحتوى الكيميائى و تحليل البيانات المتعدد المتغيرات للزيوت الطيارة الخاصة لفصائل مختارة من روزا (الأجزاء الهوائية و الورود) (محطة أبحاث النباتات الطبية˓ ASU) (PS)
تحليل محتوى الزيوت الطيارة لللأجزاء الهوائية و الورود لثلاث أنواع روزا و ذلك بعد زراعتهم فى محطة أبحاث النباتات الطبية بكلية الصيدلة جامعة عين شمس و الذى ساعد على إيجاد تأثير مكان و ظروف الزراعة على نوع و تركيز كل عنصر من العناصر الطيارة كذلك تم قياس تحليل البيانات المتعدد لكل من مكونات الزيوت الطيارة لعينات روزا المجمعة عند بدأ الدراسة و المزروعة كل على حدا بإستخدام تحليل المكون الرئيسى ˓(PCA)تحليل المجموعات الهرمية (HCA) و خريطة الحرارة العنقودية clustered heat map.
أظهرت عينات الزيوت الطيارة المجمعة بواسطة التقطير المائى لكل من RBW, RPO, RPW أن محتوى الزيت كان بإنتاجية (0.030˓ 0.031˓ 0.042 % v/w) للأجزاء الهوائية تباعا و (0.044˓ 0.041 و 0.042 % v/w) للورود تباعا و مال لون الزيوت الطيارة لثلاثتهم إلى اللون الأصفر و من حيث الكثافة فإنهم أخف من الماء و قد تم التعرف على 135 مركب ووصلت نسبة التعريف لما يناهز 98-100% بينما مثلت هيدروكربونات التربينويد أغلبية المركبات و أبرزهم و تتبعها أكسيدات التربينويد.
تشكل الزيت الطيار ل RBW-Aبشكل رئيسى من 1α-10α-ايبوكسى-امورف-4-ين (12.81 %)˓ بيجناين (7.19 %)˓ 2˓6˓10-ثلاثى ميثيل بنتاديكان (7.15 %)˓ كاريوفيللين (7.04 %)˓ يوديزما-4(14)-11-دايين (5.74 %) و نوتيكين (5.67 %) بينما تكون الزيت الطيار المفصول من RBW-F من 2-بنتاديكانون (17.57 %)˓ هنيكوسين (14.84 %)˓ هيكساديكانول (12.02 %)˓ (Z)-5-نوناديكين (10.67 %)˓ ايزولونجيفولان-7-α-ول (7.51 %) و هينيكوسين-2-ول (3.74 %).
كما ضمت المركبات المتعارف عليها من الزيت الطيار ل RPO-A كل من هيكساترايكونتان (23.09 %)˓ فيتول (19.96 %)˓ نوناكوزين (18.76 %)˓ تيتراتيتراكونتين (17.77 %)˓ ايكوزان (7.47 %) و هنيكوسين (4.24 %) أما أبرز المركبات بالنسبة لRPO-F كانت تيتراتيتراكونتين (31.16 %)˓ هنيكوسين (26.43 %)˓ أيكوسين (22.10 %)˓ نوناكوسين (6.03 %)˓ نوناديكين (4.78 %) و هيكساترياكونتين (3.37 %) و قد أظهرت RPW-A تركيب كيميائى متفرد حيث أحتوى الزيت الطيار لها على نسبة (92.86 %) من أكسيدات التربينويد مقارنة بالتربينويدات و كان هذا الزيت غنيا بتربينين-4-ول (92.86 %) و الفا تربينين (4.23 %) بينما أظهرت الورود لنفس الفصيله RPW-F تركيب مختلف حيث كانت غنية بهيدروكربونات التربينويد مثل هنيكوسين (45.47 %)˓ تيتراتيتراكونتين (29.67 %) و نوناكوسين (3.37 %).
كما نتج عن تحليل الPCA ثلاثة مجموعات بمعامل تغير 65 % ل PC1 و 16 % ل PC2 و قد تواجدت كل من عينتا RPW-F و RPO-F فى مجموعة واحدة فى الربع الأعلى لليسار بينما تواجدت عينات RPO-A, RBW-A, RBW-F فى مجموعة أخرى فى الربع السفلى لليسار أما RPW-A ففى الربع العلوى لليمين و يعزى ذلك لوجود كمية نوعا ما كبيرة من تربينين-4-ول و ذلك فقط فى عينة RPW-A بنسبة بلغت (92.86 %) مما أدى لوجودها فى مجموعة منفردة و يمكن شرح شكل هذة المجموعات السابق ذكرها لاختلاف التركيب الكيمائى فيما بينها حيث أن تواجد كل من هنيكوسين و تيتراتيتراكونتين بوفرة كان له تأثير على وجود كل من RPW-F و RPO-F فى مجموعة واحدة بالإضافة لذلك فإن وجود هنيكوسين و أيكوزانال كمكون مشترك بين RPO-A, RBW-A, RBW-F وضعهم معا فى مجموعة واحدة.
3. تحليل مستخلصات الهيكسان العادى للأجزاء الهوائية (A) و الورود ((F لفصائل مختارة من روزا المنتمية للعائلة الوردية
تم تقييم محتوى المركبات المتطايرة لمستخلصات الهيكسان العادى للأجزاء الهوائية و الورود للثلاث أنواع المجمعة فى بداية الدراسة (CS) لكل من RBW, RPO, RPW و قد تم التعرف على 47 مركب بصورة كيفية و كمية و ذلك بواسطة تحليلا GC/FID و GC/MS و قد تراوح لون هذة المستخلصات ما بين الأصفر الباهت و الأصفر الكنارى و وصلت نسبة تعريف المركبات إلى 99 % فى كل العينات تقريبا بنسبة عالية من الهيدروكاربونات الغير مؤكسجة حيث مثلت السيستربينات الفئة الرئيسية فى RPW-F يليها RPO-F تتبعها RBW-F بينما تواجدت التراتربينات بشكل أساسى فى الأجزاء الهوائية بهذا الترتيب RPO-A > RPW-A > RBW-A.
كما كان من الواضح أن هنترياكونتاداين (33.26 %)˓ الفا أميرين (16.56 %)˓ نوناكوسين (14.01 %)˓ 3˓ 7˓ 11-ثلاثى ميثيل-هيبتاكوسين (11.10 %) و حمض اللينوليك (10.78 %) مثلت أهم المركبات من RBW-A بينما كانت RBW-F غنية بنوناكوسين (18.52 %)˓ بنتاكوسين (18.00 %)˓ هيبتاكوسين (15.77 %)˓ هنيكوسين (5.97 %) و هيكساديكانول (5.76 %) و على صعيد أخر فقد أحتوت RPO-A بصفة رئيسية على هنترياكونتاداين (58.13 %)˓ ترياترياكونتاداين (28.86 %)˓ نوناكوسين (11.43 %) و هيبناكوسين (1.59 %). وجد أن هيبتاكوسين (37.20 %) كان المكون الرئيسى فى RPO-F يليه نوناكوسين (16.98 %)˓ بنتاكوسين (10.30 %)˓ هنترياكونتاداين (9.39 %) و ترانس فيرتوسيترال سى (5.64 %) أما بالنسبة لRPW فإن الهيدروكاربون هنترياكونتاداين (37.32 %) بالإضافة إلى لاورينان-2-ون (18.81 %)˓ ترياترياكونتاداين (18.73 %)˓ 3˓ 7˓ 11-ثلاثى ميثيل-هيبتاكوسين (13.02 %) وجدوا بشكل أساسى فى RPW-A بينما كانت RPW-F غنية بهيبتاكوسين (53.76 %)˓ نوناكوسين (21.02 %)˓ هنترياكونتاداين (12.70 %) و بنتاكوسين (5.77 %).
الجزء الثالث: دراسة بيولوجية للمستخلصات المختلفة لفصائل مختارة من روزاالمنتمية للعائلة الوردية
الفصل الأول : قياس النشاط المضاد للميكروبات للزيوت الطيارة لفصائل مختارة من روزا المنتمية للعائلة الوردية
تم قياس النشاط المضاد للميكروبات لعينات الزيوت الطيارة للثلاث أنواع من روزا (للأجزاء الهوائية و الورود) المجمعة فى بداية الدراسة (CS) و ذلك باستخدام أربعة أنواع من البكتيريا سواء الجرام إيجابى أو الجرام سلبى بالإضافة إلى أربع فصائل من الفطريات.
و قد أظهرت الزيوت الطيارة للأجزاء الهوائية و الورود نشاط متوسط ضد فطر الأسبرجلس مقارنة بالامفوتريسين B بينما باقى فصائل الفطريات كانت مقاومة لهذه الزيوت الطيارة كما أن الزيت الخاص ب RPO-F قد نتج عنه نشاط متوسط ضد بكتيريا الاستاف أورياس مقارنة بالبنسلين و من الجدير بالذكر أن باقى فصائل البكتيريا كانت مقاومة لكل عينات الزيوت الطيارة.
الفصل الثانى : قياس النشاط المضاد للحشرات لفصائل مختارة من روزا المنتمية للعائلة الوردية (الأجزاء الهوائية و الورود) لمستخلصات 70 % الميثانول و الهيكسان العادى ضد ناموس الكيوليكس بيبيانس
تلعب المبيدات الحشرية الكيميائية دور كبير فى مقاومة الناموس و ذلك كونها سريعة˓ فعالة و ذات تاثير واسع المجال و لكنها تحمل العديد من العيوب من خلال كونها سامة لكائنات حية أخرى غير مستهدفة مثل الأسماك و الكائنات الحية الأخرى مما يجعلها مصدر ضرر مباشر و غير مباشر للإنسان و البيئة.
تم عمل دراسة بيولوجية عميقة لمسح التأثير المضاد للحشرات لمستخلص 70 % الميثانول و مستخلص الهيكسان العادى للأجزاء الهوائية و الورود للعينات المجمعة عند بدأ الدراسة (CS) للثلاث أنواع ضد ناموس الكيوليكس بيبيانس و قد تمت هذه الدراسة على مراحل مختلفة من دورة حياة الكيولكس تتمثل فى اليرقات˓ الشرانق˓ و الحشرات البالغة و ذلك لدراسة التأثير المضاد لليرقات˓ الشرانق˓ الخصوبة˓ و الطارد للمستخلصات محل الدراسة.
عند قياس التأثير المضاد للناموس لمختلف المستخلصات تبين أن هذا التأثير تباين بسبب تغير جزء النبات المستخدم˓ المذيب المستخدم فى الإستخلاص و كذلك تركيز المستخلص المستخدم كما أن معدل الوفيات بين اليرقات و الشرانق إزداد بإضطراد مع زيادة تركيز المستخلص المستخدم و لوحظ أن مستخلصات الورود كانت أكثر قوة من نظيرتها للأجزاء الهوائية بالإضافة لذلك فإن مستخلصات الهيكسان العادى كان لها تأثير أقوى من مستخلصات الميثانول و طبقا لنسبة التأثير القاتل لنصف العدد (LC50):
بالنسبة لمستخلصات الأجزاء الهوائية فإنRPW كانت الأكثر قوة ثم RPO و تليهما RBW و ذلك لكل من مستخلصات 70 % الميثانول و الهيكسان العادى كل على حد.
أما عن تأثير مستخلصات 70 % الميثانول و الهيكسان العادى للثلاث أنواع من روزا على القدرة على التكاثر لإناث الكيولكس بيبيانس فمن بين المعاملات التى تم قياسها كان أهمهم معامل الخصوبة˓ فقس البيض و مؤشر العقم حيث أظهرت النتائج أن جميع المستخلصات التى تم قياسها قد أدت إلى تقليل الخصوبة و زيادة نسبة العقم لإناث البعوض و ذلك مقارنة بالمجموعة المحايدة.
كما تم قياس التأثير الطارد للبعوض لجرعات مختلفة من المستخلصات مقارنة بمبيد حشرى كيميائى DEET بجرعة 1.8 mg/cm2 و تبين أنه عند إستخدام جرعة 1.67 mg/cm2 من مستخلصات الأجزاء الهوائية و الورود كل على حد ل RBW فإن التأثير الطارد للبعوض وصل إلى 62.7 و 79.0% تباعا بينما نفس المستخلصات ل RPO أظهرت 79.2 و 92.5 % تباعا و ذلك عند نفس الجرعة السابق ذكرها و من ذلك فإن RPO لها تأثير أقوى من RBW و على جانب ﺁخر فإن مستخلصاتRPW قد أدت إلى 80.4 و 96.8 % تباعا كتأثير مضاد للبعوض و ذلك بإستخدام جرعة ((0.83 mg/cm2 ما يعادل نصف الجرعات المستخدمة لكل منRBW و RPO.