الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 227 |  |  |
| | | from | 227 | | |
Abstract
يعد سرطان الخلايا الكبدية HCC)) سادس أكثر أنواع السرطانات شيوعًا في العالم بينما في مصر يشتهر بأنه السرطان الرابع من حيث عدد الاصابات . سرطان الكبد هو رابع سبب رئيسي للوفيات المرتبطة بالسرطان في العالم وهو السبب الأكثر شيوعًا للوفيات والأمراض المرتبطة بالسرطان في مصر. تحدث غالبية حالات سرطان الكبد نتيجة عدوى بفيروس التهاب الكبد B و C و لا يوجد حاليًا علاج كيميائي منهجي مؤكد وناجح لـ HCC.
(DEN) هو مادة ثنائي ايثيل النيتروز أمين قوية تسبب تسممًا جينيًا معروفًا بتدمير الإنزيمات النووية المشاركة في إصلاح الحمض النووي وتكرار الحمض النووي وغالبًا ما تستخدم تجريبيًا للحث على تسرطن الكبد. كما وجد أيضا ، انها تسبب زيادة مستوى الإجهاد التأكسدي.
يعد الكركمين بأنه البوليفينول الذي له تأثير قوي كمضاد للسرطان ، وهو مستخلص من الكركم ، وهو مركب علاجي واعد له خصائص علاجية : كمضاد للالتهابات ، ومضاد للسرطان ، ومضاد للأكسدة ، ومضاد للميكروبات ، ومضاد للتليف ، وله القدرة على الوقاية والعلاج من العديد من الأمراض التي تصيب الإنسان دون أي سمية ملحوظة.
جزيئات الكركمين النانومترية المخلقه معمليا أثبتت قدرتها على التجاوز عن عيوب الكركم المعروفة من صعوبة الذوبان و الامتصاص داخل الجسم.
تم تصنيع جزيئات الكركمين النانومترية معمليا وقد تم تعريف هذا المنتج من خلال مجهر النافذ الإلكتروني (TEM) ، وتحليل مطيافية الأشعة فوق البنفسجية الممتصة ، وانتشار الضوء الديناميكي (DLS) ، وتحويل فورييه للتحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء (FTIR). واوضحت النتائج ان جزيئات الكركمين النانومترية المنتجة في حجم 15-62.70 نانومتر ، مع شكل كروي.
Asparagus racemosus ، الذي ينتمي إلى عائلة monocot liliid. . يستخدم النبات كمضاد للبكتيريا ، وله نشاط مضاد للجروح ، ويستخدم لعلاج مجموعة متنوعة من الأمراض مثل الإسهال ، والدوسنتاريا ، والروماتيزم ، والانهيار ، وكمنشط جنسي ، وقد أظهرت العديد من الدراسات أن مستخلصات جذور نبات الأسبرجس تعمل كمضادات الأكسدة. ومضاد للسرطان ضد: أورام القولون وأورام الثدي والكلى وسرطان الكبد وأورام الرئة.
الهدف من الدراسة:
تقييم فعالية جزيئات الكركمين النانومترية و جذور نبات الأسبرجس كعامل وقائي و علاجي لسرطان الكبد المحدث تجريبيا في ذكور الجرذان.
التصميم التجريبي:
أجريت هذه الدراسة على 80 من ذكور الجرذان البيضاء تم تقسيمهم إلي 8 مجموعات على النحو التالي:
المجموعه الأولى: المجموعة الضابطه السالبة: تم تجريع الجرذان فمويا (1 مل) من المحلول الملحي يوميا حتى نهاية التجربة.
المجموعه الثانية: المجموعه الضابطه الموجبة: مجموعة تتلقى DEN بجرعة ( 20 مجم/ كجم / من وزن الجسم ) فمويا يوميا لمدة 12 اسبوع حتى نهاية التجربة.
المجموعه الثالثة: مجموعة جزيئات الكركمين النانومترية: تم تجريع الجرذان فمويا جزيئات الكركمين النانومترية (20ملجم/كجم من وزن الجسم ) ثلاثة أيام اسبوعيا حتى نهاية التجربة.
المجموعه الرابعة: مجموعة الاسبرجس: تم تجريع الجرذان فمويا محلول معلق بودرة جذور الاسبرجس (200ملجم/كجم من وزن الجسم ) يوميا حتى نهاية التجربة.
المجموعه الخامسة: DEN+ جزيئات الكركمين النانومترية (علاجي): تم تجريع الجرذان بمادة DEN مثل المجموعة الثانية لمدة 12 اسبوع ثم تجريعها بجزيئات الكركمين الناومترية مثل المجموعة الثالثة لمدة ستة أسابيع.
المجموعه السادسة: DEN+ الاسبرجس (علاجي): تم تجريع الجرذان بمادة DEN مثل المجموعة الثانية لمدة 12 اسبوع ثم تجريعها بمعلق جذور الاسبرجس كالمجموعة الرابعة لمدة ستة أسابيع.
المجموعة السابعة: جزيئات الكركمين النانومترية + DEN(وقائي): تم تجريع الجرذان بجزيئات الكركمين النانومترية مثل المجموعة الثالثة لمدة سته اسابيع ثم تجريعها بمادة الDEN لمدة 12 اسبوع مع استمرارية التجريع بجزيئات الكركمين النانومترية حتى نهاية التجربة.
المجموعة الثامنة: الاسبرجس + DEN (وقائي) : تم تجريع الجرذان فمويا بمعلق جذور الاسبرجس مثل المجموعة الرابعة لمدة سته اسابيع ثم تجريعها بال DEN لمدة 12 اسبوع مع استمرارية التجريع بمعلق جذور الاسبرجس حتى نهاية التجربة.
في نهاية التجربة بعد 18 اسبوع تم ذبح الجرذان بعد تخديرها بمادة اليوريفين . و تم تجميع عينات الدم, و استئصال نسيج الكبد لعمل التحاليل اللازمة , ثم فصل المصل من الدم بواسطة جهاز الطرد المركزي و تقسيم الكبد الى أجزاء لتعيين التعبير الجيني و كثافة البروتين و دراسة الانسجة المرضية.
أوضحت نتائج الدراسة بعد تحليلها احصائيا التالي:
- بقياس نشاط انزيمات الالنين أميينو ترانسفيريز(ALT) و الاسبرتات أميينو ترانسفيريز(AST) و الألكالين فوسفاتاز (ALP) أظهرت النتائج ارتفاعا معنويا في نشاط انزيمات الكبد في الجرذان المعاملة بال DEN لمدة 12 اسبوع عند مقارنتها بالمجموعه الضابطة السالبة.
- و أوضحت النتائج أن الجرذان المعاملة بال DEN و مادة الكركمين النانومترية أو الاسبرجس وقائيا او علاجيا أحدثت انخفاض معنويا ملحوظا في نشاط الانزيمات الالنين أميينو ترانسفيريز(ALT) و الاسبرتات أميينو ترانسفيريز(AST) و الألكالين فوسفاتاز (ALP) عند المقارنة بالمجموعة الضابطة المعاملة بال DEN.
- وجد انخفاض ملحوظ عال المعنوية في تركيز الألبومين في مصل الدم في مجموعة ال DEN بالمجموعة الضابطة السالبة.
- وأظهرت النتائج ارتفاع معنوي في مستوى الألبومين في مصل الدم في مجموعات DEN المحمية بجزيئات الكركم النانومترية أو جذور نبات السبرجس و المعالجة بجزيئات الكركم النانومترية أو جذور نبات الأسبرجس مقارنة بالمجموعة الضابطة الإيجابية.
- أظهرت النتائج الخاصة بقياس حالة مضادات الأكسدة بجسم الجرذان التي تم معاملتها بال DEN حدوث انخفاض معنوي في نشاط انزيمات الكتاليز (CAT) و السوبر اوكسيد ديسميوتاز (SOD) و الجلوتاثيون فوق المؤكسد (GPx) و التي تم قياسها في نسيج الكبد بالمقارنة بالمجموعة الضابطة السالبة.
- وأوضحت النتائج حدوث ارتفاع معنوي في نشاط الانزيمات الخاصة بكبد الجرذان الخاصة بالمجموعات التي تم تجريعها بجزيئات الكركم النانومترية أو جذور نبات السبرجس قبل أو بعد ال DEN كحماية أو كعلاج مقارنة بنتائج مجموعة الجرذان المصابة بسرطان الكبد و غير معالجة.
- و بقياس تأثير الدراسة على عوامل الالتهاب تم قياس الانترلوكين1 β( IL-1β) و الانترلوكين 6 (IL-6) و أظهرت النتائج ان تجريع الجرذان بال DEN أدى الى ارتفاع معنوي في مستوى كل من عوامل الالتهاب تحت الدراسة الانترلوكين1 β( IL-1β) و الانترلوكين 6 (IL-6) و ذلك بالمقارنة بالمجموعة الضايطة السالبة.
- كما لوحظ انخفاض معنوي في مستوى عوامل الالتهاب الانترلوكين1 β( IL-1β) و الانترلوكين 6 (IL-6) في مصل الدم في الجرذان التي تم تجريعها بجزيئات الكركمين النانومترية او بمعلق جذور الاسبرجس قبل (كحماية) او بعد (كعلاج) المعاملة بال DEN و ذلك بالمقارنة بمجموعة ال DEN الغير معالجة.
- و بدراسة عامل الموت المبرمج للخلايا ( Caspase-3) أظهرت النتائج ارتفاع معنوي في مستوى ال Caspase-3 في الجرذان المعاملة بال DEN بالمقارنة بالمجموعة الضابطة السالبة.
- بينما أظهرت الدراسة انخفاض معنوي في مستوى Caspase-3 في مصل الدم في المجموعات التي تم تجريعها بال DEN و علاجها أو حمايتها بتجريعها بجزيئات الكركمين النانومترية أو معلق جذور الأسبرجس بالمقارنة بالمجموعة الضابطة الموجبة (DEN) الغير معالجة.
- و بدراسة تأثير العوامل المختلفة محل الدراسة على التعبير الجيني لكل من : NF-Kβ) , ( P-53 and β-TrCP أوضحت النتائج ارتفاع ملحوظ في التعبير الجيني لكل من NF-Kβ, P-53 and βTrCP) ) نتيجة تجريع الجرذان بال DEN بالمقارنة بالمجموعة الضابطة السالبة.
- وبتجريع الجرذان المعاملة بال DEN بجزيئات الكركمين النانومترية أو معلق جذور الاسبرجس قبل (كوقاية) أو بعد (كعلاج) أوضحت النتائج انخفاض معنوي للتعبير الجيني للجينات محل الدراسة بالمقارنة بالمجموعة الضاطة الموجبة (DEN) الغير معالجة.
- و أوضحت النتائج ارتفاع معنوي لمستوى كثافة البروتين لكل من (β-Catenin, WNT) في كبد الجرذان التي تم تجريعها بال ( DEN ) بالمقارنة بالمجموعة الضابطة السالبة.
- و بتجريع الجرذان جزيئات الكركمين النانومترية أو معلق جذور الاسبرجس قبل أو بعد (كحماية أو كعلاج) المعاملة بال ( DEN ) أوضحت النتائج انخفاض معنوي في مستوى كثافة البروتين لكل من ال (β-Catenin, WNT) بالمقارنة بالمجموعة الضابطة الموجبة ( DEN ) الغير معالجة.
الفحص الهستوباثولوجى لأنسجة الكبد:
أظهر الفحص الباثولوجي الاتي:-
1- المجموعة الاولى : أظهر الفحص الباثولوجي للمجموعة الاولى تركيب نسيجي طبيعي لخلايا النسيج الكبدي.
2- المجموعة الثانية : مجموعة ال DEN)) : لم تتلقى هذه المجموعة أي علاج او حماية، وقد اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة وجود خلل في التوزيع الخلوي لخلايا النسيج الكبدي و تجمع الخلايا بصورة عشوائية مع تضخم و تحوصل الأنوية.
3- المجموعه الثالثة: مجموعة جزيئات الكركمين النانومترية: :اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة نسيج كبدي طبيعي بدون اي تغيرات واضحة.
4- المجموعه الرابعة: مجموعة الاسبرجس راسيموسوس: اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة نسيج كبدي طبيعي مع تحلل خلوي مائي بسيط.
5- المجموعه الخامسة: DEN+ جزيئات الكركمين النانومترية (علاجي): اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة تحسن التركيب الخلوي للنسيج الكبدي و انحسار الالتهاب الخلوي في الخلايا الكبدية.
6- المجموعه السادسة: DEN + الاسبرجس راسيموسوس (علاجي): اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة تجمعات دهنية ملحوظة بين الخلايا الكبدية.
7- المجموعة السابعة: جزيئات الكركمين النانومترية + DEN(وقائي): اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة استعادة الخلايا الكبدية لحالتها الطبيعية مع وجود نسبة التهابات بسيطة.
8- المجموعة الثامنة: الاسبرجس راسيموسوس + DEN(وقائي): اظهر الفحص الباثولوجي لهذه المجموعة تضخم بسيط في الخلايا مع وجود نسبة التهاب خلوي بسيط.
الخلاصــة و التوصيـــات
في ضوء النتائج التي تم عرضها بهذه الدراسة يمكن ان نستخلص أن التجريع الفموي لجزيئات الكركمين النانومترية و معلق جذور الاسبرجس بتركيزات مناسبة لها تأثير كبير كمضاد لسمية و تسرطن الكبد المحدث كيميائيا بال DEN)) من خلال تحسين حالة الأكسدة و خفض دلالات الاتهاب و الموت المبرمج للخلايا و التعبير الجيني لجزيئات دلالات الأورام ومسارات الإشارة.
وأخيرا هذه الدراسة توصي بإضافة جزيئات الكركمين النانومترية و جذور الاسبرجس كمكمل غذائي لها دور وقائي ضد الاصابة بالسرطان و يساعد على العلاج من الأورام بإضافته الى البرامج العلاجية المعتمدة.