الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 202 |  |  |
| | | from | 202 | | |
Abstract
كان الهدف من هذه الدراسة هو تحديد الأسباب البكتيريه المسببة للنفوق الجماعى لأسماك البلطي النيلي فى الصيف مع اجراء محاولات للسيطرة على المسببات المرضية للنفوق العالى وقد تحقق ذلك من خلال:أولا: تم عزل وتصنيف جزيئى لمسببات الامراض البكتيريه المصاحبة للنفوق الجماعي على عدد 120 سمكة بلطى نيلى مصاب طبيعيا تم تجميعها من 13 مزرعه سمكية مختلفة فى محافظات كفر الشيخ والبحيره والشرقيه. وقد عانت هذه المزراع من معدلات نفوق عالى تترواح ما بين 50 الى 80% خلال الفتره من ابريل الي اكتوبر 2018. بالاضافة الى ذلك تم اخذ عينات من مياه المزراع لعمل تحليل فيزيوكيميائى لها.- تم تحليل عناصر جودة المياه مثل (درجة الحرارة ، الأكسجين المذاب ، الاس الهيدروجينى و الامونيا) والمعادن الثقيلة مثل (الكادميوم والرصاص والنحاس والحديد والزنك). بشكل عام، كانت نتائج جودة المياه في محافظة كفر الشيخ أعلى من نتائج مزارع البحيرة. وكانت نسبة معظم المعادن الثقيلة ضمن الحدود المسموح بها باستثناء نسبة الكادميوم الذى أظهر نسبة أعلى من الحدود المسموح بها فى المزراع السمكية.- اظهر الفحص الاكلينيكي للاسماك المصابة علامات التسمم الدموى مثل انزفة وتقرحات جلدية، استسقاء فى البطن، بروز فتحة الشرج، تعفن الزعانف، تساقط القشور وجحوظ في العين من جانب واحد. اما الصفة التشريحية للاسماك المريضة اظهرت تضخم واحتقان في الكبد والكلى والطحال وتضخم الحويصلة المرارية مع وجود سوائل فى التجويف البطنى فى بعض الحالات.- تم تعريف البكتيريا المعزولة بناءا على التوصيف المظهري والكيميائي باستخدام API20E على النحو التالى: الايرومونادز (A. hydrophila, A. veronii, A. caviae, and A. sobria)، االسيدوموناس فلورسنس، السيتروبكتر فريندى، البروتيس فلجارز، و السيراتيا(S. liquefaciens, and S. plymuthica)، وإنتيروبكتر (E. sakazakii and E. cloacae)، واللاكتوكوكس لاكتيز، و فيبريوا كوليرا، والاستربتوكوكس (Strept. lutiensis and Strept. Equine و بكتريا الكوريثيا. وقد تم عمل توصيف جزيئي للبكتريا الاكثر انتشارا باستخدام rDNA 16S وسجلت وزن جزيئى عند1485 قاعده مزدوجة. -كان إجمالي معدل انتشار السلالات البكتيرية المعزولة (99.5٪) بين اسماك البلطى التى تم فحصها خلال موسم الصيف. كانت المعزولات البكتيرية الأكثر انتشارا هي الايرومونادز14) عترة بنسبة 48,3٪)، من بينها (الايروموناس فيروني (6 عترات) والذى يعتبر اكثر انواع البكتيريا شيوعا. أوضحت النتائج أن أكثر المعزولات البكتيرية التي تم الكشف عنها تم عزلها من أنسجة الكلى والكبد.- اظهر اختبار الحساسيه للمضادات الحيوية أن جميع معزولات الأيرومونادز المختبرة كانت حساسة بنسبة 100٪ لـلفلورفينيكول وإريثروميسين، ومقاومة بنسبة 100٪ للأوكسيتيتراسيكلين والتتراسيكلين. سجلت الانواع الاخرى من البكتيريا التي تم اختبارها حساسية بنسبة 100٪ للفلورفينيكول، للإريثروميسين بنسبة 54.5٪ و 36.4٪ لحمض الناليديكسيك والأمبيسلين. وقد تم تسجيل مقاومة ضد اللينكومايسين والتتراسيكلين بنسبة 100٪، ومقاومة للأوكسي تتراسيكلين بنسبة 90.9 ٪ و مقاومة للبنسلين بنسبة 81.8 ٪ فى الانواع الاخرى من البكتيريا المختبرة.- تم اجراء العدوى التجريبية لاكثر المعزولات البكتيرية(A (HY1) و A (HY2) و A (HY3) و A (HY4) و A (HY6) و Proteus vulgaris و Pseudomonas florosence و .(Citrobacter freundii واظهرت النتائج أن معدل النفوق مرتفع فى اسماك البلطى النيلى المصاب بسلالة ايروموناس فيروني (HY2، بنسبة 100%) عند الجرعة 9 × 108 خلية / مل، تليها ايروموناس فيروني (HY4، بنسبة 90 %)،( السيتروبكتر فريندى والبروتيس فلجارز(P.vulgaris) (80%)، ايروموناس فيروني(HY3,HY6، بنسبة 60%) و االسيدوموناس فلورسنس بنسبة 40 % نافق. من أصل 5 عزلات تم اختبارها من الايرومونادز، اثنتان من السلالات (HY2 و (HY4 اظهروا ضراوه قوية وسلالتان (HY3 و HY6 ) ضراوة معتدلة. بينما، لم تسجل سلالة HY1 أي حالة وفاة فى الاسماك المصابة تجريبيا (سلالة غير ضارة).- أوضحت الدراسات النسيجية المرضية أن التغيرات الواضحة فى العديد من الأنسجة المصابة الناتجة عن هذه المعزولات البكتيرية متفاوتة حسب درجة الضراوة البكتيرية وتركيز الخلايا البكتيرية.- أظهر تحديد الجينات المقاومة للمضادات الحيوية فى البكتيريا الممرضة ((A. veronii [A(HY2), A(HY3), A(HY4), A(HY6)], Proteus vulgaris, Pseudomonas flourosence and Citrobacter freundii)) أن هذه المعزولات لديها جينات المقاومة ضد (Ermb ,اللينكوميسين( ، , Tem) البنسلين) ، Teta, tetracycline) , Sul1), (سلفوناميد, Dfra) , (تريميثوبريم,Mpha), ( الماكروليدات) و ,Qnr)الكينولون)) والتى تؤكد نتائج اختبار الحساسية لهذه المضادات الحيوية. كان هناك ارتباط واضح بين مدي الضراوه ووجود الجينات المقاومة للمضادات الحيويه فى السلالات شديدة الضراوة.ثانيا: تم اجراء تجارب علاجية باستخدام اثنين من المضادات الحيوية فى العلف (فلوروفينيكول وإريثروميسين) والتى اظهرت حساسية عالية ضد المعزولات البكتيرية الممرضة. وقد اظهرت النتائج ان نسبة الاعاشة فى الأسماك المعالجة بالفلوروفينيكول من (50-100٪) مع السلالات البكتيرية المختلفة ، بينما تراوحت نسبة الاعاشة فى الاسماك المعالجة بالاريثروميسين من (45-91.7٪). بشكل عام، كانت نسبة الاعاشة أعلى خاصة مع سلالات الأيرومونادز المتوسطة القوي (HY3 ، (HY6 ، ومع السيتروبكتر فريندى والبروتيس فلجارز- تم ايضا دراسة فعالية اضافات الاعلاف (SANACORE® GM) كمضادات لالية الاتصال بين البكتيريا (antiquorum sensing).اوضح البلطى النيلى المغذى على السناكور بجرعة 5 مجم/ كجم علف لمدة 4 أسابيع تحسن ملحوظ فى أداء النمو. الاختبارات الدموية مثل (مستوى الهيموجلوبين، كرات الدم الحمراء، كرات الدم البيضاء، النيتروفيل، الخلايا الليمفاوية وعدد الصفائح الدموية)، القياسات المناعية مثل (نشاط الخلايا الأكلة، نشاط الليزوزيم، IgM، اكسيد النيتريك، البروتين الكلي، الألبويومين) انزيمات الكبد (ألانين أمينوترانسفيراز، أسبارتات أمينوترانسفيراز) ومضادات الأكسدة (SOD و (GPX أظهروا زيادة معنوية في المجموعة المعالجة مقارنة بالمجموعة الضابطة. ايضا، كان نشاط Serum bactericidal activity فى المجموعة المغذاة على السناكور أعلى بكثير من المجموعة الضابطة.- سجلت المجموعة المعالجة بالسناكور والمصابة تجريبيا بسلالات A (HY2) أو (A (HY4) نسبة اعاشة بنسبة 100 ٪ مقارنة بالمجموعة الضابطة المعداه تجريبيا والتي سجلت نسبة اعاشة صفر و10% على التوالى.