Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Application of molecular tools in parentage verification of egyptian arabian horses /
المؤلف
Sargious, Mary Aiad Nowar.
هيئة الاعداد
باحث / ماري عياد نوار سرجيوس
مشرف / رجب محمود الشواربي
مناقش / محمد السيد صبحي ابو سالم
مناقش / كوثر عبدالواحد الهادي
الموضوع
Horses Breeding.
تاريخ النشر
2019.
عدد الصفحات
94 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
Veterinary (miscellaneous)
تاريخ الإجازة
01/01/2019
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية الطب البيطري - الطب الشرعى والسموم
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 89

from 89

Abstract

يعد الحصان العربي من أعرق سلالات الخيول في العالم وأغلاها ثمناً، ويرجع ذلك إلى عناية العرب بسلالات خيولهم الممتازة والمحافظة على أنسابها، مما جعلها أفضل الخيول الموجودة الآن في العالم، وأجودها على الإطلاق. فهي تجمع بين جمال الهيئة، وتناسب الأعضاء، ورشاقة الحركة، وسرعة العدو من جهة، وحدة الذكاء، والمقدرة العالية على التّكيُف. فالحصان العربي الأصيل يعتبر من أقدم الجياد على الإطلاق بدمه الأصيل.وحرص العرب كل الحرص على أن لا تختلط دماء خيولهم بدماء غيرها من الخيول الهجينة، فذكروا مرابطها، وأصولها، إلى درجة أنهم عرفوا كل فرس ومشجّرات آبائه. فهم لا يقفون عند الآباء فحسب، بل يحرصون على حفظ نسب الخيل من الأمهات؛ لأنها تحمل الصفات النقية الأصيلة، وقد اشتهرت كثير من الخيول بنسبها إلى الجد الأكبر، وبقيت أنسابها متوارثة في مكان نشأتها في جزيرة العرب فكان العرب قديمًا يقطعون المسافات الطويلة مع خيلهم؛ ليصلوا بها إلى فحل ماجد العرق معروف النسب والحسب؛ فيلقحونها منه حفاظا علي نسب الخيل .وتعد محطة الزهراء لتربية الخيول العربية هي المكتب الوحيد المسئول عن تسجيل الخيول العربية في مصر، ويوجد أكثر من 900 مزرعة خاصة لتربية الخيول العربية في مصر تحت إشراف الهيئة الزراعية المصرية. وتقوم الهيئة الزراعية المصرية بختم كل الخيول المملوكة لها، بالإضافة إلى الخيول الخاصة تحت إشراف الهيئة بختم دائم لايزول (Freeze Marking) حيث تعتبر جمهورية مصر العربية من أشهر الدول التي تختم خيولها بالختم البارد (Freeze Marking) ، وتعتبر الهيئة الزراعية المصرية ومحطة الزهراء للخيول العربية الأصيلة هي جهة التسجيل والترقيم في الجمهورية، ويقرأ الختم من اليسار إلى اليمين، وينقسم الختم المصري إلى قسمين؛ القسم الأول هو الختم الخاص بالخيل المنتجة من قبل الهيئة (مربط الزهراء)، ويتميز الختم الخاص بالخيل المنتجة من قبل مربط الزهراء بوجود حرف (A) بعد حرف (E)، الذي يرمز إلى الحرف الأول من اسم جمهورية مصر العربية باللغة الإنجليزية Egypt)). والقسم الثاني هو الختم الخاص برقم تسجيل الحصان وتاريخ ميلاده.
وتعتبر الهيئة الزراعية المصرية المكتب الوحيد المصرح له بتقييم الخيول سواءً المستوردة منها من الخارج أو المصدرة إلى الدول الأخرى. ومن الجدير بالذكر أن منظمة الخيول العربية العالمية تفضل محطة الزهراء عند الاستعلام عن أي نسب في العالم. وتصدر الهيئة الزراعية المصرية شهادات نسب حتى ستة أجيال لكل الخيول المصدرة للدول الأخرى.ويأخذ كل مهر تتم ولادته اسمًا لا يكرر ورقمًا يكوى به على العنق بالنيتروجين السائل، ويتم التسجيل حتى الجيل العاشر. ويتم عمل تشبيه للمهر وتسجيل كل ما يتعلق به كالجنس واسم الاب واسم الام وتاريخ الميلاد واخيرا سحب عينة شعر لارسالها للمعمل المختص لاستخراج شهادة ال DNA.ولكي يتمكن الخيل من المشاركة في المسابقات الدولية والمحلية لجمال الخيول العربية او المشاركة في المزادات العلنية لبيع الخيول العربية او التصدير للخارج او تنتقل ملكيته لمربي آخر لابد ان تكون شهادة الDNA الخاصة به ايجابية أي مطابقة لكلا من ابيه وامه.ادراكا منا لأهمية تسجيل الخيول العربية واثبات نسبها عن طريق البصمة الوراثية قمنا بهذة الدراسة لحل كل ما يتعلق من تحديات تواجهنا كمعمل مرجعي لاختبار البنوة واثبات النسب للخيول العربية.واستكمالا للبحث الذي بدأناة في عام 2014 تحت عنوان ” تأسيس إختبار البنوة للخيول للتعرف علي الخيول العربية في مصر” (دراسة الماجستير) والذي تم من خلاله تاسيس اختبار البنوة واثبات النسب للخيول العربية المصرية وإجتياز أختبار الكفاءة من المنظمة العالمية لوراثة الحيوان (ISAG) لاول مرة في مصر طبقا للاشتراطات الدولية والتي تنص علي حتمية تطابق اثني عشرواسمة من واسمات المايكروستاليت بين المهر وكلا من ابيه وامه وهذة الواسمات هي (AHT4, AHT5, ASB2, ASB17, ASB23, HMS2, HMS3, HMS6, HMS7, HTG4, HTG10 and VHL20)وأوصت المنظمة العالمية لوراثة الحيوان علي انه في حالة وجود واسمة واحدة غير متطابقة بين المهر وايًا من والديه او كليهما(single system exclusion ) لابد وان نجري اختبارا تاكيديا آخر وهو (TKY Markers) للفصل ما بين اثبات او نفي البنوة. فكان يجب علينا ان نقوم بتاسيس هذا الاختبار وتقييم مدي قدرته وكفاءته لتاكيد البنوة او نفيها.أجريت هذة الدراسة وكانت الاهداف الرئيسية هي كالآتي:تأسيس الاختبار الخاص بالتعرف علي هوية الحصان العربي اعتمادا علي14 TKY Markers)) عن طريق دمج أربعة عشر واسمة معلمة بأربع صبغات مشعة مختلفة مع بعض في محلول واحد.إثبات البنوة للمهاري اللتي لديها عدم تطابق في واسمة واحدة مع ايا من والديها او كليهما(single system exclusion). تقييم التنوع الجيني للخيول العربية المصرية باستخدام 14 TKY Markers)).تحديد التباين الجيني بين كلا من السلالات:(Arabian, Nooitgedacht and Thoroughbred)باستخدام 14 TKY Markers)).تحليل ومقارنة كلا من الاختبارين ISAG and TKY panel)) من حيث قدرتهم على اظهار التنوع الجيني لسلالة الخيول العربية المصرية.ولتحقيق هذة الاهداف استخدمنا المنهجية التالية:•تم استخدام نوعين من العينات في هذة الدراسة:استخدام الحامض النووي الخاص بعينات اختبار الكفاءة بتنسيب الخيول من المنظمة الدولية لوراثة الحيوان لعامي 2017-2019 وعددهم تلاتون عينة مجهولة التحليل الجيني:19 Thoroughbred + 11 samples of Nooitgedacht breeds إجمالي عدد 112 عينة تم سحبها من شعر الرقبة من خيول محطة الزهراء الكائنة بعين شمس والتابعة للهئية الزراعية المصرية ، 71 عينة تم سحبهم بشكل عشوائي و41 عينة لسبعة عشر عائلة (8 طلائق + 17 مهر + 16 فرسة).•تم عزل المادة الوراثية (الحامض النووي) من جذور الشعرلعينات محطة الزهراء.•تم اجراء تفاعل البلمرة المتسلسل لبعض واسمات المايكروستلايت الخاصة ب (TKY Panel) طبقا لمعايير المنظمة الدولية لوراثة الحيوان والتي توصي باستخدام ما لا يقل عن اثنتي عشر من هذة الواسمات وهم: (TKY287, TKY294, TKY301, TKY312, TKY321, TKY325, TKY333, TKY341, TKY343, TKY344, TKY 337, TKY 297, TKY374 and TKY394)>•عمل اختبار تحليل لقطعة الحامض النووي المُعلَّم عن طريق جهاز التحليل الجيني باستخدام برنامج (Gene mapper).•تم عمل مقارنة بين نتائج التحليل الجيني للعينة المرجعية ومطابقتها بالتقرير الوارد معها واتضح انها متوافقة في كل الواسمات.•على ضوء هذه النتيجة تم عمل اختبار تحليل لقطعة الحامض النووي المُعلَّم الخاص بعينات الخيول بمحطة الزهراء.•وايضا تم اجراء التحليل الجيني للحامض النووي الخاص بعينات اختبار الكفاءة بتنسيب الخيول من المنظمة الدولية لوراثة الحيوان وإرسال هذة النتائج عبر البريد الالكتروني.•تم اجراء تفاعل البلمرة المتسلسل لواسمات المايكروستلايت الخاصة ب ISAG Panel)) للسبعة عشر عائلة من خيول محطة الزهراء وهم: (AHT4, AHT5, ASB2, ASB17, ASB23, HMS2, HMS3, HMS6, HMS7, HTG4, HTG10, VHL20).•تم اجراء تفاعل البلمرة المتسلسل لواسمات المايكروستلايت الخاصة ب (TKY Panel) للسبعة عشر عائلة من خيول محطة الزهراء.• تم عمل تحليل احصائي لكل من المجموعتين من العينات ولكلا الاختبارين لدراسه مدي حساسيه و دقه هذة الواسمات وقدرتها علي اظهار التنوع الجيني للسلالات الثلاث.النتائج المتحصل عليها يمكن تلخيصها في النقاط التاليه : بتحليل الثلات سلالات Arabian, Nooitgedacht and Thoroughbred باستخدام 14 TKY Markers، وجد ان سلالة breed Nooitgedacht اقرب جينيا لسلالة Thoroughbred عنها الي ال Arabian population التكوين الجيني ل Arabian populationجعلها منفردة مقارنه بالسلالتين الاخرتين ولكن اقرب الي سلالة ال breed Nooitgedacht عنها ال سلالة ال Thoroughbred.التنوع الجيني لسلالة الخيول العربية اوضح انه يوجد تربية داخلية بمعدل كبيرمقارنة بالسلالتين الاخرتين.قدرة ال TKY Panel علي التعبير عن التمايز الجيني للقطيع أعلي عنه في ISAG Panel ولكن ستظل ال TKY Panel هي الاختبار التأكيدي في حالات single system exclusion للاختبار الاول. تم اثبات البنوة لبعض العائلات التي شهدت عدم تطابق في واسمة واحدة فيISAG Panel عن طريق تطابق اثني عشر واسمة اضافية منTKY Panel) ) لكل من المهر والاب والام .- نخص بالذكر انه قد تمكنا من الوصول للطريقة الامثل لعمل التحليل الجيني لقطعة الDNA لعدد اربعة عشر واسمة معلمة باربع صبغات مشعة مختلفة مجتمعة في آن واحد وذلك عن طريق تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي.- ونستطيع ان نسرد المميزات الآتية:1-استهلاك كمية محدودة من الحمض النووي للمهر الواحد.2-تمايز الواسمات بأربع صبغات مختلفة اتاح امكانية التحليل للاليلات المميزة للخيول العربية بدون تداخل.3-توفير الكيماويات المستخدمة في الأختبار وبالتالي تخفيض تكلفة العينة الواحدة.4-توفيرا في الوقت.5-توفيرا في المجهود.ولذلك توصي هذه الدراسة بزيادة وعي القائمين علي برامج التربية بمحطة الزهراء والمربيين للخيول العربية بالتنوع في إختيار الطلائق اثناء موسم التزاوج وكذلك التقليل من التربية الداخلية (Inbreeding ) لان هذا النوع من التزاوج يؤدي الي تركيز الصفات الوراثية في النتاج سواءا كانت حسنة او سيئة وعلي المدي البعيد يؤدي الي تشابه كبير في المحتوي الجيني للمهر ويحتاج الامر الي زيادة عدد الواسمات لكي نتمكن من التفرقة بين المهر والآخر.واخيرا تعتبر هذة الدراسه هي الاولي من نوعها من حيث دراسة الخيول العربية المصرية ب TKY Panel وكذلك مقارنة كلا من الاختبارين (ISAG and TKY)بالنسبة للخيول العربية و بذلك نكون قد قمنا باستكمال كل ما يستلزمه اختبار البنوة للخيول العربية في مصر القائم علي إختبار الواسمات طبقا للمعايير والاشتراطات الدوليه التي تنص عليها المنظمه العالميه لوراثه الحيوان لإزالة اي عائق امام رواج وانتعاش الخيول العربية المصرية في العالم.و قد تم اعتماد 31 واسمة ضمن نتائج اختبارالكفاءة الخاص بتنسيب الخيول بوحدة بحوث الجينوم من المنظمة العالمية لوراثة الحيوان لاختبار عام 2018- 2019 وقد كانت النتيجة ( 100%) وبذلك تصبح وحدة بحوث الجينوم بمعهد بحوث صحة الحيوان هي المعمل الوحيد في مصر الذي يقوم بهذا التحليل.