Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Biochemical and molecular studies on the effect of water resources mycotoxin in rats and ameliorating role of some natural agents /
المؤلف
Bakr, Walid Mohammed Taha Ibrahim.
هيئة الاعداد
باحث / وليد محمد طه ابراهيم بكر
مشرف / سامى على حسين عزيزة
مشرف / أمنية محمود عبدالحميد
مناقش / اسامة سمير الطويل
مناقش / ايمان شوقى لاظ
الموضوع
Rats Diseases.
تاريخ النشر
2019.
عدد الصفحات
239 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
البيطري
تاريخ الإجازة
1/1/2019
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية الطب البيطري - الكيمياء الحيوية
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 244

from 244

Abstract

الماء نعمة الله وهو مورد ثمين جدا لهذا الكوكب حيث يكون مصدرا أساسيا للحياة . وتلوث المياه هو أي تغير فيزيائي أو كيميائي في نوعية المياه، بطريقة مباشرة أو غير مباشرة، يؤثر سلبياً على الكائنات الحية، أو يجعل المياه غير صالحة للاستخدامات المطلوب . يعتبر تلوث المياه من اكثر المخاطر التي تؤثر على مصر ويؤثر تلوث الماء تأثيراً كبيراً في حياة الفرد والأسرة والمجتمع، فالمياه مطلب حيوي للإنسان وسائر الكائنات الحية، فالماء قد يكون سبباً رئيسياً في إنهاء الحياة على الأرض إذا كان ملوثاً . ينقسم التلوث المائي إلى نوعين رئيسيين، الأول هو التلوث الطبيعي، ويظهر في تغير درجة حرارة الماء، أو زيادة ملوحته، أو ازدياد المواد العالقة. والنوع الآخر هو التلوث الكيميائي، وتتعدد أشكاله كالتلوث بمياه الصرف والتسرب النفطي والتلوث بالمخلفات الزراعية كمبيدات الحشرات والمخصبات الزراعية وهذا النوع يؤدى الى التلوث بالتسمم الفطرى بكافة اشكاله.تعمل الأسماك كوسيلة للعديد من الكائنات الحية الدقيقة من البيئة المائية الطبيعية الملوثة ، والمجاري والتربة ومناطق الحصاد. السموم الفطرية هي مركبات سامة تُنتجها بعض أنواع العفن (الفطريات) بطريقة طبيعية. وجود السموم الفطرية في البيئة المائية ناتج فى بعض الاحيان عن المياه المتدفقة من الحقول الزراعية ومع ذلك فقد ثبت ان الفطريات القادرة على التخليق الحيوى للسموم الفطرية يمكن ان يتطور ايضا فى الماء. وقد تم تحديد عدة مئات من السموم الفطرية المختلفة، ولكن السموم الفطرية الأكثر شيوعاً والتي تشكل مصدراً للقلق على صحة الإنسان والماشية تشمل الأفلاتوكسينات والأوكراتوكسين ألف والفيوزريم. وتظهر السموم الفطرية في السلسلة الغذائية نتيجة لتلوث المحاصيل بالعفن. ويمكن أن يحدث التعرض للسموم الفطرية على نحو مباشر بتناول الأغذية الملوثة وعلى نحو غير مباشر عن طريق الحيوانات التي تغذت على اغذية وأعلاف ملوثة، ولاسيما حليب هذه الحيوانات. التلوث بمركب الأفلاتوكسين (AFB1) عن طريق الأغذية الملوثة يسبب كثيرًا من الإصابات في الأعضاء والأنسجة المختلفة ويؤدي إلى تثبيط المناعة والإصابة بسرطان الكبد وتلف الكلى.وتعتبر الاسبيرولينا من الطحالب الخضراء المزرقة التى تعتبر اغنى مصدر للكلوروفيل والتى تحتوى على جميع الاحماض الامينية الاساسية وتحتوى على نسبة كبيرة من البروتين وفيتامين بى 12 ونسبة كبيرة من مضادات الاكسدة مثل البيتا كاروتين وفيتامين هاء وفيتامين بى1وبى5وبى6 والزنك والمنجنيزوالنحاس والسيلينيوم.وتحمى الاسبيرولينا العديد من الامراض لما لها من دور قوى كمضادات الأكسدة المهمة والقوية.المورينجا تُعَدُّ أحد أهم الأعشاب الطبية التي لها خصائص فعالة في تثبيط عمليات توليد الشوارد الحرة وتقليل كثافة بيروكسيد الدهون وتعزيز أنشطة الإنزيمات المضادة للأكسدة حيث ان أوراق نبات المورينجا تحتوى على مركبات وصبغات عضوية مثل الكاروتينات والفلافونويد والأيزوثيوسيانات، والنيازيميسين، والجلوكوسينولات، والمعادن، والستيرول، وكلها مواد مسؤولة عن تكوين مضادات قوية للأكسدة في جسم الإنسان.بالاضافة لقدرة هذه الاوراق على مواجهة التغيرات الوراثية الضارة الناجمة عن مركب ”الأفلاتوكسين إذ يشكل ”عامل قمع” للمناعة في الإنسان والحيوان، كما أنه مسؤول عن بعض الأضرار التي تظهر في الحمض النووي.كما ان هذه الاوراق يمكن أن تثبط السُّمِّيَّة الوراثية التي يسببها مركب ”الأفلاتوكسين”، وكذلك قدرته على تثبيط السمية الدموية والسرطنة في الجرذان.ونظرا لكثرة انتشار الملوثات المحلية بمصادر المياه المختلفة بمحافظة المنوفية من ملوثات كيميائية وملوثات بيولوجية مما ادى الى التأثير السلبى على الكائنات الحية والدقيقة بالماء والتى ينعكس اثارها على صحة الانسان والحيوان. ولذلك كان الهدف من إجراء هذه الرسالة عمل دراسة ميدانية لتواجد السموم الفطرية بمصادر المياه المختلفة بمحافظة المنوفية لحماية صحة الحيوان والانسان من المخاطر الناجمة عن السموم بالاضافة الى رفع انتاجية الحيوان وحمايته من امراض النقص الغذائى وحماية الثروة الحيوانية من خطورة الامراض التى تنتقل عن طريق تلوث الماء والنبات والاسماك بالسموم الفطرية المختلفة وهذه الحماية حماية طبيعية باستخدام النباتات الطبية المختلفة مثل طحالب الاسبيريولينا ونبات المورينجا لما لهم من تأثير وقائى محتمل على المؤشرات الحيوية من الأكسدة والأستجابة الألتهابية الناجمة عن تسمم الكبد من خلال تسمم الدم البكتيرى فضلا عن آلية المشاركة فى حماية الكبد من مثل هذه الأنواع من التسمم الفطرى.تتم هذه الدراسة على مرحلتين :المرحلة الاولى :عمل مسح ميدانى لمصادر المياه بمحافظة المنوفية لتواجد السموم الفطرية من 7محطات مختلفة بالمحافظة كالاتى:1 - اخذ عدد 5 عينات من اسماك البلطى الموجودة بالماء من كل نقطة او محطة2- اخذ عدد 5 عينات من النباتات المتطفلة على شاطىء هذه المناطق السابق ذكرها 3- فحص جميع العينات للكشف عن وجود السموم الفطرية الافلاتوكسن (بى1،بى2،جى1،جى2)- اوكراتوكسن- فيومينسن بى1- وتى توكسين ويتم الفحص على جهاز الكروماتوجرفى مطياف الكتلة((LC-MS/MS . 4- رصد النتائج المحدثة لهذه المرحلة وتقييمها المرحلة الثانية:1- اخذ العينات الايجابية والاكثر تسمما(نبات-اسماك) وطحنها جيدا لتصبح بودرة تضاف الى العليقة مع معرفة نسبة السموم الفطرية بها قبل مزجها بالعليقة وذلك لعمل تجربة بحثية على الجرزان لدراسة اثار هذه السموم.2 - احضار مستخلص نبات الاسبريولينا ونبات المورينجا (عن طريق ذوبان كلا النباتين فى الماء بنسب معلومة) وذلك لاظهار التأثير التحسنى لهم على السموم الفطرية.3- احضار العليقة وتحليلها تحليلا كيمائيا كاملا والتأكد من خلوها من السموم الفطرية الممكنة .4- احضار عدد 40 من ذكور الجرزان البيضاء والتى تتراوح أعمارهم من 4-5 اسابيع وأوزانهم من 100 -130 جرام ، تم إحضارهم من معمل حيوانات التجارب بمعهد بحوث صحة الحيوان بالدقى-الجيزة. وقد تم وضعهم فى أقفاص حديدية مفصولة وتعايشت فى نفس الظروف البيئية وظروف التربة والتغذية لمدة أسبوع قبل بدأ التجربة حيث تم تغذيتها على نفس نوع العليقة دون تمييز. وقد تم تقسيمهم بالتساوى الى أربع مجموعات كل مجموعة اشتملت على 10 فأر كالأتى :1) المجموعة الأولى( المجموعة الضابطة) :10 جرزان لم يأخذوا شىء 2) المجموعة الثانية(المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى(نبات+اسماك): 10 جرزان يتم وضع عليقة عادية لمدة 7 ايام ومن اليوم الثامن يتم وضع العليقة المخلوطة وهى عبارة عن 50 جم من بودرة النبات المطحون(معلوم تركيز نسبة السموم الفطرية والتى تم فحصها بالنقطة 1)+ 50 جم من بودرة السمك المطحون (معلوم تركيز نسبة السموم الفطرية والتى تم فحصها بالنقطة 1) + 50 جم من العليقة العادية الخالية من السموم الفطرية وذلك لمدة 4 اسابيع.3) المجموعة الثالثة (المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى+الاسبريولينا): 10 جرزان يتم تجرعهم الاسبيرولينا (500 مليجرام/كجم من وزن الفأر/يوميا) لمدة 35 يوم مع اضافة العليقة العادية لمدة 7 ايام ومن اليوم الثامن من التجربة يتم وضع العليقة المخلوطة حتى نهاية التجربة كما هو موضح بالمجموعة 2 . 4) المجموعة الرابعة (المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى+المورينجا): 10 جرزان يتم تجرعهم المورينجا (350 مليجرام/كجم من وزن الفأر/يوميا) لمدة 35 يوم مع اضافة العليقة العادية لمدة 7 يوم ومن اليوم الثامن من التجربة يتم وضع العليقة المخلوطة حتى نهاية التجربة كما هو موضح بالمجموعة 2 . العينات:أستمرت التجربة لمدة 5 اسابيع وتم الذبح فى نهاية الأسبوع الخامس بعد الصيام طوال فترة الليل وتم اخذ عينات من الانسجة (الكبد) من جميع الجرزان.عينات الأنسجة : تم تجميع أعضاء الكبد من الجرزان وغسلها بمحلول ملح (0.9%) ثم وضعهم فى ورق فويل وحفظت فى الفريزر عند درجة حرارة - 20 درجة مئوية تحت الصفر. وبعد ذلك تم تقسيم الكبد الى 3 اجزاء : الجزء الأول: يزن 0.5 جرام من الكبد وتم طحنة فى محلول فوسفات البوتاسيوم فى وسط بارد وذلك باستخدام جهاز الطحن الكهربى(هموجينايزر) ثم وضعه فى جهاز الطرد المركزى عند سرعة 4000 لفة فى الدقيقة لمدة 15 دقيقة وبعدها جمعت خلاصة الخلايا المطحونة(الرائق) فى أنابيب جافة معقمة ومحكمة الأغلاق بواسطة ماصة جافة ثم حفظها فى درجة حرارة 20˚تحت الصفر واستخدمت لاجراء القياسات الكيميائية الحيوية الأتية : قياس نشاط مضادات الأكسدة الانزيمية مثل الكتاليز ، سوبر أكسيد ديسميوتيز وأيضا قياس المركبات الغير إنزيمية المضادة للأكسدة مثل الجلوتاثايون المختزل وكذلك قياس الأكسدة الفوقية للدهون (تركيز إل-مالون داى ألدهيد).الجزء الثانى: تم أخذ جزء أخر من أنسجة الكبد ووضعها في أنابيب إيبندورف وتم الاحتفاظ بها على الفور في النيتروجين السائل وتخزينها في 80˚ تحت الصفر حتى استخلاص الحمض النووي الريبوزي لقياس التعبير الجيني لكلا من: قياس نسبة عامل تنخر الورم الفا، سيتوكروم بى450 3 ايه 4 ، انترلوكين 1بيتا، عامل النمو المحول بيتا 1 ، العامل النووى كابا بيتا ، قياس تجزئة الحمض النووي دى ان إيه بواسطه تحليل الكوميت الجزء الثالث: بعد 5 أسابيعِ من بداية التجربةَ تم الفحص بالعين المجردة لكشف أى تغيرات طرأت على أنسجه الكبد لجرزان المجموعات. ثم تم فصل جزء صغير من الكبد وتم حفظها فى محلول فورمالين متعادل 10% ، ثم تم تحضير العينات وصبغها بالصبغات الخاصة ووضعها على الشرائح ووضع الغطاء وتثبيته، تم فحصها ميكروسكوبياً وتوصيفها وتصويرها عن طريق متخصص فى علم الهستوباثولوجى.وقد أظهرت النتائج بعد تحليلها إحصائيا الآتي:-المرحلة الاولى: المسح ميدانى لمصادر المياه بمحافظة المنوفية لتواجد السموم الفطرية من 7محطات مختلفة بالمحافظة كالاتى:المنطقة (1):مصرف الخضراوية امام قرية كفور الرمل وتبعد حوالى 500 م من منطقة قويسنا الصناعية-محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (1):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود سموم الافلاتوكسيبن الكلية فى عينات السمك بتركيز عالى 42.14 ppb اما الاوكراتوكسين والفيومنسن بى1 والتى تو توكسين وجدوا اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى .◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (1) : اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (1): اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى، كما ان الافلاتوكسين بى1 وجى 1وجى2 والاوكراتوكسن والتى تو توكسين غير موجودين بالمسح فى هذه المنطقة.المنطقة(2):ترعة الخضراوية امام قرية عرب الرمل –قويسنا محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (2):اظهرت نتائج المسح الميدانى عن وجود سموم الافلاتوكسيبن الكلية فى عينات السمك بتركيز عالى 60 ppb اما الاوكراتوكسين والفيومنسن بى1 والتى تو توكسين وجدوا اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى .◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (2):اظهرت نتائج المسح الميدانى عن وجود سموم الافلاتوكسيبن الكلية فى عينات النبات بزيادة طفيفة 22.4 ppb عن المسموح به اما باقى الانواع وجدوا اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى .◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (2): اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى، كما ان الافلاتوكسين بى1وبى2 وجى2 والفيومنسن بى1 والتى تو توكسين غير موجودين بالمسح فى هذه المنطقة.المنطقة(3):مصرف اسطنها امام قرية شمنديل –قويسنا محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (3):اظهرت نتائج المسح الميدانى عن وجود سموم التى تو توكسين فى عينات السمك بتركيز عالى 73.2 ppb اما باقى الانواع وجدوا اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى .◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (3):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (3):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن عدم وجود الافلاتوكسين بى1وبى2 وجى1وجى2 والاوكراتوكسين والفيومنسن بى1 فى هذه المنطقة.كما ان وجود التى تو توكسين اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى.المنطقة(4):نهر شبين الكوم (الرياح المنوفى) بالقرب من منطقة الجامعات بمدينة شبين الكوم- محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (4):اظهرت نتائج المسح الميدانى عن وجود سموم الافلاتوكسيبن الكلية فى عينات السمك بزيادة طفيفة 29.6 ppb عن المسموح به اما باقى الانواع وجدوا اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى .◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (4):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (4):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن عدم وجود جميع انواع السموم الفطرية هذه المنطقة.المنطقة(5):نهر شبين الكوم (الرياح المنوفى) بالقرب من كوبرى القاصد بمدينة شبين الكوم- محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (5):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (5):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى. بالاضافة الى عدم وجود الافلاتوكسين بى1 وبى2 فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (5):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن عدم وجود جميع انواع السموم الفطرية هذه المنطقة.المنطقة(6):نهر شبين الكوم (الرياح المنوفى) خلف مستشفى المعلمين بمدينة شبين الكوم- محافظة المنوفية. ◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (6):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (6):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى. بالاضافة الى عدم وجود الافلاتوكسين بى1 والاوكراتوكسين فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (6):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن عدم وجود جميع انواع السموم الفطرية هذه المنطقة.المنطقة(7):نهر شبين الكوم (الرياح المنوفى)بالقرب من كوبرى مبارك بمدينة شبين الكوم- محافظة المنوفية.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات السمك بالمنطقة (7):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات النبات بالمنطقة (7):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن وجود مستويات السموم الفطرية اقل من المعدل المسموح به طبقا للجنة دستور الأدوية الأوروبي والصينى. بالاضافة الى عدم وجود الافلاتوكسين بى2 وجى2 والاوكراتوكسين فى هذه المنطقة.◄ مستويات السموم الفطرية فى عينات الماء بالمنطقة (7):اسفرت نتائج المسح الميدانى عن عدم وجود جميع انواع السموم الفطرية هذه المنطقة وقد اسفرت نتائج البحث الميدانى فى كل المناطق السبعة ان المنطقة (1) والمنطقة (2) من اكثر المناطق تلوثا بالسموم الفطرية.ومن ناحية اخرى اظهرت نتائج التحاليل الكيميائية الحيوية والجزيئية بعد تحليلها احصائيا على الاتى:1- تركيز الجلوتاثيون المختزل:أظهرت النتائج وجود نقص معنوي فى تركيز الجلوتاثيون المختزل فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كما اوضحت الدراسة ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت زيادة معنوية فى تركيز الجلوتاثيون المختزل فى انسجة كبد الجرزان عند مقارنتها بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى.2- انزيم السوبر اكسيد ديسميوتيز والكتاليز:أسفرت الدراسة عن وجود نقص غيرمعنوى فى مستوى نشاط إنزيم السوبر اكسيد ديسميوتيز والكتاليز فى أنسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة.كما لوحظ وجود زيادة معنوية فى مستوى نشاط إنزيم السوبر اكسيد ديسميوتيز والكتاليز فى أنسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا والمورينجا عند مقارنتها بالجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما تبين من الدراسة وجود نقص غير معنوى فى مستوى نشاط إنزيم السوبر اكسيد ديسميوتيز فى أنسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا. كما أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى نشاط انزيم الكتاليز فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.3- تركيز أل-مالون داى ألدهيد:أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى تركيز أل-مالون داى ألدهيد فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كما اوضحت الدراسة ان المعالجة بالاسبيرولينا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى تركيز أل-مالون داى ألدهيد فى انسجة كبد الجرزان ليصبح نقص غير معنوى اثناء المعالجة بالمورينجا وذلك مقارنتا بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما أظهرت النتائج وجود نقص غير معنوي فى تركيز أل-مالون داى ألدهيد فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.4- انترلوكين –بيتا 1 :أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى فى انترلوكين -بيتا1 فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة . كما اوضحت الدراسة ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى انترلوكين -بيتا1 فى انسجة كبد الجرزان وذلك مقارنتا بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما أظهرت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى انترلوكين -1بيتا فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.5- عامل تنخر الورم الفا:اسفرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى فى عامل تنخر الورم الفا فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كذلك لوحظ ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى عامل تنخر الورم الفا فى انسجة كبد الجرزان وذلك مقارنتا بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما اوضحت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى عامل تنخر الورم الفا فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.6- العامل النووى كابا بيتا :اسفرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى فى العامل النووى كابا بيتا فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة. كذلك لوحظ ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى العامل النووى كابا بيتا فى انسجة كبد الجرزان وذلك عند مقارنتها بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما اوضحت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى العامل النووى كابا بيتا فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.7- عامل النمو المحول- بيتا 1 :أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى فى عامل النمو المحول- بيتا 1 فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كما اوضحت الدراسة ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى عامل النمو المحول- بيتا 1 فى انسجة كبد الجرزان وذلك عند مقارنتها بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما اسفرت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى عامل النمو المحول- بيتا 1 فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.8- سيتوكروم بى450 3 ايه 4:اسفرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى التعبير الجينى فى سيتوكروم بى 450 3 ايه 4 فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كذلك لوحظ ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى سيتوكروم بى 450 3 ايه 4 فى انسجة كبد الجرزان وذلك عند مقارنتها بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى. كما اوضحت النتائج وجود نقص معنوي فى مستوى التعبير الجينى فى سيتوكروم بى 450 3 ايه 4 فى انسجة كبد جرزان مجموعة الاسبيرولينا عند مقارنتها بمجموعة المورينجا.9 - تحليل كوميت (اختبار المذنبات) لتقدير معدل تلف الحمض النووى دى ان ايه :أظهرت النتائج وجود زيادة معنوية فى مستوى تلف الحمض النووى دى ان ايه فى انسجة كبد الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى عند المقارنة بالمجموعة الضابطة .كما اوضحت الدراسة ان المعالجة بالاسبيرولينا والمورينجا للجرزان المسممة بالتسمم الفطرى احدثت نقص معنوي فى مستوى تلف الحمض النووى دى ان ايه فى انسجة كبد الجرزان وذلك عند مقارنتها بمجموعة الجرزان المحدث بها التسمم الفطرى.ثالثا الفحص الهستوباثولوجى لأنسجة الكبد:المجموعة الأولى :- المجموعة الضابطة الطبيعيةأظهر الفحص المجهرى للكبد في المجموعة الضابطة التركيب النسيجي الطبيعي للكبدالمجموعة الثانية :- (المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى(نبات+اسماك): أظهرالفحص المجهرى لكبد الجرزان التي احدث بها التسمم الفطرى عن طريق الفم لمدة 4 أسابيع تغيرات متعددة في خلايا الكبد البرنشيمية، حيث أظهر الكبد فى منطقة الوريد البابى تكاثر نسيجى للخلايا المبطنة للقناة الصفراوية.وكذلك يمتلك الوعاء الدموي البابي ثخانة في جداره مع خلايا بطانية منتفخة.وشوهدت المنطقة البوابية بكونها شديدة التفتيت وتخترقها خلايا التهابية أحادية النواة.وقد لوحظت خلايا الكبد بوجود بؤر نخرية واستبدالها بخلايا التهابية أحادية النواة.بالاضافة الى ضمور لمعظم الخلايا الكبدية مع الجيوب التجويفية المزدحمة المتوسعة.المجموعة الثالثة (المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى+الاسبريولينا):اظهر الفحص المجهرى ان علاج الجرزان المسممة بالتسمم الفطرى بالاسبيرولينا ادى الى تحسنا ملحوظا فى التغيرات المرضية التى انتجها التسمم الفطرى فى نسيج الكبد حيث أظهر الكبد بعض التوسع في الوريد المركزي مع الجيوب التجويفية الكبدية الأقل توسعًا ، فقد لوحظ ان معظم انسجة الكبد اظهرت درجة عالية من التعافى وكذلك ويمكن رؤية خلايا كبدية مع نويات حويصلية نشطة بالإضافة إلى خلايا كبفر أقل نشاطًاالمجموعة الرابعة (المجموعة المحدث بها التسمم الفطرى+المورينجا): اظهر الفحص المجهرى لكبد الجرزان المسممة بالتسمم الفطرى والمعالجة بالمورينجا ادى الى تحسنا ملحوظ فى التغيرات المرضية التى انتجها التسمم الفطرى فى نسيج الكبد حيث ان الوعاء المركزي ظهر باحتقان طفيف ، وأقل فى الجيوب الكبدية المتوسعة مع المزيد من خلايا الكبد المعافى مع نواة حويصلية نشطة وخلايا كبفر أقل نشاطا.الخلاصةاظهرت الدراسة الميدانية بمصادر المياه المختلفة بنهر النيل بشبين الكوم بمحافظة المنوفية بتواجد السموم الفطرية والتى تتواجد بشكل اكبر بمصادر المياه المختلفة بنهر النيل بمنطقة قويسنا الصناعية والتى تنتقل عن طريق تلوث النبات والاسماك والذى يؤدى الى تلوث بيئى بالنظام المائى ممايؤثر على جميع اجهزة الجسم المختلفة وعلى صحة الحيوان وانتاجيته. كما أظهرت الدراسة التي أجريت على ذكور الجرزان البيضاء المحدث فيها التسمم الفطرى تجريبيا عن حدوث تغيرات واضحة نتيجة لتلف خلايا الكبد وذلك من خلال نقص نشاط الأنزيمات المضادة للأكسدة مثل الجلوتاثيون المختزل بالأضافة الى زيادة فى نشاط إنزيم إنزيم السوبراكسيد ديسميوتيز والكتاليز فى نسيج الكبد . و انعكس ذلك من خلال زيادة فى تحليل كوميت للاستدلال عى مدى تكسير وتلف الحمض النووى دى ان ايه، أل-مالون داى ألدهيد، العامل النووى كابا بى، عامل نخر الورم الفا وانترلوكين-1 فى نسيج الكبد بالأضافة الى دلالأت الألتهابات الناجمة عن التسمم الفطرى مثل عامل النمو التحويلى بيتا وسيتوكروم بى450 فى نسيج الكبد.وقد اوضحت الدراسة ان اعطاء الاسبيرولينا او المورينجا للجرزان المحدث بها التسمم الفطرى تجريبيا سبب نقص معنوى فى تحليل كوميت للاستدلال عى مدى تكسير وتلف الحمض النووى دى ان ايه، أل-مالون داى ألدهيد، العامل النووى كابا بى، عامل نخر الورم الفا وانترلوكين-1 فى نسيج الكبد مصحوبا بنقص معنوى فى دلالأت الألتهابات مثل عامل النمو التحويلى بيتا وسيتوكروم بى450 فى نسيج الكبد . بالاضافة الى زيادة فى نشاط الأنزيمات المضادة للأكسدة مثل الجلوتاثيون المختزل مصحوبا بنقص فى نشاط إنزيم السوبراكسيد ديسميوتيز والكتاليز فى نسيج الكبد .وقد اثبتت الدراسة ان الاسبيرولينا والمورينجا أحدثوا تعديل ايجابى فى الدلالأت الكيميائية الحيوية المختلفة نتيجة لتأثيره الوقائى على خلايا الكبد ضد التسمم الفطرى وإضطرابات التمثيل الغذائي. وكذلك كان للاسبيرولينا والمورينجا دور فعالاً كمضادات للاكسدة من خلال تحسين نشاط الأنزيمات المضادة للأكسدة ومستوى الجلوتاثيون المختزل وتقليل الإجهاد التأكسدى الناجم عن الأكسدة الفوقية للدهون فى خلايا الكبد الناتجة عن التسمم الفطرى. بالاضافة لدورهم فى تحسين بعض المؤشرات البيوكيميائية والجزيئية ويرجع ذلك الى نشاطهم كمضادات للالتهاب ولتكسير الدى ان ايه وللموت الخلوى للخلايا.
وخلصت الدراسة الى أن التسمم الفطرى له تأثير ضار على المكونات الكيميائية الحيوية لأنسجة الكبد وذلك من خلال إضطراب وخلل فى تركيب غشاء الخلية الذي يرجع أساسا إلى تكوين الجذور الحرة التي تهاجم غشاء الخلايا وأن الاسبيرولينا والمورينجا قاموا بالحد من الأثار الضارة والناجمة للتسمم الفطرى المسببة لتلف وتدمير خلايا الكبد وذلك من خلال منع الأكسدة الفوقية للدهون والإجهاد التأكسدى والتقليل من استجابة الألتهابات نتيجة التسمم الفطرى. لذلك ينصح بتناول الاسبيرولينا والمورينجا فى مكونات النظام الغذائى المنتظم وذلك للوقاية من تلف الخلايا التي تنجم عما يسمى الجذور الحرة أو الذرات الطليقة المسببة للعديد من الأمراض الضارة للجسم.