الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 217 |  |  |
| | | from | 217 | | |
Abstract
مرض التسمم الدموى الايروموناسى المتحرك يسببه ميكروب انتهازي وهو الايروموناس بانواعه المختلفة حيث يتميزهذا المرض بمجموعة متنوعة من العلامات المرضية في أسماك المياه العذبة. هذا المرض من الصعب جدا علاجه وليس هناك لقاح متاح ولكن يمكن لبروتينات الغشاء الخارجي أن تكون بمثابة مانع للوقاية من هذا المرض.- تم اجراء هذه الدراسة على اجمالى عدد360 من اسماك المياه العذبة المريضة تشتمل على:240 من البلطى النيلى, 80 من القرموط الافريقى, 40 من البورى, تم تجميعها خلال الفترة من يناير الى ديسمبر 2016 من اماكن مختلفة من الرياح التوفيقى وفروعه (محافظة القليوبية) و مزراع سمكية فى محافظة كفر الشيخ والاسماعيليه.- تم تسجيل اهم العلامات الاكلينيكيه للاسماك المصابة وكانت كالاتى: بقع نزفيه على الجلد مع وجود تقرحات بالإضافة إلى جحوظ فى عين واحدة او العينين ، تاكل فى الزعانف والزيل وانتفاخ فى منطقة البطن اما الصفة التشريحية فكانت احتقان فى الأعضاء الداخلية.- كان إجمالي معدل انتشار السلالات البكتيرية المعزولة (55.27٪) من بين الأنواع وكان62.5 و 45 و32.5 ٪ في البلطى النيلى و القرموط الافريقى والبورى على التوالي وكان موسم الصيف أعلى معدل انتشار في الأسماك التي تم فحصها.-استنادا إلى التوصيف المظهري والكيميائي الحيوي باستخدام API20E ، تم تعريف البكتيريا المعزولة باسم الايرومونادز وانواع من االسيدوموناس وايضا انواع من سيتروباكتر وإنتيروباكتر وسيراتيا و فيبريوا فيليالز.- كل المعزولات البكتيرية المكتشفة تم عزلها من الكلى وعينات الكبد. كانت المعزولات البكتيرية الأكثر انتشارا هي الايرومونادز12) عترة ، 48 ٪) ، من بينها ؛ الايروموناس هيدروفيلا هو النوع السائد (5 عترات ، 20 ٪) ، يليه الايروموناس فيرونى3) عترات ، 12 ٪( ، الايروموناس سوبريا 3) عترات ، 12 ٪) و الايروموناس كافيي1) عترة ، 4 ٪)-التوصيف الجزيئي باستخدام تفاعل البلمرة التسلسلى لتأكيد الايرومونادز التي تم تحديدها كيميائياً باستخدام منطقة rDNA 16S عند bp 900 -اظهرت نتائج اختبار العدوى الصناعية أن من بين 12 سلالة معزولة ، كانت سبع سلالات شديدة الضراوة ، وثلاثة متوسطة الضراوة ، واثنتان كانتا غير ممرضة.- الفحص الهستوباثولوجى للاعضاءالداخلية مثل الكبد، الخياشيم، الطحال، الكلى، الامعاء والعضلات من الاسماك المعدية صناعيا بالسلالات المتنوعة لميكروب الايروموناس حيث وجد اختلافات على حسب ضراوة العترة حيث وجدت انزفة منتشرة بين الخلايا الكبدية مع وجود تفرغ واضح فى السيتوبلازم مع انتشار فى خلايا الدم البيضاء وايضا وجود تنكرز شديد ادى الى اختفاء فى الخلايا الكبديه. اما الخياشيم؛ وجد تنكرز فى الاميلي الثنائيه مع انتشار الانزفة البينيه.وجد ايضا انتشار شديد للانزفة وتحطم فى نسيج الطحال مع تجمع لصبغة الهيموسيدرين. اما عن الامعاء؛ ظهر تآكل فى الخلايا المبطنه لها مع وجود انزفه وظهور الخلايا الالتهابيه وحيدة النواه ثم التغيات التى وجدت فى العضلات فكانت كالاتى: وجود انزفة شديدة بين انسجه العضلات مع وجود اديما فى بعض قطاعات العضلات.- كشف اختبار الحساسيه للمضادات الحيويه ان جميع سلالات الايرومونادزكانت مقاومة لمعظم المضادات الحيوية المستخدمه فى الدراسه وخاصة الامبيسيلين واللينكوميسين بنسبة 100% وكانت حساسة فقط للسلفا واوفلوكزاسيلين.- أظهر تحليل SDS - PAGE للـبروتينات الغشاء الداخلى عدة نطاقات بروتينية (7-22) من أوزان جزيئية مختلفة تتراوح بين 14-346 كيلودالتون وكان النطاق البروتيني المشترك 39 كيلودالتون فى 8 من 12 سلاله من الايرومونادز.- تم عمل علاقه بين شدة الامراضيه الإمراضية ، ونتائج استخدام المضادات الحيوية و عدد نطاقات البروتين ان بينهم ارتباط خاصة في السلالات شديدة الإمراض (AF6).-فى هذه الدراسه، تم استخدام بروتينات الغشاء الخارجى لتطوير الحماية ضد سلالات من الايرومونادزحيث تم فصل بروتينات الغشاء الخارجى عن بروتينات الغشاء الداخلى باستخدام مادة ان لوريل ساركوسين صوديوم.- تم عمل اختبارامان لجرعة بروتينات الغشاء الخارجى وكانت 20ميكروجرام قبل حقنها فى اسماك البلطى حيث ثبت امان جرعة البروتين.-تم تحصين البلطى النيلى باستخدام بروتينات الغشاء الخارجى المحمله على Freundˑ بجرعتين على مدار 51 يوم ثم تم حقن الاسماك المحصنة بلايروموناس هيدروفيلا. اتضح بعد حساب معدل الاعاشه لمدة 4 اسابيع انها وصلت الى 100% فى بعض المجموعات المحصنه.-أظهرت الاختبارات المناعية مثل IgM ، ومضادات الأكسدة ، وأكسيد النيتريك (NO) والتعبير عن IL-1β و TNF α زيادة كبيرة في الأسماك المحصنة بابروتينات الغشاء الداخلى مقارنة مع المجموعة التي تواجه تحديا بالايروموناس هيدروفيلا وبدون تحصين.- تم تطعيم البلطى النيلى باستخدام مصل بروتينات الغشاء الخارجى لمدة 24 ساعة ثم تم حقن الاسماك المحصنة بلايروموناس هيدروفيلا. اتضح بعد حساب معدل الاعاشه لمدة 4 اسابيع انها وصلت الى 100% فى بعض المجموعات المحصنه.- اظهر تعرض اسماك البلطى النيلى المعداه صناعيا بالايروموناس هيدروفيلا باستخدام trimethoprim- sulphamethoxazole حيث اظهرت النتائج انها تعطى معدل اعاشه يصل الى 100% بالمقارنه مع المجموعة المعداه بالايروموناس هيدروفيلا وبدون علاج.-فى النهاية خلص إلى أن OMPs من الايروموناس والتى تم تحديدها كهدف مناسب لتطوير الحماية خاصة في حالة البكتيريا الغير المتجانسة.