الفهرس 
INTRODUCTIONOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 194 |  |  |
| | | from | 194 | | |
Abstract
تضمن الجزء الاول من هذه الدراسة والذي تم إجراؤه تحت ظروف المعمل وعزل البكتريا المتحملة للعناصر الثقيلة (الكادميوم– النحاس – الزنك – الرصاص) وتعريف العزلات الأكثر قدرة على التحمل ثم إختبار كفاءتها كبكتريا منشطة لنمو النبات.
بينما تضمن الجزء الثانى والذي تم إجراؤه تحت ظروف الصوبة وإستخدام البكتريا المعرفة فى إجراء تجربة تطبيقية لإختبار قدرتها على تقليل تأثير العناصر الثقيلة على نبات السورجم وتحسين نموه وزيادة قدرته على تحمل المعادن الثقيلة.
1.الجزء الأول
1.1.عزل البكتريا المتحمله للمعادن الثقيلة
تم عزل 307 عزلة من البكتريا المتحملة للمعادن الثقيلة من أماكن ملوثه بالمعادن الثقيلة وذلك من ثلاث عينات من رواسب مصرف الرهاوى بمحافظة الجيزه (أعلى المصب ومنتصف المصب وأسفل المصب) وكذلك تربه زراعيه من منطقتى الجبل الأصفر وكفرعلوان بمحافظة القليوبية التى تروى بمياه الصرف الصحى. حيث أوضحت نتائج العزل أن 79 عزلة من البكتريا كانت متحملة لعنصرالنحاس ،69 عزله متحملة لعنصر الكادميوم ،71عزله متحملة لعنصر الزنك و88 عزله متحملة لعنصر الرصاص.
2.1. إختبار تقدير أقل تركيز مثبط وأعلى تركيز لتحمل البكتريا لتركيزات مختلفه من المعادن الثقيلة
تم تقييم قدرة العزلات البكتريه على مقاومة تركيزات مختلفه من المعادن الثقيلة وتحديد أقل تركيز مثبط للنمو وأعلى تركيز تحملته البكتريا ، وأوضحت النتائج المتحصل عليها أن عزلتان فقط من البكتريا المتحملة لعنصر النحاس كانتا أكثر العزلات تحملا وهما GS270,GS271 وكان أقل تركيز مثبط لنمو البكتيريا هو 3000ملجم/لتر وأن أعلى تركيز تحملته البكتريا من عنصر النحاس كان 2500 ملجم /لترأما بخصوص البكتريا المتحملة لعنصرالكادميوم فوجد أن هناك3 عزلات MR99, MR100, MR108 كانت أكثر العزلات تحملا وأن أقصى تركيز تحملته هو 2000 ملجم/لتر ولكن تم تثبيط نموهم عند تركيز 2500 ملجم/لتر.كذلك أوضحت النتائج أن أكثر العزلات تحملا لعنصر الزنك هى العزلةUR45 حيث كان تركيز4500 ملجم/لتر هو أقل تركيز مثبط لها بينما أعلى تركيز من عنصر الزنك تحملته هذه العزلة كان 4000 ملجم/لتر. في حين أن عزلتان فقط هما UR63, MR171 كانتا اكثر العزلات تحملا لعنصر الرصاص عند تركيز 3000ملجم/لتر وتم تثبيطهم عند تركيز 3500 ملجم /لتر.
3.1. إختبار كفاءة العزلات البكترية الأكثر تحملا للمعادن الثقيلة
من التجربه السابقه تم الحصول على 8 عزلات تم إختيارهم كأكثر العزلات تحملا للعناصر الثقيلة وتم إختبار كل عزلة من حيث قدرتها على تحمل تركيزات مختلفه من المعادن الثقيلة (الكادميوم – النحاس – الزنك –الرصاص). ووجد أن عزلتان فقط هما MR99, MR108 من العزلات المتحمله لعنصر الكادميوم وعزله واحده من عنصر الزنك هوUR45 كانت لهم القدره على تحمل الأربع معادن محل الدراسة تحت التركيزات المختلفة لذلك تم إختيار هذه الثلاث عزلات لتعريفها وتكملة الدراسة عليها.
4.1. تعريف العزلات الأكثر تحملا للمعادن الثقيلة
وتم تعريف أكثر العزلات تحملا للمعادن الثقيلة وعمل اختبارات مورفولوجية وبيوكيمائية للعزلات ووجد أن العزلة UR45هى Alcaligenes faecalis بنسبة تشابة تصل إلى 99 % وأن العزلة 99MR هى Bacillus cereus بنسبة تشابة 99% وأن العزله MR108هى Alcaligenes faecalis بنسبة تشابة 96% بواسطة التتابع الجينى S rRNA16 مع السلالات المعرفة وتم تسجيلهما فى بنك الجينات والحصول على ترقيم دولى لهذة العزلات.
5.1. تأثيرال pH على الإمتصاص الحيوى بواسطة السلالات البكتيرية المعرفة
تم إجراء هذه التجربة فى وجود الأربع معادن ال البكتريا ثقيلة محل الدراسة (Cu, Cd, (Zn, Pb تحت قيم pH مختلفة (5،6،7،8،9) على تركيز 1000 ملجم/لتر من المعادن المذكورة، وسجلت النتائج أعلى كفاءة للإمتصاص الحيوى والتي كانت عند رقم pH=7 مقارنة بدرجات ال pHالأخرى بواسطة السلالة Al. faecalis MG257493.1 حيث كانت كفاءة الأمتصاص الحيوى 79% لعنصرالنحاس 84,9% لعنصرالكادميوم و70% لعنصر الزنك 80 % لعنصر الرصاص أما كفاءة الإمتصاص الحيوى للسلالة B. cereus MG257494.1 كانت82 % لعنصر النحاس ، 76% لعنصر الكادميوم 69% لعنصر الزنك 80% لعنصرالرصاص أيضا ولكن بالنسبة لكفاءة الإمتصاص الحيوى للسلالة 1 Al. faecalis MG966440.كان أعلى عند قيم pH=7 حيث كان77% لعنصرالنحاس،88,5% لعنصرالكادميوم75% لعنصر الزنك و77%لعنصر الرصاص.
6.1. كفاءة البكتريا المتحملة للمعادن الثقيلة
6.1.1. تقدير كفاءتها كمضادات أكسدة
تم تقدير نشاط مضادات الأكسدة للثلاث سلالات المعرفه تحت تركيزين من العناصر الثقيلة المختلفة (1000،1500 ملجم/لتر) وأستخدمت العناصر إما فرديا أو فى مخلوط وسجلت النتائج فيما يتعلق بنشاط مضادات الأكسدة غير الإنزيميه أن أعلى تثبيط لDPPH بواسطة راشح السلالة البكتريةAl. faecalis MG257493.1 غير المدعم بأى عناصر ثقيلة كان عند تركيز 1500 ملجم/لتر لعنصر الرصاص وعند تركيز1500ملجم/لتر للكادميوم أما بالنسبة للنشاط الإنزيمى لنفس السلالة فقد أوضحت النتائج أن نشاط إنزيم الكتاليز قد زاد بزيادة التركيز سواء فى الراشح المحتوى على العنصر بمفردة أو فى مخلوط بينما كان إنزيم البيروكسيديز والبولى فينول أوكسديز أعلى فى الراشح المضاف له تركيز 1000ملجم /لتر.
وبخصوص تقدير نشاط مضادات الأكسدة غير الإنزيميه بواسطة راشح بكتريا B. cereus MG257494.1فقد أوضحت النتائج أن أعلى تثبيط لDPPH كان فى الراشح المضاف له الرصاص بتركيز 1500 ملجم/لتر. أما بالنسبه لنشاط الإنزيمات بواسطة نفس السلاله فسجلت أعلى قيمة لكل الإنزيمات المقدره فى الراشح المحتوى على عنصر النحاس عند تركيز1500ملجم/لتر عنصرالكادميوم عند تركيز1000ملجم/لتر. أما فى الراشح المحتوى على الخليط من المعادن فكان النشاط الإنزيمى لكلا من الكتاليز وللبولى فينول أوكسديز أعلى عند تركيز1500ملجم/لتر عن تركيز1000ملجم/لتر.
بينما أوضحت النتائج المتحصل عليها بواسطة السلالة البكترية Al. faecalis MG966440.1 أن تثبيط DPPH يقل بزيادة تركيزات المعادن الثقيلة وأن نشاط إنزيم الكتاليز أعلى عند تركيز 1000 ملجم/لتر من النحاس وخليط من العناصر الثقيلة ولوحظ أيضا أن أعلى قيمة لإنزيم البولى فينول أوكسيديز سجلت فى الراشح المحتوى على عنصر النحاس مقارنة بباقى العناصر الثقيلة المستخدمة وكان إنزيم البيروكسيديز يقل بزيادة تركيزات العناصر الثقيلة وكان ذلك فى الراشح المحتوى على أى من النحاس أوالكادميوم أوالزنك أوخليط منهم. بينما كان تثبيطDPPH للخليط من الثلاث سلالات كان أعلى عند تركيز 1500ملجم/لترعن تركيز 1000ملجم/لتر وكذلك إنزيمى البيروكسيديز والبولى فينول أوكسديز بينما إنزيم الكتاليز كان أعلى عند تركيز 1000ملجم/لتر عن تركيز1500 ملجم/لتر.
6.1.2.إ نتاج منظمات النمو النباتية
أوضحت النتائج المتحصل عليها أن إنتاج الإندول بواسطة السلاله البكترية faecalis MG257493.1. Al قد قل بزيادة تركيز العناصر الثقيلة وسجلت أقل كميه منتجه فى البيئة المحتوية على خليط من المعادن الثقيلة عند تركيز 1500ملجم/لتر.
وبخصوص إنتاج الإندول بواسطة السلالة B. cereus MG257494.1 أوضحت النتائج أن وجود المعادن فرديا او فى صورة مخلوط كان له تأثير على إنتاج الإندول وسجلت أعلى نتيجة فى الراشح غير المضاف له أى عناصر ثقيله. أما بخصوص إنتاج الإندول بواسطة السلاله Al. faecalis MG966440.1 فقد سجلت أعلى كمية منتجة فى الراشح المضاف له خليط من العناصر وأقل كمية فى الراشح المضاف له عنصر الزنك بتركيزى 1000،1500ملجم /لتر.
سجلت النتائج أعلى كمية من الجبريللين المنتج بواسطة السلالة البكترية Al. faecalis MG257493.1 فى الراشح المحتوى على عنصر الرصاص بتركيز 1000 ملجم/لتر بينما أقل كمية سجلت فى الراشح المضاف له خليط من العناصر بتركيزى 1000،1500 ملجم/لتر وعند نفس التركيزين لعنصر النحاس. بينما إنتاج الجبريللين بواسطةالسلاله 1.B. cereus MG257494 فقد أوضحت النتائج أن إنتاج الجبريللين يقل بزيادة تركيزات العناصر الثقيلة ما عدا عنصر الرصاص أما بالنسبه للسلالة Al. faecalis MG966440.1 فقد أنتجت أعلى كمية من الجبريلين عند كلا من تركيزى عنصر النحاس مقارنة بباقى العناصر بينما سجلت فى الراشح المحتوى على عنصر الزنك بكلا تركيزيه مقارنة بباقى العناصر.