الفهرس 
INTRODUCTIONOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 231 |  |  |
| | | from | 231 | | |
Abstract
يعتبر سرطان الكبد ثالث الأسباب المؤدية للوفاة بسبب السرطان في العالم، وهو سادس أكثر أنواع السرطانات انتشاراً.ولقد أعلنت منظمة الصحة العالمية أن سرطان الكبد سيصل ذروته خلال 10 سنوات حيث تشير الإحصائيات أن هناك 600 ألف مريض بسرطان الكبد يتوفى سنويا فى العالم ,منهم 11 ألف مريض يتوفى بسرطان الكبد فى مصر. يحدث سرطان الكبد عادة فى حالات الكبد المتليف ولكن هناك عوامل تساهم في إحداث هذا المرض وأهمها فيروسات الكبد بى وسى وداء الكبد الكحولى ومرض الكبد الدهنى الغير كحولى.ونظرا للاثار الجانبيه للعلاج الكيمائى والإشعاعى فى علاج السرطانات فكانت الحاجة لاتجاه الباحثين لإيجاد بدائل لمثل هذه العلاجات كالمركبات النانونية التى لها القدرة على اكتشاف السرطان في مراحله المبكرة و تحديد مكانه داخل الجسم وتوصيل الأدوية المضادة للسرطان على وجه التحديد إلى الخلايا الخبيثة دون الاضرار بالخلايا السليمه.كما تجتاح العالم في الآونة الأخيرة موجة تطالب بالعودة للطبيعة سواء في الغذاء أو الدواء و تستهدف حتى أسلوب المعيشة و الحياة، ويعتبر التداوي بالأعشاب الطبية على قمة قائمة هذه التطلعات، لأن القدرة الشفائية لها معروفة منذ ألاف السنين وما زالت هذه القدرة ظاهرة حتي اليوم.ومن هنا جاءت فكرة هذه الرسالة لتطوير علاجات السرطان الكيميائية ، وأيضا لمعرفة مدى كفاءة الدمج بين المركبات النانونية الحديثة و مضادات الأكسدة الطبيعية كمضادات لسرطان الكبد المحدث تجريبياً في الفئران باستخدام مادة ثنائى ايثيل نيتروز أمين، تلك المادة عالية السُمية.وقد وقع الاختيار في تلك الرسالة على استخدام جزيئات أكسيد الزنك النانونية و الثوم ومادة ذات نشاط سطحى كاتيونى وهى بالسيتيل ترايميثل بروميد الأمونيوم لدراسة تأثيرهم الوقائي والعلاجى على مرض سرطان الكبد المحدث في الفئران باستخدام مادة ثنائى ايثيل نيتروز أمين ، حيث تشير العديد من الأبحاث الحديثة إلى أن استخدام الطب البديل مع تكنولوجيا النانو الحديث لهما تأثير وقائي فعال للكثير من الأمراض مع تقليل بنسبة كبيرة للأعراض الجانبية المصاحبة لمعظم أنواع العلاجات التقليدية.تقدير فاعلية مركب النانو التركيبي (الثوم + CTAB+ جزيئات الزنك النانونية ) كمضاد للسرطان على خلايا سرطانية متعايشة خارج جسم الكائن الحى على خلايا سرطانية فى الكبد (HepG-2) IC 50 :مركب النانو التركيبي وهو عبارة عن (الثوم + CTAB+ جزيئات الزنك النانونية ).وقد أثبتت النتائج ان المركب له أثار عاليه السمية على الخلايا الكبديه السرطانية(HepG-2) ولذلك سوف يتم تجربته على سرطان الكبد المحدث تجريبيا بالفئران باستخدام مادة ثنائى ايثيل نيتروز أمين وذلك لمعرفه تاثيره ومدى فاعليته.تحديد الجرعة الحادة LD 50 :بدراسة الجرعة الحادة المميتة :المركب النانو التركيبى وهو عبارة عن ( الثوم + CTAB+جزيئات الزنك النانونية ) بجرعات مختلفة كالأتى 250و500و750و1000و1250و1500مللى جرام/كيلو جرام من وزن الفأر والتى أدت إلى نسبة وفيات كالأتى 0و1و4و6و8و10 على 60من زكور الجرذان السويسرية البيضاء حيث الجرعة التى تقتل نصف الجرذان هى الجرعة النصف مميتة وهى التى يتم البداية بها ولكن يأخذ 1/30 من هذه الجرعة كجرعة وقائية .تعيين فاعلية المركبات داخل جسم الكائن الحى:وقد أجريت هذه الدراسة على عدد 90 من ذكور الفئران البيضاء وأعمارها أربعة أسابيع وأوزانها بين 100±10 جرام ، تم احضار هذه الفئران من مركز بحوث حيوانات التجارب بكلية الطب البيطرى/جامعة بنها.وقد تم وضع هذه الفئران فى أقفاص معدنية منفصلة بحجرة خاصة لرعاية حيوانات التجارب بقسم الكيمياء الحيوية بالكلية ، وزودت بالمياه العذبة النقية وأبقيت الفئران على ظروف بيئية وغذائية ثابتة طوال أربعة عشر يوماً للتأقلم على الظروف الجديدة قبل بداية التجربة .الجرعات وطرق المعالجة المختلفة :جرعت الفئران بمادة ثنائى ايثيل نيتروزامين بجرعة 20 مللى جرام/ لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح خمس مرات فى الاسبوع لمده ست اسابيع.تجريع عقار النانو التركيبى بجرعة 30 مللى جرام / لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح كل يوم لمده اربع اسابيع حتى نهاية التجربة(عشره اسابيع).حقنت مادة الديكسوروبسين بجرعة 33 مللى جرام / لكل كيلو جرام من وزن الفئران فى الغشاء البرتونى مذابة فى محلول مرة واحدة كل إسبوع لمدة أربعة أسابيع بعد ظهور سرطان الكبد المحدث تجريبيا فى الفئران.تم تقسيم الفئران إلي سته مجموعات على النحو التالى:•المجموعة الأولى (المجموعة الضابطة): اشتملت على 15 فأراً ولم تعطى أية أدوية واستخدمت كمجموعة ضابطة طبيعية للمجموعات الأخرى.المجموعة الثانيه (مجموعة مركب النانو التركيبي الطبيعية): اشتملت على 15 فأراً تم تجريع الفئران بمركب النانو التركيبي يوميا عن طريق الفم بدءًا من الأسبوع الاول وحتى نهاية التجربة بجرعة مقدارها (30 مللى جرام/ كيلوجرام) لمده 10 اسابيع.•المجموعة الثالثه( المجموعة المحدث بها مرض سرطان الكبد): تكونت من15 فأراً جرعت مادة ثنائى ايثيل نيتروزامين بجرعة 20 مللى جرام/ لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح خمس مرات فى الاسبوع لمده ست اسابيع لإحداث سرطان الكبد.•المجموعة الرابعه (المجموعة الوقائية باستخدام مركب النانو التركيبي): اشتملت على 15 فأراً تم تجريعهم يوميا بالمركب النانو التركيبي عن طريق الفم بجرعة مقدراها (30 مللى جرام/ كيلوجرام) يوميا لمده اربعه اسابيع ثم تم تجريعهم بثنائى إيثيل نيتروز أمين بجرعة 20 مللى جرام/ لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح خمس مرات فى الاسبوع لمده ست اسابيع لإحداث سرطان الكبد.•المجموعة الخامسه (المجموعة العلاجية باستخدام مركب النانو التركيبي): اشتملت على 15 فأراً تم تجريعهم بثنائى إيثيل نيتروز أمين بجرعة 20 مللى جرام/ لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح خمس مرات فى الاسبوع لمده ست اسابيع لإحداث سرطان الكبد ثم تم تجريعهم يوميا بالمركب النانو التركيبي عن طريق الفم بجرعة مقدراها (30 مللى جرام/ كيلوجرام) يوميا لمده اربعه اسابيع.•المجموعة السادسه (المجموعة العلاجية باستخدام الديكسوروبيسين): اشتملت على 15 فأراً تم تجريعهم بثنائى إيثيل نيتروز أمين بجرعة 20 مللى جرام/ لكل كيلو جرام مذابة فى محلول ملح خمس مرات فى الاسبوع لمده ست اسابيع لإحداث سرطان الكبد ثم تم حقنهم حقنة واحدة كل إسبوع لمدة 4 أسابيع بجرعة مقدراها (30مللى جرام/ كيلوجرام) لمدة 4 اسابيع من حدوث مرض سرطان الكبد المحدث تجريبيا في الفئران .•وتم الحصول على عينات الدم والأنسجة بعد 10 أسبوع من بداية التجربة.وقد أظهرت النتائج بعد تحليلها إحصائيا مايلى:-نشاط انزيم الكتاليز و السوبر اكسيد ديسميوتيزو الجلوتاثيون بيروكسيديز الجلوتاثيون إس ترانسفيريز و تركيز الجلوتاثيون المختزل في الكبد:وجود نقص معنوى في نشاط الكتاليز و السوبراكسيد ديسميوتيزو الجلوتاثيون بيروكسيديز و الجلوتاثيون إس ترانسفيريز و تركيز الجلوتاثيون المختزل في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود زيادة معنويه فى نشاط السوبر اكسيد ديسميوتيزو الجلوتاثيون بيروكسيديز و الجلوتاثيون إس ترانسفيريز و تركيز الجلوتاثيون المختزل في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة)مستوي الشوارد الحرة (تركيز إل- مالون داى ألدهيد) و معدل أكسيد النيتريك في الكبد:وجود زيادة معنوية في نشاط الأكسدة الفوقية للدهون (تركيز إل- مالون داى ألدهيد) ونقص معنوي فى معدل أكسيد النيتريك في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود نقص معنوى فى الأكسدة الفوقية للدهون (تركيز إل- مالون داى ألدهيد) و زيادة معنوية فى معدل أكسيد النيتريك في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة)معدل ألانين أمينوترانسفيريز و الأسبرتات أمينوترانسفيريزو الفوسفاتيز القلوي و الجاما جلوتاميل ترانسفيريز في السيرم:وجود زيادة معنوية في نشاط ألانين أمينوترانسفيريز و الأسبرتات أمينوترانسفيريز و الفوسفاتيز القلوي و الجاما جلوتاميل ترانسفيريز في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود نقص معنوى فى معدل ألانين أمينوترانسفيريز و الأسبرتات أمينوترانسفيريز و الفوسفاتيز القلوي و الجاما جلوتاميل ترانسفيريز في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).-تركيز البروتين الكلى و الالبيومين و البيليروبين الكلي في السيرم:وجود نقص معنوى فى تركيز البروتين الكلى والالبيومين و زيادة معنوية فى تركيز البيليروبين في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌا عن المجموعة الظابطة.وجود زيادة معنوية فى تركيز البروتين الكلى و الالبيومين و نقص معنوى فى تركيز البيليروبين في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).معدل ألفا فيتو بروتين في السيرم:وجود زيادة معنوية في معدل ألفا فيتو بروتين في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود نقص معنوى فى معدل ألفا فيتو بروتين في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).تأثير دورة إنقسام الخلايا :بتحليل دورة إنقسام الخلية في خلايا الكبد أظهرت النتائج الآتي:وجود زيادة معنوية فى المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌافي الطور G0% ونقص معنوى فى طور S phase.وجود نقص معنوى فى المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌا في الطور G0% وفى طور S phase وأيضا زيادة معنوية فى الأطوار الأتية Sub G apoptosis ,G2Mعن المجموعة المحدث بها سرطان الكبد تجريبياٌ فى الفئران (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).نشاط بروتين الكسباس- 3 و مستوى بروتين بى سى إل-2 في الكبد:وجود نقص معنوي فى نشاط الكسباس-3 و زيادة معنويه فى مستوى بروتين بى سى إل-2 في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌا عن المجموعة الظابطة.وجود زيادة معنويه فى نشاط الكسباس-3 و نقص معنوي فى مستوى بروتين بى سى إل-2 فى المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد و المحدث بها سرطان الكبد تجريبياٌ فى الفئران (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).نسبة تجزئة الحمض النووي دي إن إيه في الكبد:وجود زيادة معنويه فى نسبة تجزئة الحمض النووي دي إن إيه في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود زيادة معنويه فى نسبة تجزئة الحمض النووي دي إن إيه فى المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد و المحدث بها سرطان الكبد تجريبياٌ فى الفئران (الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).مستوي بروتين عامل النمو المحول- بيتا 1في الكبد:وجود زيادة معنوية في مستوي بروتين عامل النمو المحول- بيتا 1 في المجموعه المحدث بها مرض سرطان الكبد تجريبيٌاعن المجموعة الظابطة.وجود نقص معنوى فى مستوي بروتين عامل النمو المحول- بيتا 1 في المجموعات الوقائية والعلاجية بمركب النانو التركيبى الجديد والمحدث بها مرض سرطان الكبد(الضابطة للمرض) وذلك بعد 10 إسبوع ( نهاية التجربة).ثالثاً: نتائج التحليل الهستوباثولوجى لأنسجة الكبد:لقد اعتبرت نتائج الفحص الهستوباثولوجى مؤكدة ومتماشية مع نتائج التحليل البيوكيميائى.الخلاصــة:مما سبق أوضحت النتائج أن مادة ثنائى ايثيل نيتروز امين أنها مادة مسببة لسرطان الكبد في ذزكور الفئران وكان لها تأثير مدمر على خلايا الكبد وتغيير معنوى في جميع القياسات الكيميائية والجزيئية في عينات الدم وأنسجة الكبد للفئران المحدث بها سرطان الكبد تجريبياٌ حيث اتضح حدوث زيادة معنويه في الطور G0 أثناء دورة إنقسام الخلية , فى نسبه تجزئة الحمض النووي دي إن إيه , مستوي بروتين بى سى إل-2, مستوي بروتين ترانسفورمينج جروس فكتور- بيتا 1, نشاط ألانين أمينوترانسفيريز, نشاط الأسبرتات أمينوترانسفيريز, نشاط الفوسفاتيز القلوي , نشاط الجاما جلوتاميل ترانسفيريز, معدل ألفا فيتو بروتين , تركيز البيليروبين الكلي , ,مستوي الشوارد الحرة (تركيز إل- مالون داى ألدهيد) وكذلك حدث نقص معنوى في طورS phase أثناء إنقسام الخلية , نشاط بروتين الكسباس-3, معدل أكسيد النيتريك و كذلك فى نشاط جميع مضادة الأكسدة الإنزيمية والغير إنزيمية فى أنسجة الكبد.كما أوضحت الدراسة أننا قد قمنا بتكوين مركب جديد عبارة عن مادة CTAB ذات نشاط سطحى مضاد للاورام و الثوم ومركب الزنك المتناهي في الصغر وقد أثبتنا أن هذا المركب له نشاط مضاد لسرطان الكبد المحدث تجريبيا باستخدام ثنائى ايثيل نيتروز امين وأدي إستخدامهما إلى الحفاظ على نسب القياسات البيوكميائية فى الأنسجة و مصل الدم لما يقارب النسب الطبيعية ويرجع ذلك إلى نشاط جزيئات الزنك النانونية والثوم المضاد للأكسدة وكذلك النشاط السطحى لمركب CTAB الكاتيونى.لذلك توصى الدراسة بضرورة استغلال تلك المزايا الهائلة لمركب , CTABجزيئات الزنك النانونية و الثوم كمواد طبيعية وقائية مضادة للأكسدة و إدخالهما كمواد فعالة فى صناعة العقاقير الطبية المستخدمة فى وقاية وعلاج مرض سرطان الكبد.