الفهرس 
ReviewOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 170 |  |  |
| | | from | 170 | | |
Abstract
البارا- نيتروفينول من المركبات العضويه الثابته الذى يعتبر ليس فقط احد جزيئات عوادم الديزل و الناتج الرئيسى لعملية الايض لبعض المركبات الفسفوريه العضويه ولكنه يعتبرايضا ماده كيميائيه وسيطه تستخدم في تصنيع الادويه،والأصباغ، والفطريات.زيادة تراكم البارا-نيتروفينول في الانسان والماشية والحيوانات البرية لها اثار ضاره على الصحه مثل اضطراب الغدد الصماء وكذلك الآثار السلبية على الجهاز التناسلي للذكور والإناث، والدورة الدمويةهذه الدراسه تمت فى الفتره ما بين اكتوبر ٢٠١٤- سبتمبر ٢٠١٥ فى معامل للفسيولوجيا والبيوتكنولوجى بجامعة طوكيو للزراعه والتكنولوجيا باليابان وذلك بالتعاون العلمى من خلال برنامج تبادلى قصير الاجل فى العلوم والهندسه بدعم من الحكومه اليابانيه. ويهدف هذا العمل إلى توضيح آثار بارا-نيتروفينول على خصوبة الأبقار باستخدام الدراسات المعمليه مع التركيز بشكل خاص على نضوج البويضة وتطور الجنين.-أجريت تجربتان خلال هذا العمل البحثي:التجربه الاولى:دراسة تاثير بالبارا-نيتروفينول على نضج بويضات الابقار معمليا.وقد تم اختيار البويضات ذات سائل سيتوبلازمى متجانس ويحيط بها لا يقل عن ثلاث طبقات من الخلايا الراكميه تم سحبها من الجريبات البويضيه الصغيره التى يتراوح قطرها من (٢-٦) مليمترات للنضج معمليا.وقد تمت عملية الانماء فى بيئة نمو الانسجه 199 تحتوى على التراكيز المختلفه من بارا-نيتروفينول عند درجة حرارة 38-38.5 درجه مئويه فى وسط رطب يتكون من ٥% ثانى اكسيد الكربون . بعد مرور ٢٢ ساعه من التحضين , تم تقييم النضج السيتوبلازمى والنووى للبويضات والتغيرات الجينيه HAS2,StAR، TNFAIP6، PTGS2، CYP11A1فى الخلايا الركاميه وكذلك معدل افراز الهرمونات فى بيئة الانماء.بعد تقييم التمدد الكلي للخلايا الركاميه تم ازالتها باستخدام Mouth piece pipette صبغ البويضات بصبغة هوكست ٣٣٢٤ وتقييمها وفقا للتطور الاستوائى الثانى الى بويضات غير ناضجه وبويضات ناضجه.وتم تقييم النضج السيتوبلازمى للبويضات بمساعدة درجة تمدد الخلايا الركاميه وتصنيفها الى G0, G1, G2, and G3 وقد لوحظ ان نسبة عاليه من التمدد الطفيف للخلايا الركاميه G1ظهرت فى اعلى تركيزات بارا نيتروفينول(١٠-٤, ١٠-5) مول مقارنة بمجموعة الكنترول,وبجانب ذلك فإن الجرعة العالية جداً من البارانيتروفينول (١٠ -٤ مول ) مرتبطة بمعدلات عالية من درجة G2 )٦٨ .٦٢ %) ومعدلات قليلة من درجة (G3) )٦٨ .12 %) مقارنة بالمجموعات الأخري من تركيزات بارنيتروفينول ومجموعة الكنترول. التعرض للتركيز الأعلي من بارانيتروفينول( 10-4 ) مول في بيئة الانماء تعكس التأثير التحفيزي للأمفريجيولين علي مؤشر توسع الخلايا الركامية مقارنة بالمجموعه الضابطه التى تحتوى على الامفريجيولين. حيث انه وجد بالتحليل الاحصائى بين المجموعه الضابطه التى تحتوى على الامفريجيولين والمجموعه البلانك التى لاتحتوى على الامفريجيولين ان الامفريجيولين يؤثر تاثيرا معنويا بزيادة مؤشر تمدد الخلايا الركاميه (p<0.0001).وقد أظهرت النتائج المتعلقة بتأثير تعرض البويضات في بيئة الانماء للامفريجيولين علي التغيير الجيني للجينات المرتبطة بالتوسع في الخلايا الركامية وكذلك الجينات الحساسة لإنتاج السيترويد (HAS2 , TNFAIP6, PTGS2, CYP11A1.StAR) أنه يوجد تأثير معنوي للتعبير الجيني لجينات (HAS2 , TNFAIP6) وكذلك زياده فى التعبير الجينى الجينى للجينات الاخرى ولكن ليس تغييرا معنويا بين المجموعه الضابطه التى تحتوى على مادة الامفريجيولين والمجموعه البلانك التى لا تحتوى على الامفريجيولين مما يثبت التاثير التحفيزى لمادة الامفريجيولين على تمدد الخلايا. وفى نفس الوقت أظهرت النتائج المتعلقة بتأثير تعرض البويضات في بيئة الانماء لمادة البارانيتروفينول بانها تؤثر تاثيرا معنويا (p<0.05)على التعبير الجينى لجينات(TNFAIP6, CYP11A1 and PTGS2) بشكل متتابع لتغير الجرعات في الخلايا الركامية المعالجة بالبارانيتروفينول والمجموعة الضابطة( الكنترول ) ممايفسر التاثير التثبيطى للبارانيتروفينول على الامفريجيولين.وقد تبين من خلال هذه التجربة أن البارانيتروفينول عند التركيز (10-4 ) يزيد من معدل افراز هرمون البروجيسترون فى المجموعه الضابطه التى تحتوى على الامفريجيولين والمجموعه التى لاتحتوى على الامفريجيولين ومع ذلك لايوجد فرق معنوى (p=0.20) (P4) . وقد تبين ايضا ان المجموعه الضابطه التى تحتوى على الامفريجيولين تزيد من معدل افراز هرمون البروستاجلاندين (PGE2) مقارنة بالمجموعة التى لاتحتوى على الامفريجيولين (1503±7.76) مقابل (12.19 ± 7.04) بيكروجرام / مل ، ولكنه لايؤثر على معدل إفراز هرمون البروستاجلاندين بين المجموعات المعالجة بالبارانيتوفينول والمجموعة الضابطة (15.14 ± 8.06) و (15.03± 7.76) بيكروجرام / مل علي التوالي .
وقد تبين من هذه التجربة أنه لا يوجد تأثير معنوي للباراثتروفينول علي معدل الانضاج النووي لبويضات الأبقار بين المجموعات المعالجة با البارابثتروفينول والمجموعة الضابطة، علي الرغم من زيادة (GVBD) )المرحلة غير الناضجة وإنجفاض (MII) المرحلة الناضجة في التركيز العادي جدا من الباراتيتروفيونول التجربة الثانية : دراسة تأثير إضافة البارانيتروفينول في بيئة إنماء البيوضات مقابل إضافته في بيئة زراعة الأجنة علي الجنين بعد الإخصاب، تم غسل البيوضات وإزالة الخلايا الركامية، وزراعتها في بيئة زراعة الأجنة وتحضينها في حضانة متعددة الغازات. وتم تقييم نسبة إنقسام وكذلك معدل إنتاج البلاستيولا في اليومين الثاني والسابع علي التوالي من عملية الزراعة .وقد تم صباغة البلاستيولا بإستخدام يوديد البروباديم والهوكست3342 لتحديد العدد الكلي للخلايا وكذلك نسبة كتلة الخلايا الداخلية وخلايا الأديم الظاهر الغازي.-وقد وجد أن البارانيتروفينول يؤثر تأثير واضح علي معدل إنقسام حيث أنه يقلل معدل إنقسام الأجنة التي تعرضت في بيئة زراعة الأجنة عن الذين تعرضوا له في بيئة النضج.-وقد إنخفض إجمالي عدد الخلايا في البلاستيولا التي تعرضت للبارانيتروفينول في بيئة إنضاج البيوضات وخاصة الجرعات المتوسطة والعالية. ولكن البلاستيولا التي تعرضت للبارانيتروفينول في بيئة الزراعة مرتبطة بعدد إجمالي خلايا أقل، وخاصة مع الجرعة العالية هناك زيادة كبيرة في إجمالي عدد خلايا الجنين الذي تعرض للبارانيتروفينول في بيئة الزرع عن الذين يتعرضون خلال بيئة الإنماء .-هناك زيادة كبيرة في كتلة الخلايا الداخلية خاصة في الجرعات المتوسطة والعالية من البارانيتروفينول في بيئة زراعة الأجنة عن الذين تعرضوا في بيئة الإنماء -هناك أيضاً زيادة في عدد خلايا الأيم الظاهر الغاذي تعرضت للجرعات المنخفضة، والمتوسطة وكذلك العالية من البارانيتروفينول في بيئة زراعة الأجنة عن أولئك الذين تعرضوا لنفس التركيز في بيئة الإنماء.الخلاصة:1.البارانيتروفينول في الجرعة العالية جدا (10-4 مول) أدي إلي إنخفاض ملحوظ بالنسبة لتعدد الخلايا الركامية عند مقارنتها بالمجموعة الضابطة بجانب أنه يثبط التأثير التحفيزي للأمفريجيولين علي مؤشر تعدد الخلايا.2.البارانيتروفينول أدي إلي إنخفاض ملحوظ لجين (TNFAIP6, CYP11A1 and PTGS2)
3.البارانيتروفينول يؤثر على تركيز البروجيستيرون وليس البروستجلاندين هرمون في بيئة الانماء 4.البارانيتروفينول لا يوجد له أي تأثير سلبي علي النضوج النووي للبيوضات. 5.البارانيتروفينول أدي إلي إنخفاض معدل الإنقسام إنخفاضا ملحوظا ولكنه لم يؤثر علي معدل البلاستيولا مقارنة مع الذين تعرضوا له في بيئة الانماء 6.البارانيتروفينول يؤثر تأثيراً ملحوظاً علي عدد الخلايا الكلي ، كتلة الخلايا الدااخلية ، وأيضاً خلايا الأديم الظاهر الغاذي بالمقارنة مع الذين تعرضوا لنفس التركيزات في بيئة الانماء.