![]() | Only 14 pages are availabe for public view |
Abstract يعتبر التهاب الضرع من اهم الامراض في الحيونات الحلابة ، لما له من أهميه اقتصاديه في الحد من إنتاج الحليب و تدميره للغدد اللبنية، علاوه علي ذلك فهو يؤثر على نوعية اللبن ويرتبط بكثير من الامراض في الانسان حيث يستخدم اللبن كناقل اساسي للعدوى . لذالك تم القيام بهذه الدراسه للتعرف علي التهاب الضرع الخفي لميكروب المكور العنقودي الذهبي في الابقارالحلابه المصريه مع التركيز علي التشخيص المبكر من خلال عزل وتصنيف ميكروب المكور العنقودي الذهبي والكشف الجزيئي لاهم عوامل الضراوه التي تعزز من صورته المرضيه. حيث تم تجميع 100 عينه البان لابقار مصابه بالتهاب الضرع الخفي من مختلف المزارع بمحافظه الشرقيه تحت ظروف صحيه خلال الفتره الممتده من يناير 2013 حتي مايو 2014. وقد تبين بالفحص البكتيريولوجي لهذه العينات وجود 61 حاله ايجابيه من المكورات العنقوديه الذهبيه بنسبه 61%، وقد كانت هذه العترات ايجابيه لصبغه الجرام تاخذ شكل عناقيد. وتم زراعة عينات الألبان على الآجار المغذى والآجار المحتوى على سكرالمانيتول وآجارالبيرد باركرلعزل عترات الميكروب المكور العنقودى الذهبى. وبتقييم دراسة الخواص الممرضة لميكروب المكور العنقودى الذهبى ثبت أن جميع العترات لديها القدرة على تكسيرالدم وتخثيردم بلازما الأرانب وحامله لانزيم الكاتاليزالمحلل لفوق اكسيد الهيدروجين. كما تمت دراسة العترات التي تم الحصول عليها في المختبرلقابليتها لأنماط من المضادات الحيوية المختلفة بطريقة انتشار القرص. وقد وجد أن اكثرالمضادات حساسيه هى فانكوميسين و جينتاميسين و سيبروفلوكساسين و كلورمفينيكول بنسبه 4, 93 و6, 83 و 82 و3 ,80 % علي التولي وفي نفس الوقت وجد ان اكثرالمضادات مقاومه هى اوكسيسيللين و الاريثروميسين بنسبه 59 و 7 ,55 علي التوالي والاقل مقاومه كانت التيتراسيكلين بنسبه 5 , 47%. بالإضافة إلى ذلك، كانت جميع العترات مقاومة لمضاد حيوى واحد على الأقل. تمثل المكورات العنقودية الذهبية متعددة المقاومة للمضادات الحيوية خطوره كبيره علي الصحة العامة وقد وجدت في هذه الدراسه بنسبه 46٪. في هذه الدراسه تم إجراء تفاعل البلمرة المتسلسل الاحادي على خمسه عشر عترة من ميكروب المكور العنقودي الذهبي تم تحديدها بالاختبار الكيميائي للكشف عن جين coa و جين بروتين (أ) (spa) الذي يشفر المنطقه المناعيهG وجينات التسمم المعوي (, sea, seb, sec sed and see) والجينات المسئوله عن المقاومه الميثيسلينيه وهي جين (femA and mecA). وقد اسفرت النتائج بان نسبه الكشف عن جين التجلط الخاص بالإنزيم الذي يحدث تخثر لبلازما الأرانب 100 % بأحجام مختلفة من 430إلى 630 قاعدة نيتروجينية، وظهرت 3 عينات عند القاعدة النيتروجينية 430 و3عينات اخري عند القاعدة النيتروجينية 570و9عينات عند القاعدة النيتروجينيه630. وبالكشف ايضا عن جينات التسمم المعوي تحقق ان 13 عتره منتجه للسم المعوي (A) و6 عترات منتجه للسم المعوي (B) و6 عترات ايضا منتجه للسم المعوي (C) ولا يوجد اي عتره من المكورات العنقوديه الذهبيه حامله للسم المعوي D) ) بينما وجد السم المعوي E)) في كل المعزولات العنقوديه الذهبيه. وباجراء تفاعل البلمره المتسلسل الاحادي للكشف عن الجين المسئول عن تكوين بروتين(أ) (spa) الذي يشفر المنطقه المناعيه G, فقد وجد ان كل المعزولات ايجابيه. علاوه علي ذلك لقد تم اجراء تفاعل البلمره المتسلسل المركب لكل من جينات التسمم المعوي sea, seb and see. وعند اختبار15سلالة من العترات المصنفة من المكور العنقودي الذهبي في الأبقار المصابة بالتهاب الضرع الخفي عن طريق استخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل المركب تم تحديد 7 سلالات منتجة للسم المعوى (A) وتحديد 4 سلالات منتجة للسم المعوى (B) وتحديد 8 سلالات منتجة للسم المعوى (E). بإجراء تفاعل البلمرة المتسلسل الاحادي و تفاعل البلمرة المتسلسل المركب للعترات المصنفة من المكور العنقودي الذهبي ظهرت احجام القواعد النيتروجينية للسموم المعوية ( ( A, B, C, D, E كالاتى 102و164 و451 و278 و209 قاعدة نيتروجينية بالتوالى. تم إجراء تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل المتعدد للكشف عن 2 من جينات المقاومة والتى لها دورهام فى مقاومة اهم المضادات الحيويه ضد بكتريا المكور العنقودي الذهبي وكانت هذه الجينات mecA and femA) ) وقد اثبتت الدراسات وجود هذه الجينات بنسبه100% في جميع عترات المكور العنقودي الذهبي ومن كل ما سبق يتضح ان كل العترات المقاومة للمضادات الحيويه المعزوله من مصادر مختلفة تحتوى على جينات الضراوة و جينات المقاومة للمضادات الحيويه محمله على البلازميد، و وجد ان اكثر العترات ضراوه هي اكثرها مقاومه للمضات الحيويه و هذا يعكس مدى خطورة انتشار المرض و انتقاله الى الانسان. |