Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Biological and molecular characterization for controlling mango malformation disease /
المؤلف
Hassan, Mohamed Esmail Abd El-Wahab.
هيئة الاعداد
باحث / Mohamed Esmail Abdel Wahab Hassan
مشرف / Mahmoud M.Hazza
مشرف / Wafaa Mohamed Haggag
مشرف / لايوجد
الموضوع
Mango cultivation.
تاريخ النشر
2011.
عدد الصفحات
170 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علوم النبات
تاريخ الإجازة
1/1/2011
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية العلوم - ميكروبيولوجى
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 200

from 200

Abstract

تعتبر المانجو من محاصيل الفاكهة الهامة فى مصر وكل انحاء العالم . طبقا لاحصائيات وزارة الزراعة واستصلاح الاراضى تقدر المساحة الاجمالية للمانجو بحوالى 151 ألف فدان بأجمالى انتاجية 596 مليون طن فى مصر ومتوسط محصول الفدان حوالى 5.41 طن.
يصيب أشجار المانجو كثير من الأمراض الفطرية والبكتيرية والفيروسية والفسيولوجية التى تؤثر على إنتاحية المحصول ومن أهم هذة الامراض مرض التشوة الزهرى بالمانجو الذى هو محل دراسة هذا البحث ويمكن تلخيص أهم النتائج كما يلى:
أختبارات مرضية :
1- أظهرت العينات التى تم تجميعها من أماكن مختلفة من محافظات الجمهورية وهم :البحيرة والجيزة والإسماعيلية أعراض التشوة وتكتل خضرى وزهرى بالمانجو وتلون الأوعية الداخلية .
2-أوضحت النتائج الفحص الميكروسكوبى الضوئى للعزلات التى تم عزلها من محافظات مختلفة أنة يوجد عديد من أنواع عزلات Fusarium التى تم عزلها من الشماريخ الخضرية الزهرية المتكتلة كالتالى : F. subglutinans, F. solani, F. oxyspoum, F. sterilihyphosum, F. proliferatum, F. moniliforme, F.avena F.chlamydspore و F. subglutinans .
3-اوضحت نتائج القدرة المرضية تحت ظروف العدوى الصناعية بالصوبة للعزلات المختلفة من فطريات Fusarium أن الفطر F. subglutinans هو المسبب الرئيسى للمرض وهى اقوى العزلات من حيث القدرة المرضية يليها F. oxysporum, sterilihyphosum and F.proliferatum F. و انهما يرتبطوا بحدوث الأصابة حيث أحداثا أصابة بنسب أقل سواء عند حقن التربة بجراثيم الفطريات أو حقن البراعم بنواتج الراشح الأيضى . بينما العزلات الأخرى أظهرت أعراض أعفان جذور .
4-أظهرت دراسة القدرة المرضية بأن الفطر Fusarium subglutinans هو المسبب الرئيسى لمرض التشوة الخضرى والزهرى أنة يصيب لجميع الأصناف المحلية والمستوردة
5-أوضحت نتائج الدراسات التشريحية للبراعم القمية للشتلات التى تم حقنها عن طريق التربة عن الكشف عن تشوه في البراعم ووجود مناطقق تحلل وتضخم للعزلات الممرضة بالمقارنة بالعزلات الغير محدثة للممرض.
6- كما أوضحت الدراسات بأستخدام الميكروسكوب الألكترونى الماسح عند الحقن بالمسبب الرئيسى للتشوة الزهرى هو F. subglutinans بعد ثلاثة أشهر من تلقيح التربة حدوث أعراض المرض تتضمن تكتل للبراعم الخضرية والزهرية وأنتشار فطر الفيوزاريوم في النسيج بتركيزات عالية فى الجذرو الأوعية والبراعم الجانبية والقمية .
7-ولمزيد من الدراسة ؛ خضعت هذه العزلات للدراسات التعريفية وتحاليل الشكل الظاهرى لخلايا وجراثيم تلك العزلات وعن طريق إستخدام البيئات الغذائية المتخصصة ومقارنتها بما ورد فى مفاتيح التعريف المعتمدة .
الإختبارات الكيميائية :
8 - أجريت دراسات لأنتاج هذة العزلات للتوكسينات السامة والمحدثة للتشوة وكذلك التغيرات الكيميائية فى الشتلات نتيجة الأصابة بالممرضات وقد أتضح الآتى:
•تم فصل و تقدير معدل أنتاج توكسين المونيليفورمين لفطريات الفيوزاريوم التى تم زراعتها على بيئات سائلة باستخدام جهاز التحليل الكروماتوجرافيا باستخدام السوائل ذات الضغط العالى (HPLC) وأظهرت النتائج مايلى :
أن أعلى أنتاج للمونيليفورمين للفطر F. subglutinans بمعدل 8.51 µg/ml بينما قدر بمعدل 6.90 µg/ml للفطر F.oxysporum و 6.30 µg/ml F.moniliforme و4.10 µg/ml للفطر F. proliferatum , بينما أنتجت الفطريات الأخرى كميات متوسطة من المونيليفورمين حيث أنتج الفطر F.avenacum ( 3.88 µg/ml ) , F.chlamydospore (.60 µg/ml ) و F. sterilihyphosum( ( µg/ml 1.10 .
• تم فصل و تقدير معدل أنتاج توكسين الفيومونسين لفطريات الفيوزاريوم التى سبق زراعتها على بيئات سائلة باستخدام جهاز التحليل الكروماتوجرافيا باستخدام السوائل ذات الضغط العالى (HPLC) وأظهرت النتائج أن أعلى معدل أنتاج للفيومونسين للفطر F.moniliforme ( 8.30 µg/ml ) ,وقد قدر بمعدل 8.30 µg/ml للفطر F .proliferatum و µg/ml.50 للفطر F.subglutinans بينما كان معدل انتاجة ضعيف بالنسبة للفطر F.avenacum (0.16 µg/ml ) , بينما لم تنتج لكل من فطر F.sterilihyphosum و F.oxysporum
•تم دراسة مدى استجابة النبات المصاب على مستوى الفيتوأليكسن المنجفرين والمسئول عن مقاومة أشجار المانجو للممرضات وذلك باستخدام جهاز التحليل الكروماتوجرافيا باستخدام السوائل ذات الضغط العالى (HPLC) لشتلات نامية فى تربة حقنت صناعيا بالممرضات الفطرية وأظهرت النتائج أن تركيز المنجفرين لشتلات المقارنة الغير محقونة وهو 0.96 µg/ g_1 FW بينما كان تركيزة فى الشتلات المصابة والمحقونة بفطر F. sterilihyphosum 0. 52 µg/ g_1 FW و F.subglutinans 0.15 µg/ g_1 FW و فطر F.oxysporum 0.0039 µg/ g_1 FW و بفطر F.proliferatum 0.12 µg/ g_1 FW دراسات بيولوجيا الجزيئية
9- أجريت أختبارات تشخيصية على المستوى الجزئيى لدراسة القرابة بين فطريات الفيوزاريوم للربط بين أنتاجها للمواد السامة والبروتينات والقدرة المرضية وقد تبين التالى:
•أستخلصت البروتبنات للعزلات الفطرية المسببة للمرض باستخدام تحليل التفريد الكهربى للبروتينات (الإلكتروفوريسيس ) وعلية اتضح وجود أحزمة بروتينات مميزة لكل فطر على حدة ووجود بعض الحزم البروتينية المشتركة بين بعض الفطريات الممرضة والمنتجة للتوكسين
•تم التمييز على مستوى الحامض النووى DNA)) لكل من العزلات الفطرية الممرضة وتم عمل البصمة الجزيئية للحامض النووى عن طريق إجراء تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل (PCR) باستخدام تتابع عشوائى لثلاث النيوكليوتيدات للحامض النووى (RAPD Primers) وعلية اتضح وجود بعض أجزاء من الحامض النووى DNA)) مميزة لكل فطر على حدة ووجود بعض أجزاء من الحامض النووى DNA) المشتركة بين بعض الفطريات وتم عمل أيضا شجرة الصلة او القرابة بين الفطريات واوضحت وجود وجة تشابة بين F. proliferatum وفطر F.sterilihyphosumوايضا صلة القرابة بين F.moniliforme وبين F.subglutinans ووجود تشابة بين فطر F.oxysporum وبين فطر F.chlamydospore ؛واوضحت النتائج ووجود صلة قرابة بين فطر F.subglutinans وبين فطر ى F. Proliferatum و F.sterilihyphosum. وأوضحت النتائج وجود صلة قرابة بين فطر F.sterilihyphosum وبين الفطريات F.subglutinansو F.moniliformeو F.sterilihyphosum و. F. proliferatum
الأختبارات الحيوية:
10- تهدف هذة الدراسة الى انتاج مواد بيواوجيه نشطه جهازية و ذات تأثير مضاد لفطريات الفيوزاريم من عزلات ميكروبية والغير ضارة بالإنسان والبيئة وكذلك المحصول الناتج والمعد للتصدير بهدف تقليل استخدام المبيدات الكيميائية لأضرارها البيئية المختلفة بدلا من المبيدات الكيميائيه لكى تساهم فى تقليل التلوث البيئيى ولذا:
•تم إجراء دراسة لاختبار النشاط التضادى لبعض كائنات المكافحة الحيوية وهى: Trichoderma harzianum, T. longibrachiatmu, T. hamatum, T. koningii, T. viride and T. roseeii , Penicillium oxalicum, Bacillus brevis, Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida, Paenobacillus polymyxa, Streptomyces hygroscopicus and Streptomyces aureofaciens ضدالفطريات الممرضة والمسببة للتشوة , وهى كل من F. sterilihyphosum., F. subglutinans, F. oxysporum, F .proliferatum
•تم اختيار تلك العزلات وتنميتها على البيئة الغذائية السائلة وتحضينها باستخدام جهاز هزاز سرعة 250 لفة في الدقيقة لمدة ثمانية أيام وبعد إنتهاء فترة التحضين تم ترشيح المنبت الغذائي وإجراء إختبارات أخرى لراشح هذه العزلات. تم عمل إختبار لراشح هذه العزلات لتثبيط فطريات الفيوزاريم تحت الإختبار وقد حيث أمكن الحصول علي ستة عزلات لهما نشاط تضادى متميز كأقوى العزلات نشاطا وهى Trichoderma harzianum, Penicillium oxalicum, Bacillus brevis, Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida, and Streptomyces aureofaciens وأستخدمت فى الدراسة التالية.
•تحت ظروف الأصابة الطبيعية بالحقل فقد أظهر أن رش اشجار المانجو صنفى الصديق وعويس بمنطقة النوبارية براشح المنتج الأيضى لهذة العزلات و المحملة مع مواد جيلاتينية عديدة التسكر الى حدوث مكافحة معنوية لمرض التشوة الخضرى والزهرى وقورنت ببعض المواد الكيميائية الطبيعية مثل عديد الأمين ومضاد الأكسدة والكنترول.
•كان أفضل المعاملات وهى: Streptomyces aureofaciens و Pseudomonas putida و Trichoderma harzianum
•وقد أدت بعضها الى زيادة جميع مقاييس النمو كما كان المحصول متمثلا فى كمية الثمار أعلى معنويا بالمقارنة بنباتات الكونترول الغير معاملة