الفهرس 
Chapter I : IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 153 |  |  |
| | | from | 153 | | |
Abstract
يصيب مرض الحُمَّى العابرة الأبقار و الجاموس ، و هو مرض فيروسي يسبب خسائرَ إقتصاديةَ كبيرة نتيجة نسبة الإصابة المرتفعةِ و النقص الحادّ في إنتاجِ اللبن و اللحمَ َ، بالأضافة إلى المضاعفات المرضَية ومحاولاتَ العلاج المكلفة. يسبب المرض فيروسِ ينتمى إلى عائلةِ الرابيدو جنس الإفيميروفيروس وهو ينتقل عن طُريق الحشراتِ ماصة الدمِاء.
• لقد سجلت أوبئة عديدة من المرض في العديد مِنْ مناطقِ أستراليا وآسيا وأفريقيا بما فيها مصر.
• هذا و يَعتمدُ تشخيصُ الحُمَّى العابرةِ على العزلِ والكشف السيرولوجى عن أنتيجين الفيروس ، وعلى ذلك فإن الدراسة الحالية تهدف لإستخدام تقنياتِ جزيئية عاليةِ السرعةِ والتخصص والحسّاسيةِ لعزل و تشخيص إثنتان من المعزولات المحلية للفيروس من ابقار و جاموس مصابة طبيعياً.
• و قد أظهرت التجارب التطبيقية ما يلى:
1– بإستخدام إختبار المصل المتعادل للكشف عن الأجسام المضادة الخاصة بفيروس الحمى العابرة للماشية فى 180 من عينات أمصال الماشية السليمة ظاهرياً (100من الأبقار و 80 من الجاموس) من مناطق مختلفة فى محافظة القليوبية وجد أن 21 من 100 عينة(21 %) من الأبقار و 6 من 80 (7.5 %) من الجاموس كانت إيجابية لوجود الأجسام المناعية المضادة لفيروس الحمى العابرة، و كان مستوى هذه الأجسام يتراوح بين 2 و32 فى عينات أمصال الأبقار و بين 2 و4 فى عينات أمصال الجاموس.
2- تمت محاولات لعزل فيروس الحمى العابرة من عينات خلايا الدم البيضاء للأبقارِ والجاموسِ المصاب من مناطق مختلفة فى محافظة القليوبية و ذلك بالتمرير المتتالى لثلاث مرات فى الفئران السويسرية الرضيعة بالحقن فى المخ ، حيث ظهرت علامات مرضية مميزة فى الفئران المحقونة فى خمسة من خمس عشرة عينة للأبقار وإثنتان من سبعة عينات من الجاموسِ ، وقد تميزت الأعراض فى الفئران بالإضطرابات العصبية و شلل بالأطراف و زرقة بالجسم من اليوم الثانى للحقن وإنتهت بالنفوق فى اليوم الثالث بعد الحقن.
3- أظهرت محاولات تمرير الفيروس المتحصل عليه من العينات الإيجابية بعد التمرير على رضيع الفئران السويسرية بالتمرير العشوائى المتتالى لثلاث مرات على خلايا كلى رضيع الجربوع السورى المستمرة تأثير مرضي مميز فى الخلايا المعدية فى خمسة عينات للأبقار وإثنتان للجاموسِ ، تمثلت فى إ ستدارة الخلايا و تجمعها ثم انفصالها من سطح الإستزراع و مشابهة لما احدثته العترة المرجعية للفيروس.
4 - بمعايرة معزولات الفيروس المتحصل عليها من الأبقار و الجاموس و العترة المعلومة لفيروسِ الحُمَّى العابرةِ على خلايا كلى رضيع الجربوع السورى المستمرة تم تسجيل أعلى معيار للمعزولات المحلية من الأبقار والجاموس (10 6جرعة نصف معدية للزرع النسيجى/ مل) وكذلك من العترة المعلومة (10 7.5جرعة نصف معدية للزرع النسيجى/ مل) بعد التمريرة الثالثة.
5 – تم إستخدام إختبارالمصل المتعادل للفيروس بنجاح للكشف عن العترة المعلومة و المعزولات المحلية لفيروس الحمى العابرة للماشية بإستخدام مصل مناعى نوعى مضاد للفيروس.
6- أظهرت الدراسة كذلك أن بداية ظهور العلامات المرضية على الخلايا المعدية كانت بعد 72 ساعة فى التمريرة الأولى ثم بعد 48 ساعة فى التمريرة الثانبة و تصل إلى أقصى درجاتها بعد 120 ساعة من العدوى فى كل التمريرات الخاصة بالعترات المعزولة ، بينما كانت بداية ظهورالعلامات المرضية على الخلايا المحقونة بعد 24 ساعة من الحقن فى كل التمريرات مع العترة المرجعية للفيروس و تصل إلى أقصى درجاتها بعد 72 ساعة من الحقن فى كل التمريرات.
7 –تم تطويع إختبار اللطع المناعى النقطى للكشف السيرولوجى عن فيروس الحمى العابرة للماشية بإستخدام مصل مناعى نوعى مضاد للفيروس ، وقد أظهر نتائج إيجابية مع العترة المعلومة و المعزولات المحلية للفيروس و ذلك على شكل بقع زرقاء داكنة اللون على غشاء النيتروسيليلوز، بينما لم تظهر العينات السلبية والعينات الحقلية الأخرى أى ألوان على الغشاء وكان إختباراً تأكيدياً حساساً ومتخصصاً للكشف السيرولوجى السريع عن فيروس الحمى العابرة.
8 - –تم تطبيق إختبار ويسترن اللطعى للكشف عن بروتينات فيروس الحمى العابرة للماشية بإستخدام مصل مناعى نوعى مضاد للفيروس ، و قد أظهر العدد المميز من طبقات البروتين ذات الوزن الجزيئى المميزة لفيروس الحمى العابرة للماشية دون أى إختلاف بين العترة المعلومة و المعزولات المحلية للفيروس، و هو ايضاً إختبار سريع وتأكيدي حساس و متخصص للكشف السريع عن فيروس الحمى العابرة .
9- تم تطبيق إختبار تفاعل البلمرة المتسلسل العكسى لنسخ مُنتَج طوله 473 قاعدة مزدوجة للكشفِ الجزيئيِ عن جين G2 للعترات المختلفة لفيروس الحمى العابرة للماشية، و بتحليل المنتج الخاص بإختبار تفاعل البلمرة المتسلسل العكسى بإستخدام نظامِ توثيقِ الجل لم تظهر أي إختلافاتِ هامّةِ في وزن المُنتَجَ الجزيئي للعترات المختلفة للفيروس.أظهرت نتائج تجربةِ إختبار تفاعل البلمرة المتسلسل العكسى أنّه إختبار تأكّيدي عالى الحساسية و التخصص و السرعة للكشف عن فيروس الحمى العابرة للماشية و الذى أَكّد أيضاً على دقةَ وتخصصَ إختبارى اللطع المناعى النقطى وويسترن اللطعى كطرق سريعة للكشف عن فيروس الحمى العابرة.
مما سبق يمكن القول بأنه لا يوجد اى إختلاف بين عترات فيروس الحمى العابرة المعزولة من الأبقار و الجاموس و العترة المرجعية و أن كل من إختبار اللطع المناعى النقطى ، إختبار ويسترن اللطعى و إختبار تفاعل البلمرة المتسلسل إخيبارات سريعة و نوعية و دقيقة للكشف عن فيروس الحمى العابرة.